學(xué)習(xí)內(nèi)容
-怎么區(qū)分一二三代測序
-二代測序大體流程
-NGS組學(xué)都包括哪些分類（粗略）
-必備名詞
flowcell： 測序反應(yīng)的載體/容器，1個flowcell有8個lane
lane： 測序反應(yīng)的平行泳道荒叼，試劑添加浩淘、洗脫等過程的發(fā)生位置
tile： 每次熒光掃描的位置冤留，肉眼是看不到的
雙端測序： 可能序列比較長有四五百bp譬巫，兩邊各測120-150bp
junction： 雙端測序中間一些沒有測到的區(qū)域
flowcell構(gòu)造：一個lane包含兩列（swath）捣鲸，每一列有60個tile漫贞，每個tile會種下不同的cluster甸箱，每個tile在一次循環(huán)中會拍照4次（每個堿基一次）
-邊合成邊測序（sequence by synthesis, SBS）～合成
區(qū)分一二三代測序
生信星球
二代測序大體流程
1.DNA文庫構(gòu)建
將基因組DNA隨機片段化，然后通過末端修復(fù)迅脐、磷酸化芍殖、加A等步驟修補成平末端，最后加上特定的接頭（Adaptor）谴蔑，構(gòu)建成DNA文庫豌骏。
2.簇的生成——橋式PCR
Flowcel上面連有兩種接頭（P5、P7）隐锭，當(dāng)DNA經(jīng)變性后流經(jīng)Flowcell時窃躲，利用Flowcell上的接頭與DNA兩端的接頭相互匹配。DNA進(jìn)行橋式PCR擴(kuò)增钦睡，從而將堿基信號放大蒂窒。通過橋式PCR不斷循環(huán)獲得上百萬條成簇分布的雙鏈待測片段。
3.測序
4.數(shù)據(jù)產(chǎn)出
XMind
