一弄兜、概念
胎牛血清是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)中的添加劑少欺，它時(shí)維持細(xì)胞生長和代謝穩(wěn)態(tài)方面的關(guān)鍵者白翻。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中乍炉，細(xì)胞需要在富含營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子滤馍、激素和其他成分的培養(yǎng)基下來生長和繁殖岛琼。
二、來源
?胎牛血清是通過母牛刨腹產(chǎn)胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血巢株，經(jīng)自然層析槐瑞、離心后收集得到去除血細(xì)胞、纖維蛋白成分的淡黃色透明上清液體阁苞，后經(jīng)生產(chǎn)使用多級(jí)高置流膜過濾技術(shù)和三級(jí)0.1μm終端微濾方法處理后困檩。常用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
三那槽、功能/作用
1）提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素悼沿，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物骚灸。
2）提供結(jié)合蛋白糟趾，能識(shí)別維生素、脂類逢唤、金屬和其他激素等拉讯，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3）有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合鳖藕，起到解毒作用魔慷。
4）是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源著恩。
5）起酸堿度緩沖液作用院尔。
6）提供蛋白酶抑制劑蜻展，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害
四邀摆、如何避免胎牛血清使用時(shí)出現(xiàn)黑點(diǎn)纵顾？
1）盡可能地減少血清凍融次數(shù)。
2）培養(yǎng)基無需37℃水浴栋盹。
3）培養(yǎng)基保持pH值7.0-7.2施逾。
4）嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì)，容器定期刷洗例获。
5）掌握細(xì)胞傳代的時(shí)機(jī)汉额，細(xì)胞切勿生長過老。
五榨汤、如何避免胎牛血清中產(chǎn)生沉淀蠕搜？
1）解凍血清時(shí)，清隨時(shí)將之搖晃均勻收壕。使溫度及成分均一妓灌，減少沉淀產(chǎn)生。
2）血清分裝凍存時(shí)蜜宪，須規(guī)則搖晃均勻（小心造成氣泡）使溫度與成分均一虫埂。
3）勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大端壳，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀告丢。
4）勿將血清置于37℃太久枪蘑，否則血清會(huì)變得渾濁损谦，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清品質(zhì)岳颇。
5）血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多照捡，若非必要，可以無須做此步驟话侧。
6）若必須做血清的熱滅活栗精，清遵守56℃，30min的原則瞻鹏，并且隨時(shí)搖晃均勻悲立，溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻新博，都會(huì)造成沉淀物增多薪夕。
六、血清中包含絮狀沉淀物是什么赫悄？怎么處理原献？
?沉淀包含的是纖維蛋白和脂蛋白馏慨，這屬于正常特性，不會(huì)影響產(chǎn)品性質(zhì)姑隅，要除去沉淀写隶，需要離心血清（例：400g，1-2min）或者更簡單的讓其沉淀在瓶子底部讲仰，將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個(gè)無菌瓶中（但我們一般不建議采用過濾的方法除去沉淀慕趴，因?yàn)殛惗〞?huì)堵塞濾膜而無法過濾）在大多數(shù)情況下我們輕輕搖動(dòng)陳地啊并加熱至37℃就會(huì)在溶解。綜上所訴使用產(chǎn)品時(shí)搖動(dòng)并加熱血清至37℃鄙陡，沉淀就會(huì)消失秩贰。
七、有必要做熱滅活嗎柔吼？
?在大多數(shù)情況下不需要熱滅活處理毒费，不但節(jié)省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量愈魏，因?yàn)榻?jīng)過熱處理的血清沉淀物的行程會(huì)顯著的增多觅玻，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察會(huì)發(fā)現(xiàn)有很多的"小黑點(diǎn)“常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中又會(huì)使此沉淀物更加增多培漏，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增溪厘。
八、為何要進(jìn)行熱滅活牌柄？
事實(shí)上畸悬，大部分血清都無需進(jìn)行熱滅活，僅在培養(yǎng)部分特殊細(xì)胞時(shí)進(jìn)行滅活珊佣，如在免疫學(xué)研究蹋宦，培養(yǎng)ES細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞等特殊細(xì)胞時(shí)咒锻，推薦使用熱滅活血清冷冗，因?yàn)榧訜峥梢詼缁钛a(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件惑艇，刺激平滑肌收縮蒿辙，細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞滨巴。
九思灌、血清需要做支原體檢測嗎？
?支原體污染是世界性問題恭取，有報(bào)道指出泰偿，支原體輕微污染即可影響200多個(gè)基因的表達(dá)，Nature雜志從2013年起秽荤，要求涉及細(xì)胞培養(yǎng)的研究甜奄，必須進(jìn)行支原體檢測柠横。
