解憂小工具|讓HPA驗證你的結(jié)論放前,生信文章好幫手

大家在閱讀文獻的時候忿磅,有沒有發(fā)現(xiàn),一些偏生信分析的文章凭语,研究方法里沒有寫免疫組化的相關(guān)實驗材料及信息葱她,結(jié)果里卻又有很好的免疫組化蛋白驗證,作者通過免疫組化實驗驗證蛋白的表達水平叽粹,瞬間提升文章質(zhì)量览效。

下面,就讓小編來給大家介紹一下如何使用上篇文章我們介紹的HPA數(shù)據(jù)庫免疫組化信息虫几,來提升文章質(zhì)量。跟著小編的節(jié)奏挽拔,我們看一下下面這篇文章是如何充分利用HPA數(shù)據(jù)庫的吧辆脸。

文章題目:“Protein Arginine Methyltransferases Refine the Classification of Clear Cell Renal Cell Carcinoma with Distinct Prognosis and Tumor Microenvironment Characteristics”

雜志:International Journal of Biological Sciences

影響因子:IF=9.2

發(fā)表時間:2023年8月

文章對來自TCGA、CPTAC螃诅、EMBL和ICGC數(shù)據(jù)庫的763例腎透明細胞癌ccRCC樣本中8種蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(PRMTs)的表達水平的分析啡氢,根據(jù)分析結(jié)果,研究提出了PRMT5可能在ccRCC中發(fā)揮抗癌功能的假設(shè)术裸。然后基于HPA數(shù)據(jù)庫證實了PRMT5在腎癌蛋白水平中下調(diào)倘是。

那文章是怎么選擇圖片的呢?

跟著小編的節(jié)奏袭艺,我們復(fù)現(xiàn)一下文獻中的HPA數(shù)據(jù)庫操作及IHC免疫組化圖片的選擇搀崭。首先,我們打開HPA數(shù)據(jù)庫(https://www.proteinatlas.org/)。

我們在搜索欄輸入我們要查找的基因/蛋白“PRMT5”瘤睹。

文章中的Normal組織選擇要在“Tissue”欄的免疫組化圖進行選擇升敲,文章中的Cancer組織要在“Pathology”欄的免疫組化圖進行選擇。

首先轰传,我們選擇“Tissue”欄驴党,選擇腎臟組織。

記住抗體編號获茬,然后選擇我們需要的免疫組化圖港庄,文章中選擇的免疫組化圖就是小編圈選的三個。我們選擇的時候可以根據(jù)自己的分析情況恕曲,選擇合適的免疫組化圖攘轩,點進去進行原圖的下載。

之后码俩,我們選擇“Pathology”欄度帮,選擇腎癌。記住對應(yīng)的抗體編號(腫瘤組織和正常組織要在同一抗體下才能進行比較)稿存,然后選擇我們需要的免疫組化圖笨篷,文章中選擇的免疫組化圖就是小編圈選的三個。

下載好原圖后瓣履,我們打開Photoshop進行圖像的處理率翅。

1、首先袖迎,我們新建一個300 dpi的背景冕臭。

2、之后我們打開下載的HPA免疫組化圖像燕锥,將圖層移到新建的背景中辜贵。

3、Ctrl+T對圖像進行縮放归形,選擇合適的大小托慨。

4、選中圖層1暇榴,Ctrl+J快捷鍵復(fù)制圖層厚棵。

5、選擇復(fù)制的圖像 (圖層2)蔼紧,按Crtl+T調(diào)整到合適的大小 (根據(jù)想要放大的細節(jié)的區(qū)域進行調(diào)整婆硬,小編覺得35%-45%之間效果比較好),記住縮放比例奸例。

6彬犯、按住Ctrl鍵,點擊鼠標左鍵選擇圖層2 (選中的圖層邊緣會出現(xiàn)閃動的虛線框),設(shè)置前景色為黑色躏嚎,按住Alt+Delete蜜自,并將不透明度調(diào)整為50%(此時黑色區(qū)域會變淺,才說明調(diào)整成功)卢佣。

7重荠、將半透明的黑色區(qū)域拖動到圖層1中想要放大細節(jié)的位置。

8虚茶、復(fù)制圖層1戈鲁,然后在圖層1的副本上,將灰色區(qū)域拖動出來嘹叫,即為細節(jié)放大圖婆殿。

9、同時選中圖層1和圖層2罩扇,按照步驟3中的縮放比例婆芦,把這兩個圖層也進行同比例的縮小,并拖動至合適的位置喂饥。

10消约、在圖層1副本中刪掉多余部分,只保留下圖顯示內(nèi)容员帮。

11或粮、先選中圖層2,把不透明度還原成100%捞高,然后按住Ctrl鍵同時鼠標左鍵點擊圖層2氯材,再次選中黑色區(qū)域。

12硝岗、選中黑色區(qū)域后氢哮,點擊工具欄中的選擇-修改里面的收縮,然后進行收縮量的設(shè)置辈讶。一般設(shè)置為2比較合適命浴,也可根據(jù)自己需求進行調(diào)整。

13贱除、設(shè)置好收縮量后,按Delete媳溺,然后Ctrl+D退出區(qū)域選擇月幌,即可得到被標記的細節(jié)區(qū)域。

14悬蔽、最后選擇直線工具扯躺,把細節(jié)的標記區(qū)域和細節(jié)放大圖進行連接。

15、保存圖片即可录语,得到像文章中的圖片了倍啥。

好了,今天的分享就到這里啦澎埠,如果有什么疑問可以留言咨詢虽缕。

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