高通量測(cè)序中的接頭(adapter)到底是什么

主要參考 祝讓飛 的文章及 Tufts 網(wǎng)站中的信息慎宾,特此致謝狡汉。


首先放一張測(cè)序示意圖,在DNA片段兩端所加的序列即接頭序列瀑罗,也就是我們今天要講述的主角胸嘴。

測(cè)序示意圖

1 基本概念

1.1 adapter

接頭,為一段已知的短核苷酸序列斩祭,用于鏈接未知的目標(biāo)測(cè)序片段

1.2 index或barcode

幾個(gè)堿基組成的寡核苷酸鏈劣像,用于在混合測(cè)序時(shí),區(qū)分不同樣本

1.3 insert

待測(cè)序的目標(biāo)序列摧玫,位于兩個(gè)adapter之間

測(cè)序片段示意圖

測(cè)序片段包括幾個(gè)部分:universal_adapter-insert-indexed_adapter耳奕。

測(cè)序由5'端開(kāi)始,最開(kāi)始的幾個(gè)堿基無(wú)法測(cè)得诬像,第一個(gè)adapter在數(shù)據(jù)輸出時(shí)去除屋群,由于測(cè)序讀長(zhǎng)的限制,第二個(gè)adapter通常測(cè)不到坏挠。

但是如果插入片段本身較短芍躏,測(cè)序會(huì)測(cè)穿,即會(huì)得到 insert-部分adapter 這樣的read降狠,這里的adapter便是我們常常提到的需要去除的接頭部分对竣。

2 序列信息

2.1 接頭序列(示例)

universal adapter:

5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT-3’

indexed adapter:

5’-GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCAC(barcode)ATCTCGTATGCCGTCTTCTGCTTG-3’

仔細(xì)看上面這對(duì)接頭序列,universal adapter的3'末端的T與待測(cè)片段新增的A配對(duì)榜配,那么剩余序列的反向互補(bǔ)鏈為
GATCGGAAGAGCGTCGTGTAGGGAAAGAGTGTAGATCTCGGTGGTCGCCGTATCATT

與 indexed adapter 的前面12個(gè)堿基一致
GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGTCAC否纬,即兩段接頭序列部分互補(bǔ),形成Y型的結(jié)構(gòu)芥牌。

