使用抗生素是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用方法寥裂,有許多篩選實(shí)驗(yàn)都需要用到抗生素早龟。
下面整理部分抗生素的配置方法:
Amp 氨芐青霉素(Ampicillin)(100mg/ml)
溶解1g Amp鈉鹽于足量的水中,定容至10ml扛拨。分裝耘分,-20℃貯存。常以25ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基绑警。
Km 卡那霉素(Kanamycin)(50mg/ml)
溶解0.5g Km于足量的水中陶贼,定容至10ml。分裝待秃,-20℃貯存拜秧。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
Cm 氯霉素(Chloramphenicol)(50mg/ml)
溶解0.5g Cm于足量的無水乙醇中章郁,定容至10ml枉氮。分裝,-20℃貯存暖庄。常以50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基聊替。
Tc 四環(huán)素(Tetracycline)(5mg/ml)
溶解50mg Tc于無水乙醇,定容至10ml培廓。分裝成小份用鋁箔包裹裝液管以免溶液見光惹悄,-20℃貯存。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基肩钠。
Str 鏈霉素( Streptomycin)(50mg/ml)
溶解0.5g Str硫酸鹽于足量的無水乙醇中泣港,定容至10ml。分裝价匠,于-20℃貯存当纱。常以10ug/ml~50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基。
Rif 利福平 (Rifampicin)(50mg/ml)
溶解0.5g Rif于足量的DMSO(二甲亞砜)中踩窖,定容至10ml坡氯。分裝,-20℃貯存洋腮。常以50ug/ml的終濃度添加于生長培養(yǎng)基箫柳。
利福平為橙紅色片狀結(jié)晶或磚紅色結(jié)晶粉末。在183-188℃分解啥供。易溶于氯仿和二甲基亞砜悯恍,溶于乙酸乙酯、甲醇和四氫呋喃滤灯,溶于水(pH<6)坪稽、丙醇和四氯化碳曼玩。干燥粉末可穩(wěn)定5年以上,其水溶液在室溫10h失效窒百,但加入還原劑(如抗環(huán)血酸)可減少分解黍判,在二甲亞砜中極穩(wěn)定。
利福平溶解性:可溶于DMSO(100 mg/ml)篙梢、DMF顷帖、甲醇(16mg/ml)、氯仿(349mg/ml)渤滞、乙酸乙脂(108mg/ml)贬墩、丙酮(14mg/ml)、水(2.5 mg/ml, pH 7.3;1.3mg/ml,pH4.3)妄呕、95%乙醇(10mg/ml)陶舞、0.1N HCl(200mg/ml)、PBS(9.9mg/ml,pH7.4)绪励。
Gm 慶大霉素 (Gentamicin)(50mg/ml)
溶解0.5g Gm于足量的水中肿孵,定容至10ml。分裝疏魏,-20℃貯存停做。
Spe壯觀霉素(Spectinomycin)(100mg/ml)
溶解1g Spe于足量的水中,定容至10ml大莫。分裝蛉腌,-20℃貯存。
乙酰丁香酮(AS)(0.1M)
0.0196g 乙酰丁香酮溶于1ml DMSO只厘。過濾滅菌后100ul/管分裝烙丛,-20℃貯存。
以上抗生素均需要在超凈臺(tái)中使用滅菌濾頭過濾懈凹,其中水溶液使用水相濾頭過濾(MILLEX GP PES)蜀变,有機(jī)溶液使用有機(jī)相濾頭過濾(GV PVDF)。