一莺琳、在NCBI上下載rRNA的fasta序列挫望,用于建立索引
打開(kāi)NCBI,select “Taxonomy
” and search for “sheep
“
點(diǎn)擊 Ovis aries
點(diǎn)擊 Ovis aries(sheep)
右邊表格Click on the “Subtree links
” for Nucleotide
:
左邊選擇rRNA(281)
選擇顯示200perpage
咆蒿,讓所有記錄都放在一頁(yè),以便下載全部的條目
點(diǎn)擊send to
,設(shè)置為上圖的參數(shù),點(diǎn)擊create file
二桐猬、bowtie2建立rRNA索引
下載bowtie2
conda install -y bowtie2
建立索引
bowtie2-build sheep_rRNA.fasta sheep_rRNA
三、利用bowtie2去除rRNA
針對(duì)單端測(cè)序文件(single-end)
bowtie2 -x /public/jychu/reference/index/bowtie2/sheep/rRNA/sheep_rRNA --un-gz ${i}_IP_rmrRNA.fastq.gz -U ${i}_IP.read1_Clean.fastq.gz -p 8 -S ${i}_rRNA.sam; rm ${i}_rRNA.sam
針對(duì)雙端測(cè)序文件(paired-end)
bowtie2 -x /public/jychu/reference/index/bowtie2/sheep/rRNA/sheep_rRNA -1 T_F2a_1_1.fq.gz -2 T_F2a_1_2.fq.gz --un-conc-gz T_F2a_input_rmrRNA.fastq.gz -p 8 -S T_F2a_rRNA.sam; rm T_F2a_rRNA.sam;
結(jié)果如下
-rw-r--r-- 1 jychu jychu 2.5G Oct 21 2017 T_F2a_1_1.fq.gz
-rw-r--r-- 1 jychu jychu 2.9G Oct 21 2017 T_F2a_1_2.fq.gz
-rw-rw-r-- 1 jychu jychu 558M Mar 7 22:03 T_F2a_input_rmrRNA.fastq.1.gz
-rw-rw-r-- 1 jychu jychu 609M Mar 7 22:03 T_F2a_input_rmrRNA.fastq.2.gz
(參考鏈接:http://www.reibang.com/p/10477f96f12e)
bowtie 去核糖體RNA
下載bowtie
conda install -y bowtie
建立索引
**bowtie-build sheep_rRNA.fasta sheep_rRNA**
去核糖體RNA
bowtie -v 3 --norc /public/jychu/reference/index/bowtie/sheep/rRNA/sheep_rRNA -q <input>.fastq --un <output>.fastq