2.2 index序列

可根據(jù)fastq序列中的信息獲取

@HWI-ST1276:71:C1162ACXX:1:1101:1208:2458 1:N:0:CGATGT

fastq的格式信息不再贅述烦味,第一行最末的 CGATGT 即本次測(cè)序所使用的index。

3 去接頭的軟件

常見(jiàn)的相關(guān)軟件包括 Trimmomatic壁拉、cutadapt谬俄、fastx_toolkit、fastp 等弃理。

關(guān)于Trimmomatic的使用溃论,可以參見(jiàn)wangpeng905的文章,介紹很全面痘昌。

最后編輯于
?著作權(quán)歸作者所有,轉(zhuǎn)載或內(nèi)容合作請(qǐng)聯(lián)系作者
  • 序言:七十年代末钥勋,一起剝皮案震驚了整個(gè)濱河市炬转,隨后出現(xiàn)的幾起案子,更是在濱河造成了極大的恐慌算灸,老刑警劉巖扼劈,帶你破解...
    沈念sama閱讀 216,324評(píng)論 6 498
  • 序言:濱河連續(xù)發(fā)生了三起死亡事件,死亡現(xiàn)場(chǎng)離奇詭異菲驴,居然都是意外死亡荐吵,警方通過(guò)查閱死者的電腦和手機(jī),發(fā)現(xiàn)死者居然都...
    沈念sama閱讀 92,356評(píng)論 3 392
  • 文/潘曉璐 我一進(jìn)店門(mén)赊瞬,熙熙樓的掌柜王于貴愁眉苦臉地迎上來(lái)先煎,“玉大人,你說(shuō)我怎么就攤上這事巧涧∈硇” “怎么了?”我有些...
    開(kāi)封第一講書(shū)人閱讀 162,328評(píng)論 0 353
  • 文/不壞的土叔 我叫張陵谤绳,是天一觀(guān)的道長(zhǎng)占锯。 經(jīng)常有香客問(wèn)我,道長(zhǎng)缩筛,這世上最難降的妖魔是什么烟央? 我笑而不...
    開(kāi)封第一講書(shū)人閱讀 58,147評(píng)論 1 292
  • 正文 為了忘掉前任,我火速辦了婚禮歪脏,結(jié)果婚禮上,老公的妹妹穿的比我還像新娘粮呢。我一直安慰自己婿失,他們只是感情好,可當(dāng)我...
    茶點(diǎn)故事閱讀 67,160評(píng)論 6 388
  • 文/花漫 我一把揭開(kāi)白布啄寡。 她就那樣靜靜地躺著豪硅,像睡著了一般。 火紅的嫁衣襯著肌膚如雪挺物。 梳的紋絲不亂的頭發(fā)上懒浮,一...
    開(kāi)封第一講書(shū)人閱讀 51,115評(píng)論 1 296
  • 那天,我揣著相機(jī)與錄音识藤,去河邊找鬼砚著。 笑死,一個(gè)胖子當(dāng)著我的面吹牛痴昧,可吹牛的內(nèi)容都是我干的稽穆。 我是一名探鬼主播,決...
    沈念sama閱讀 40,025評(píng)論 3 417
  • 文/蒼蘭香墨 我猛地睜開(kāi)眼赶撰,長(zhǎng)吁一口氣:“原來(lái)是場(chǎng)噩夢(mèng)啊……” “哼舌镶!你這毒婦竟也來(lái)了柱彻?” 一聲冷哼從身側(cè)響起,我...
    開(kāi)封第一講書(shū)人閱讀 38,867評(píng)論 0 274
  • 序言:老撾萬(wàn)榮一對(duì)情侶失蹤餐胀,失蹤者是張志新(化名)和其女友劉穎哟楷,沒(méi)想到半個(gè)月后,有當(dāng)?shù)厝嗽跇?shù)林里發(fā)現(xiàn)了一具尸體否灾,經(jīng)...
    沈念sama閱讀 45,307評(píng)論 1 310
  • 正文 獨(dú)居荒郊野嶺守林人離奇死亡卖擅,尸身上長(zhǎng)有42處帶血的膿包…… 初始之章·張勛 以下內(nèi)容為張勛視角 年9月15日...
    茶點(diǎn)故事閱讀 37,528評(píng)論 2 332
  • 正文 我和宋清朗相戀三年,在試婚紗的時(shí)候發(fā)現(xiàn)自己被綠了坟冲。 大學(xué)時(shí)的朋友給我發(fā)了我未婚夫和他白月光在一起吃飯的照片磨镶。...
    茶點(diǎn)故事閱讀 39,688評(píng)論 1 348
  • 序言:一個(gè)原本活蹦亂跳的男人離奇死亡,死狀恐怖健提,靈堂內(nèi)的尸體忽然破棺而出琳猫,到底是詐尸還是另有隱情,我是刑警寧澤私痹,帶...
    沈念sama閱讀 35,409評(píng)論 5 343
  • 正文 年R本政府宣布脐嫂,位于F島的核電站,受9級(jí)特大地震影響紊遵,放射性物質(zhì)發(fā)生泄漏账千。R本人自食惡果不足惜,卻給世界環(huán)境...
    茶點(diǎn)故事閱讀 41,001評(píng)論 3 325
  • 文/蒙蒙 一暗膜、第九天 我趴在偏房一處隱蔽的房頂上張望匀奏。 院中可真熱鬧,春花似錦学搜、人聲如沸娃善。這莊子的主人今日做“春日...
    開(kāi)封第一講書(shū)人閱讀 31,657評(píng)論 0 22
  • 文/蒼蘭香墨 我抬頭看了看天上的太陽(yáng)聚磺。三九已至,卻和暖如春炬丸,著一層夾襖步出監(jiān)牢的瞬間瘫寝,已是汗流浹背。 一陣腳步聲響...
    開(kāi)封第一講書(shū)人閱讀 32,811評(píng)論 1 268
  • 我被黑心中介騙來(lái)泰國(guó)打工稠炬, 沒(méi)想到剛下飛機(jī)就差點(diǎn)兒被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留焕阿,地道東北人。 一個(gè)月前我還...
    沈念sama閱讀 47,685評(píng)論 2 368
  • 正文 我出身青樓首启,卻偏偏與公主長(zhǎng)得像捣鲸,于是被迫代替她去往敵國(guó)和親。 傳聞我的和親對(duì)象是個(gè)殘疾皇子闽坡,可洞房花燭夜當(dāng)晚...
    茶點(diǎn)故事閱讀 44,573評(píng)論 2 353

推薦閱讀更多精彩內(nèi)容