上期我們介紹了藥物代謝物定量常用的方法——直接定量法。該法需要注意的兩點：第一個是一些代謝物比母體藥物更具親水性少孝，尤其是葡萄糖醛酸继低，這加大了代謝物直接定量的難度，隨著液相色譜串聯(lián)質譜儀的出現(xiàn)稍走，我們克服了這一問題袁翁，因此LC-MS/MS常用于在藥代動力學和代謝研究柴底。第二個是需要合適的對照標準物質來保證代謝物結果的可靠性和準確性，但代謝物標準品有的無法買到或價格比較貴粱胜。后來各類檢測器的出現(xiàn)柄驻，解決了標準品的問題。其實藥物代謝物定量除了用直接定量法外年柠，還可以利用藥物與其代謝物之間的響應因子進行定量凿歼。那么接下來褪迟，小編就帶大家一起看看響應因子是如何進行定量的冗恨。
響應因子定量法
使用響應因子定量法的前提是藥物和所有代謝物都可以實現(xiàn)色譜分離。響應因子定量是基于LC-MS/MS與檢測器相結合味赃，該檢測器提供每個化合物的摩爾響應值掀抹，通常用RAD檢測器。代謝物和母體藥物在RAD上的響應值與在LC-MS/MS的響應值比有關聯(lián)心俗。樣品中的低水平的代謝物和母體藥物通過靈敏度高的LC-MS/MS進行測量傲武，利用RAD檢測響應因子，從而可以計算代謝物濃度城榛。最佳分析方法是在液相色譜分離后結合RAD和MS揪利，以便在兩個檢測器上以相同的保留時間獲得代謝物和母體藥物的峰。由于RAD的動態(tài)范圍較大狠持，因此非常適合于此類代謝物分析疟位，但它的使用受到放射性標記標準物質的可用性的限制。
LC-MS/MS最常用的檢測器是紫外檢測器喘垂，在代謝物和母體藥物發(fā)色團具有足夠的選擇性甜刻，不受代謝的影響，代謝物與其他藥物相關物質和內源性化合物可以很好的分離的情況下正勒，代謝物可使用紫外檢測器進行（半）定量分析得院。
這種方法在一定的標準下對代謝物定量也可能是合理的。在確定響應因子后章贞，根據母體藥物的標準曲線對代謝物進行定量祥绞。響應系數必須保持恒定，因此需要定期對響應系數進行驗證鸭限。使用相同且無故障的儀器蜕径，反應因子在長時間內還是非常穩(wěn)定的。
本文由迪信泰檢測平臺（Biotech-Pack-Analytical）整理編輯里覆，轉載請注明出處丧荐。
迪信泰檢測平臺以液相/氣相為依托，組建高效液相色譜HPLC喧枷、液相色譜-質譜LC-MS虹统、氣相色譜-質譜GC-MS等技術平臺弓坞，致力于為各科研院所，高校车荔，藥企渡冻，生物工程類企業(yè)提供高效、準確忧便、高性價比的小分子化合物檢測技術包裹族吻。
參考資料：Roskar, Robert , and T. Trdan . Analytical Methods for Quantification of Drug Metabolites in Biological Samples. Chromatography - The Most Versatile Method of Chemical Analysis. 2012.
