前文已經(jīng)說明DET 1和COP10作用于正負調(diào)控種子萌發(fā)的蛋白PIF1的上游，我們在此介紹其調(diào)控機制璃哟。運用酵母雙雜交很容易看出PIF1與兩者有直接作用，并且發(fā)現(xiàn)其與PIF1的結合區(qū)域與和之前HFR1的相同风皿，都位于氨基端的26到87氨基酸殘基盏浇。運用BiFC和LCI技術在植物細胞的進一步研究表明，在細胞核處其與兩者有強烈結合蚀瘸，并都能表現(xiàn)高熒光素酶活性狡蝶。
? 與之前報導光抑制PIF1分解一致，我們發(fā)現(xiàn)其在暗環(huán)境下累積贮勃，而在紅光下含量極少贪惹。非常明顯的是，在DET1缺失條件下寂嘉，即便是暗培養(yǎng)的種子奏瞬，其PIF1水平急劇下降枫绅。我們再進行無細胞降解實驗以進一步說明PIF1降解機制。在D4條件下的野生型種子的提取物中加入純PIF1丝格，2h內(nèi)很穩(wěn)定撑瞧。而在DET1和COP10-4缺失體中則急劇下降，甚至快于紅光處理的野生體显蝌。另外预伺，MG132處理可以將DET1突變體中PIF1降至正常野生水平。
? 因此曼尊，得出酬诀，DET1通過阻止26 S蛋白酶體介導的PIF1降解來穩(wěn)定PIF1蛋白。
