隨著新冠疫情在國(guó)外的不斷數(shù)量擴(kuò)增醉冤，很多公司研發(fā)了特異性核酸和蛋白水平檢測(cè)的不同試劑盒，而近期有很多公司利用膠體金方法的檢測(cè)不斷獲得歐盟CE等不同平臺(tái)的認(rèn)證透且。

對(duì)于我個(gè)人來(lái)說(shuō)知道膠體金的名詞前幾年就是知道舆乔，但是在科研端這種檢測(cè)或者研發(fā)的不怎么常用，于是今天專門(mén)抽出一些時(shí)間矿筝，找一些資料專門(mén)學(xué)習(xí)和整理這些內(nèi)容，以便有更深刻的認(rèn)識(shí)棚贾。

一.膠體金檢測(cè)原理是什么窖维？

膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑的作用下（還原劑：白磷榆综、抗壞血酸、枸櫞酸鈉铸史、鞣酸等）鼻疮，可聚合成一定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)琳轿，形成帶負(fù)電的疏水膠溶液判沟，由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱膠體金利赋。

膠體金在弱堿環(huán)境下帶負(fù)電荷水评，可與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)形成牢固的結(jié)合，由于這種結(jié)合是靜電結(jié)合媚送，所以不影響蛋白質(zhì)的生物特性中燥。

膠體金也是免疫電鏡技術(shù)中較為理想的免疫標(biāo)記物，是一種常用的標(biāo)記技術(shù)塘偎，是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù)疗涉，有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。近年已在各種生物學(xué)研究中廣泛使用吟秩，在臨床使用的免疫印跡技術(shù)幾乎都使用其標(biāo)記咱扣，同時(shí)在流式、電鏡涵防、免疫闹伪、分子生物學(xué)以至生物芯片中都可能利用到。

膠體金除了與蛋白質(zhì)結(jié)合以外壮池，還可以與許多其它生物大分子結(jié)合偏瓤，如SPA、PHA椰憋、ConA等厅克。根據(jù)膠體金的一些物理性狀，如高電子密度橙依、顆粒大小证舟、形狀及顏色反應(yīng)，加上結(jié)合物的免疫和生物學(xué)特性窗骑，因而使膠體金廣泛地應(yīng)用于免疫學(xué)女责、組織學(xué)、病理學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域创译。

膠體金標(biāo)記鲤竹，實(shí)質(zhì)上是蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面的包被過(guò)程。吸附機(jī)理可能是膠體金顆粒表面負(fù)電荷昔榴，與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合辛藻。用還原法可以方便地從氯金酸制備各種不同粒徑、也就是不同顏色的膠體金顆粒互订。這種球形的粒子對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能吱肌，可以與葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白仰禽、毒素氮墨、糖蛋白、酶吐葵、抗生素规揪、激素、牛血清白蛋白多肽綴合物等非共價(jià)結(jié)合温峭，因而在基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)驗(yàn)中成為非常有用的工具猛铅。

免疫金標(biāo)記技術(shù)(Immunogold labelling techique) 主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性，在金標(biāo)蛋白結(jié)合處凤藏，在顯微鏡下可見(jiàn)黑褐色顆粒奸忽，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí)，肉眼可見(jiàn)紅色或粉紅色斑點(diǎn)揖庄，因而用于定性或半定量的快速免疫檢測(cè)方法中栗菜，這一反應(yīng)也可以通過(guò)銀顆粒的沉積被放大，稱之為免疫金銀染色蹄梢。

二.?膠體金檢測(cè)常用檢測(cè)技術(shù)有哪些疙筹？

免疫膠體金光鏡染色法：細(xì)胞懸液涂片或組織切片，可用膠體金標(biāo)記的抗體進(jìn)行染色禁炒，也可在膠體金標(biāo)記的基礎(chǔ)上而咆，以銀顯影液增強(qiáng)標(biāo)記，使被還原的銀原子沉積于已標(biāo)記的金顆粒表面齐苛，可明顯增強(qiáng)膠體金標(biāo)記的敏感性翘盖。

免疫膠體金電鏡染色法：可用膠體金標(biāo)記的抗體或抗體與負(fù)染病毒樣本或組織超薄切片結(jié)合，然后進(jìn)行負(fù)染凹蜂♀裳保可用于病毒形態(tài)的觀察和病毒檢測(cè)。

斑點(diǎn)免疫金滲濾法：應(yīng)用微孔濾膜（如膜）作載體玛痊，先將抗原或抗體點(diǎn)于膜上汰瘫，封閉后加待檢樣本，洗滌后用膠體金標(biāo)記的抗體檢測(cè)相應(yīng)的抗原或抗體擂煞。

膠體金免疫層析法：將特異性的抗原或抗體以條帶狀固定在膜上混弥，膠體金標(biāo)記試劑（抗體或單克隆抗體）吸附在結(jié)合墊上，當(dāng)待檢樣本加到試紙條一端的樣本墊上后，通過(guò)毛細(xì)作用向前移動(dòng)蝗拿，溶解結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記試劑后相互反應(yīng)晾捏，再移動(dòng)至固定的抗原或抗體的區(qū)域時(shí)，待檢物與金標(biāo)試劑的結(jié)合物又與之發(fā)生特異性結(jié)合而被截留哀托，聚集在檢測(cè)帶上惦辛，可通過(guò)肉眼觀察到顯色結(jié)果。該法現(xiàn)已發(fā)展成為診斷試紙條仓手，使用十分方便胖齐。

快速金標(biāo)試劑技術(shù)：是將特異的抗體先固定于酸類纖維素膜的某一區(qū)帶，當(dāng)該干燥的酸類纖維素一端浸入樣品（尿液或血清）后嗽冒，由于毛細(xì)管作用呀伙，樣品將沿著該膜向前移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至固定有抗體的區(qū)域時(shí)添坊，樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結(jié)合剿另。同時(shí)利用金粒具有高電子密度的特性，在金標(biāo)蛋白結(jié)合處帅腌。當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí)驰弄，肉眼可見(jiàn)紅色的斑點(diǎn)。既為快速的金標(biāo)檢測(cè)方法原理速客。生產(chǎn)快速而精確試劑戚篙，要點(diǎn)在于所采用的單克隆抗體、多元克隆抗體溺职、抗原岔擂、半抗原、蛋白嵌合物及膠體金等原料的靈敏性及特異性等是否能達(dá)到最高的標(biāo)準(zhǔn)浪耘，此為金標(biāo)試劑的質(zhì)量之最重要的標(biāo)準(zhǔn)乱灵。