上傳測序數(shù)據(jù)到 SRA 流程

上傳數(shù)據(jù)到 SRA 是個體力活隙券,根據(jù) Submission Portal 的指引一步一步填寫相應(yīng)的信息椎镣,需要上傳的數(shù)據(jù)描述文件都要轉(zhuǎn)為 TSV 格式再上傳夭禽,測序數(shù)據(jù)先壓縮再上傳可以節(jié)省時間,不過只支持 gzip,bzip2 的壓縮格式坛掠,不支持 .zip 和 .rar 壓縮格式咪奖,可以使用 tar 進(jìn)行打包盗忱。順利的話傳完數(shù)據(jù)填完信息提交就可以了,出現(xiàn)問題直接 Google 關(guān)鍵字羊赵。


填寫項目信息表單的幾個關(guān)鍵點

上傳數(shù)據(jù)到 SRA 稍微麻煩點的就是填寫項目信息表單了售淡,先把數(shù)據(jù)通過 FTP 上傳到 SRA 服務(wù)器,然后填好項目信息表單,就成功了揖闸。

數(shù)據(jù)屬性信息格式

填寫 attributes file 時候揍堕,每一列都按照文件表頭的示例格式來,沒有示例格式的可以自己根據(jù)實際項目信息填寫汤纸。
表頭綠色代表必須填寫的項目(如果沒有信息用 'not collected'衩茸,'not applicable','missing' 其中一個代替 )贮泞,藍(lán)色代表至少需要填寫一欄的項目(如果沒有信息用 'not collected'楞慈,'not applicable','missing' 其中一個代替 )啃擦,黃色是可選項目(可以不填或者刪除)囊蓝。
填寫好之后,另存為 TSV 格式文本文件才能上傳令蛉,否則報錯:無法識別文件編碼聚霜。

不同顏色 column 對應(yīng)不同的要求
不同顏色 column 對應(yīng)不同的要求

文件名格式

填寫 SRA_metadata 的時候 sample_name 這一欄要與之前 attributes file 中天的 Biosample name (即上圖中綠色的 *sample_name)一致,不是 Biosample 的編號珠叔,如果事先申請了 Bioproject 就填寫蝎宇,如果沒有申請就空著。
特別注意文件名 filename祷安,filename2姥芥,filename3...這些欄目,文件名與需要上傳的文件完全相同(包括文件拓展名)汇鞭,例如上傳文件 S1_1.fastq.gz凉唐,S1_2.fastq.gz 就填寫文件名就是 filename:S1_1.fastq.gz,filename2:S1_2.fastq.gz。但是需要注意霍骄,如果是 tar 打包的文件則需要填寫打包之前的原始文件名(包括拓展名)台囱,例如 S1_1.fastq.gz,S1_2.fastq.gz 被打包在一個文件 S1.tar 里面腕巡,文件名依然要分開填寫 filename:S1_1.fastq.gz,filename2:S1_2.fastq.gz。

上傳數(shù)據(jù)屬性信息文件之前的格式檢查

有些不用的 column 例如下圖紅色框中的血筑,直接刪除绘沉,防止報錯。

空出來的 column 可以刪除
空出來的 column 可以刪除

使用 Filezilla 連接 NCBI 進(jìn)入個人目錄

使用 filezilla 上傳數(shù)據(jù)時豺总,使用 SRA 提供的賬號密碼鏈接服務(wù)器后车伞,狀態(tài)提示欄會報 550/:permission denied 錯誤。此時只需要在軟件的遠(yuǎn)程站點框中輸入指定的個人目錄 upload/xxxxx喻喳,然后 Enter 即可進(jìn)入個人目錄另玖。

連接服務(wù)器后只能進(jìn)入個人目錄
連接服務(wù)器后只能進(jìn)入個人目錄

進(jìn)入個人目錄后需要新建一個文件夾,來上傳數(shù)據(jù)。不能將數(shù)據(jù)直接上傳到個人目錄下面谦去。

Filezilla 上傳總是傳輸失敗解決辦法

在國內(nèi)上傳數(shù)據(jù)到 SRA 速度比較慢慷丽,網(wǎng)絡(luò)也不是很穩(wěn)定,可以通過如下設(shè)置減少傳輸失敗的情況:

  • 設(shè)置-傳輸-對已存文件的操作-上傳:繼續(xù)文件傳輸
  • 設(shè)置-連接-超時-超時秒數(shù):60s(默認(rèn)的20s)
  • 設(shè)置-連接-重連設(shè)置-最大重試次數(shù):99次(調(diào)到最大)
  • 設(shè)置-連接-重連設(shè)置-登錄重試延時:90s(調(diào)大一點鳄哭,防止網(wǎng)絡(luò)不穩(wěn)定時頻繁重連可能被服務(wù)器拉黑)

最后更新:2017.5.7

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