一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
BIOG游離DNA富集提取試劑盒是常州百代生物科技股份有限公司研制的專門用于提取較大量液體樣本中低濃度DNA的富集提取試劑盒织阅。血清壳繁、血漿等液體樣本中游離DNA的高效提取一直是個(gè)難題,由于提取原理上的缺陷荔棉,磁珠法的提取富集度和靈敏度遠(yuǎn)不如離心柱法闹炉,而即使是離心柱法,目前也存在富集倍數(shù)偏低的問(wèn)題润樱。使用較小的樣本量渣触,如目前常用的0.2 -0.3ml,則提取的DNA量少壹若,洗脫液DNA濃度較低嗅钻,無(wú)法滿足一些實(shí)驗(yàn)的要求。如果加大樣本量店展,就要用較大的離心柱养篓,使用較大體積的洗脫液,較大功率的離心機(jī)赂蕴,雖然提取的DNA絕對(duì)量多了柳弄,但洗脫液中DNA濃度仍然較低。BIOG游離DNA富集提取試劑盒配套BIOG便攜式真空裝置概说,采用美國(guó)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)口的高效硅基DNA吸附膜碧注,可高效富集提取液體樣本中的低豐度DNA嚣伐,使DNA的提取量和提取濃度得以大幅提升,較普通試劑盒的提取濃度大幅提升3倍以上应闯,有效解決了因洗脫液中DNA濃度過(guò)低無(wú)法進(jìn)一步分析的問(wèn)題纤控,如基因克隆挂捻、基因檢測(cè)碉纺、微生物核酸檢測(cè)、測(cè)序等刻撒。試劑盒適用樣本類型廣骨田,包括血清、血漿声怔、胸腹水态贤、腦脊液、尿液醋火、水樣等幾乎所有的生物液體樣本悠汽。其中,血清芥驳、血漿柿冲、腹水的提取量為0.3-1.5ml拍皮,尿液的提取量為2-10ml壶栋,水樣的提取量為5-18ml。特別地踏志,BIOG cfDNA Enri提取的DNA終濃度高丽猬,有效克服了一般試劑盒樣本量大宿饱、洗脫液多、DNA提取終濃度依然較低的缺點(diǎn)脚祟。試劑盒提取體系經(jīng)多次優(yōu)化谬以,提取DNA純度高,可廣泛用于各種PCR由桌、熒光定量PCR为黎、測(cè)序和分子雜交等。
二沥寥、產(chǎn)品特點(diǎn):
◎采用真空濃縮技術(shù)碍舍,高效富集提取液體樣本中的低濃度DNA,使DNA的提取量邑雅、特別是提取濃度較普通試劑盒大幅提升3倍以上片橡,有效解決了因DNA濃度較低無(wú)法進(jìn)一步分析和對(duì)靶基因進(jìn)行檢測(cè)的問(wèn)題;
◎提取DNA純度高淮野,無(wú)抑制劑捧书,提取的DNA可用于各種PCR吹泡、熒光定量PCR、測(cè)序和分子雜交等经瓷;
◎適用樣本類型廣爆哑,可高效富集提取血清、血漿舆吮、胸腹水揭朝、腦脊液、尿液色冀、水樣等液體樣本中的DNA潭袱。
三、比較研究:
質(zhì)粒DNA回收實(shí)驗(yàn):取1支1.5ml離心管锋恬,加入1ml健康人血漿樣本屯换,再加入40ul 0.5x10-8ug/ul的小鼠GAPDH質(zhì)粒溶液,混勻与学。用BIOG游離DNA富集提取試劑盒提取1ml血漿樣本DNA彤悔,40ul TE液洗脫,取提取的血漿DNA和小鼠GAPDH 質(zhì)粒溶液索守,qPCR檢測(cè)晕窑,檢測(cè)CT值分別為CT1=30.95 、CT2=30.86 蕾盯、 CT3=31.25 幕屹、 CT4=31.38,表明血漿DNA提取回收效率較高级遭,富集性能卓越望拖。
與國(guó)際某知名品牌Q比較,取2支1.5ml離心管挫鸽,1支加入200ul 乙肝病人血漿樣本说敏,1支加入1ml乙肝病人血漿樣本。按Q公司血漿提取說(shuō)明書丢郊,提取200 ul血漿樣本DNA盔沫,用BIOG游離DNA富集提取試劑盒提取1ml血漿樣本DNA,分別用40ul TE液洗脫枫匾,qPCR檢測(cè)架诞,BIOG富集試劑盒提取DNA檢測(cè)CT值為32.08 而Q公司試劑盒提取的DNA檢測(cè)CT值為34.32「绍裕可見谴忧,BIOG血漿DNA中量富集提取試劑盒具有卓越的富集提取性能,非常適合于一些靶基因含量較低的樣本或較弱陽(yáng)性的樣本DNA提取。
圖1 取1ml健康人血漿沾谓,加入40ul 0.5x10-8ug/ul的小鼠GAPDH質(zhì)粒40ul,BIOG cfDNA Enri Kit提取委造,40ulTE洗脫,與小鼠GAPDH質(zhì)粒溶液一起做qPCR檢測(cè)均驶,CT值分別為CT1=30.95昏兆、 CT2=30.86、 CT3=31.25妇穴、 CT4=31.38爬虱,表明血漿DNA提取回收效率較高,富集性能卓越伟骨。
圖2 BIOG cfDNA Enri Kit提取1ml乙肝病人血漿DNA饮潦,與Q公司試劑盒提取200ul血漿DNA qPCR檢測(cè)結(jié)果燃异,結(jié)果相差2個(gè)CT值以上携狭,表明BIOG cfDNA Enri Kit具有卓越的血漿DNA富集提取性能。