一暇检、實驗原理dunhao
MTT全稱為3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，中文名噻唑藍喘漏。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源底物MTT還原為不溶于水的藍紫色甲臜(Formazan)并沉積在細胞中护蝶，而死細胞無此功能华烟。再利用二甲基亞砜(DMSO)等溶解劑溶解細胞中的甲臜沉積物翩迈，用酶標儀于490 nm或570 nm波長處測定其光吸收值，在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)盔夜，甲臜形成的量與活細胞數(shù)成正比负饲。MTT應用包括藥物敏感性堤魁、細胞毒性、對生長因子的反應和細胞活化返十。MTT檢測法具有高度的敏感性妥泉、可重復性，并適用于高通量篩選洞坑。
CCK8作為MTT方法的優(yōu)化升級盲链，WST-8在電子耦合試劑的輔助下，能在線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶的作用下迟杂，迅速轉(zhuǎn)化為高水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物（formazan）刽沾，其顏色的深淺直觀反映了細胞的增殖活力與毒性水平——增殖越強，顏色越深排拷；毒性越大侧漓，顏色則越淺。通過酶標儀在450nm波長下的精確測量OD值监氢，即可間接量化活細胞數(shù)量布蔗，實現(xiàn)高效、靈敏的檢測浪腐。
MTT與CCK8是細胞增殖與毒性檢測實驗中代表性的高靈敏度檢測試劑盒纵揍，應用范圍極為廣泛，包括但不限于藥物篩選過程中的細胞反應評估议街、細胞增殖速率的精確測定骡男、細胞毒性測試、腫瘤細胞的藥敏性分析及生物活性因子的效能檢測等傍睹，是科研工作者不可或缺的得力工具隔盛。CCK8法因其操作簡便、靈敏度高拾稳、對細胞低毒性等優(yōu)點吮炕，在更多領(lǐng)域得到了廣泛應用。
二访得、細胞活力/毒性檢測試劑盒應用
細胞活力/毒性檢測試劑盒（MTT/CCK8）用于以96孔板的形式對細胞的增殖和活力進行非放射性的光譜檢測：
＞測量生長因子龙亲、激素、促分裂因子及各種營養(yǎng)物質(zhì)對細胞增殖的影響
＞細胞毒性和細胞抑制化合物分析悍抑，如抗癌藥物和其他藥物化合物的分析
＞生長抑制性抗體和生理性調(diào)節(jié)因子的評估
＞評估細胞的增殖能力鳄炉，用于繪制細胞生長曲線、監(jiān)測細胞增殖速度
三搜骡、細胞活力/毒性檢測試劑盒優(yōu)勢比較
四拂盯、CCK8額外優(yōu)勢
＞酚紅和血清對CCK-8法的檢測不會造成干擾；細胞毒性非常低记靡，因此加入試劑顯色后谈竿，可以在不同時間反復用酶標儀讀數(shù)從而找到最佳測定時間团驱；
＞同時也可以去除含CCK8的培養(yǎng)基，添加新鮮培養(yǎng)基空凸；以使用細胞進行其他實驗嚎花，MTT無法實現(xiàn)這種操作；
＞MTT由于需要吸走培養(yǎng)基并更換DMSO溶解液呀洲，因此不適用于懸浮細胞檢測紊选，CCK8由于無需換液，完美適用懸浮細胞道逗；
五丛楚、細胞活力/毒性檢測試劑盒產(chǎn)品示例
以CCK8法為例：
＞實驗一、測試試劑線性
接種已知數(shù)量的細胞憔辫，使用CCK8試劑孵育2h后采用酶標儀檢測OD450趣些，確定產(chǎn)品顯色值與細胞數(shù)量線性關(guān)系，驗證試劑盒工作是否正常贰您。結(jié)果顯示顯色值（已減去空白孔本底OD值）與細胞數(shù)量呈良好線性關(guān)系坏平，試劑盒可以有效工作。
＞實驗二锦亦、細胞因子刺激實驗
接種固定數(shù)量細胞舶替，再添加不同濃度的細胞因子，檢測細胞因子對細胞刺激效果杠园。檢測結(jié)果顯示顾瞪，試劑盒檢出GM-CSF對TF-1細胞ED50約100-500pg/mL，添加1-2ng/mL GM-CSF可以達到最大使用效果抛蚁。
＞實驗三陈醒、細胞增殖實驗
六、細胞活力/毒性檢測試劑盒產(chǎn)品列表
