10x單細胞轉(zhuǎn)錄組侵入了Denovo的世界(談蚯蚓基因組文章)

2020年5月恨搓,Nature Communications發(fā)表了一篇蚯蚓基因組組裝結(jié)合10x Genomics單細胞轉(zhuǎn)錄組測序探究蚯蚓再生機制的文章蚂夕。

當(dāng)時看到這篇報道的文獻題目時,心情非常激動濒蒋,沒想到10x單細胞轉(zhuǎn)錄組如此快的侵入了Denovo的世界,選擇的點也是非常好的,而且現(xiàn)如今denovo的文章能發(fā)在NC上蹦掐,想必這個工作也應(yīng)該是比較漂亮的。

晚上抱著虔誠的心情拿出來仔細拜讀了一下原文僵闯,說實話卧抗,有點小失望。整體感覺作者能把這篇基因組文章發(fā)出來應(yīng)該是經(jīng)歷了很多磨難鳖粟,最后能被NC接收也算是比較幸運了社裆。全篇總體看下來沒有什么亮點和對再生機制解析比較深入的地方,對再生機制解釋的幾部分內(nèi)容難免有生拉硬拽向图,硬往上靠的嫌疑泳秀,最后的單細胞轉(zhuǎn)錄組恐怕也有為了增加亮點后補進去的。當(dāng)然张漂,這只是我個人的推測晶默,我們尊重作者在這篇文章上付出的努力,這里只客觀評價航攒,沒有否定的意思磺陡。

因為沒有特別亮點的深入的東西可以說,我大概介紹一下幾塊內(nèi)容:

首先漠畜,文章結(jié)果第一部分币他,是denovo文章比較傳統(tǒng)的行文思路,先介紹基因組組裝的數(shù)據(jù)憔狞、組裝方法和指標已經(jīng)組裝質(zhì)量評估的內(nèi)容(其實現(xiàn)在很多做的好的denovo文章都不會在正文里這樣去寫了)蝴悉。這個基因組用了80X的Pacbio數(shù)據(jù)(用的Pacbio RS平臺?瘾敢?RS的平臺是在2011年推出的拍冠,這個文章是做了幾年了?簇抵?)然后用了100X的Hi-C庆杜,contig指標現(xiàn)在來看就算一般,740kb碟摆。當(dāng)你看到文章主圖的那一剎那晃财,就會感覺事兒不好。典蜕。断盛。主圖是一個蚯蚓照片+核型照片+Hi-C組裝的互作熱圖+基因組圈圖罗洗。

引自原文

接著,第二部分钢猛,作者用了大量的篇幅去講蚯蚓再生過程中的表型觀察伙菜,增加一些這部分內(nèi)容是個好事兒,但是行文略顯啰嗦厢洞。接著對再生過程不同時間點做了mRNA-seq仇让,這部分不算有什么好結(jié)果,就是常規(guī)的對功能注釋的結(jié)果做了一些推測躺翻,可能與再生有關(guān)丧叽。

再往下,講的是重復(fù)序列和基因家族的分析公你,這部分硬圍繞再生去靠的感覺就比較明顯了踊淳,或許作者最初做這個蚯蚓基因組的工作希望能在進化上講一些故事,所以重復(fù)序列的分析和基因家族陕靠,選擇進化等方面應(yīng)該都是做了常規(guī)的工作了迂尝,但是沒有什么特別好的點,最后想把文章丟出去剪芥,只能選擇圍繞再生這個點垄开,去從已經(jīng)做了的工作中去找能夠靠的上再生的一些內(nèi)容去填進去。做的結(jié)果沒有什么特別可以說的税肪,就是說LINE2擴增溉躲,再結(jié)合之前做的mRNA-seq的結(jié)果,認為LINE2會影響一些再生相關(guān)基因表達益兄《褪幔基因家族分析也是這樣,找到一些有關(guān)的净捅,或者報道的基因說一說疑枯。然后做了個WGCNA,相當(dāng)大的篇幅蛔六,我也不想多說什么這塊的內(nèi)容了荆永,沒有什么增彩的地方。

最后說一下單細胞轉(zhuǎn)錄組部分国章,用10x Genomics的平臺屁魏,測了切斷前4個體節(jié)72h后的樣本,一共只有2080個細胞捉腥,細胞數(shù)不多,不過也還可以你画,但是平均基因數(shù)只有493個抵碟,文章沒有說明細胞的活率桃漾,是什么問題不清楚。對細胞進行分群拟逮,由于蚯蚓沒有報道的干細胞marker基因撬统,只能用跟再生相關(guān)的同源基因SOX2和ACTB來做,也確實發(fā)現(xiàn)了在一些cluster里表達敦迄,差異表達分析發(fā)現(xiàn)的高表達基因一些也跟干細胞有關(guān)恋追,然后用其他的一些marker gene鑒定了一些類群,文章做到這里也就沒什么了罚屋】啻眩可以說單細胞這部分除了算補充了個新技術(shù),給文章增加點亮點脾猛,并沒有對再生方面有更深入的解析撕彤。

如果大家感興趣的話可以去看一下原文,我確實沒有什么心情去詳細給大家解讀這篇文章了猛拴。如果大家對單細胞在再生方面的文章感興趣羹铅,推薦一篇2018年發(fā)表在Science上的蠑螈指再生的單細胞文章,做的很漂亮愉昆。

「2020年06月10日 ·北京」

現(xiàn)在已經(jīng)可以摘口罩啦职员,心情相當(dāng)美好,甚至有種大難不死必有后福的趕腳^_^

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