RT—PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）是將RNA的反轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。
原理是提取組織或細(xì)胞中的總RNA或者mRNA敢伸，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下將RNA或者mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以該cDNA第一鏈為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增恒削，根據(jù)靶基因設(shè)計用于PCR擴(kuò)增的基因特異的上下游引物池颈，基因特異的上游引物與cDNA第一鏈退火，在Taq DNA聚合酶作用下合成cDNA第二鏈钓丰。再以cDNA第一鏈和第二鏈為模板躯砰，用基因特異的上下游引物PCR擴(kuò)增獲得大量的cDNA。
Real-time PCR（實時熒光定量PCR）也可以縮寫為RT—PCR携丁，此外還有一個qPCR（Quantitative Rea-ltime-PCR ）琢歇，有人可能將這三者搞混。
其實Rea-ltime-PCR和 qPCR（Quantitative Rea-ltime-PCR ）都是指實時定量PCR梦鉴，即在PCR進(jìn)行的同時李茫，對其過程進(jìn)行實時監(jiān)測，可以對起始模板數(shù)量進(jìn)行精確的分析肥橙。并且國際上的約定俗成的是：RT-PCR特指反轉(zhuǎn)錄PCR魄宏，而Real-time PCR一般縮寫為 qPCR（quantitative real-time PCR）。
RT-PCR的方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于RNA的構(gòu)造解析存筏、cDNA的克隆及RNA水平上的表達(dá)解析等多種領(lǐng)域宠互。
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