產(chǎn)品名稱:Pseudoalteromonas espejiana bacteriophage PM2
別稱:PM2
特征特性:
病毒,噬菌體,分離基:海水,宿主:埃斯佩吉亞假交替單胞菌 BAL 31 (ATCC 27025)
生長特性:需氧,30℃
使用方法:
遵循下面給出的噬菌體繁殖的一般程序弓熏。使用 ATCC? 27025? Pseudoalteromonas espejiana BAL 31 作為宿主。噬菌體繁殖的一般程序 從凍干或解凍的冷凍小瓶中回收噬菌體: 在打開噬菌體樣本之前扶供,準(zhǔn)備推薦宿主菌株的活躍生長的肉湯培養(yǎng)物卡啰。主機應(yīng)年滿 18-24 小時澈吨。將大約 1.0 mL 推薦的肉湯添加到凍干噬菌體小瓶中宛蚓,將 0.5 mL 添加到液體冷凍管中斜姥。在培養(yǎng)箱中預(yù)熱推薦培養(yǎng)基的板洲押。用 2.5 mL 融化的 0.5% 瓊脂(相同培養(yǎng)基)覆蓋表面武花,其中含有一兩滴 18-24 小時宿主。軟瓊脂應(yīng)保持在 43 至 45°C 直至準(zhǔn)備傾倒杈帐。建議使用水浴体箕。讓覆蓋層硬化。通過將 0.1 mL 噬菌體放入含有 0.9 mL 肉湯培養(yǎng)基的試管中挑童,可以連續(xù)稀釋再水化的噬菌體干旁。根據(jù)需要重復(fù)任意數(shù)量的段落。許多菌株也可以在沒有軟瓊脂覆蓋的情況下進行滴定炮沐。將約 1.0 mL 的主機移至每個板的表面争群。傾斜板以確保覆蓋整個表面后,吸出多余的液體大年。表面干燥后换薄,像以前一樣將噬菌體的各種稀釋液滴到表面上玉雾。注:在板上發(fā)現(xiàn)噬菌體可以更容易地觀察裂解情況。如果在倒入平板之前將噬菌體直接添加到軟瓊脂中轻要,則可能很難看到模糊或微小的噬菌斑复旬。耐藥宿主細菌也可能掩蓋菌斑形成。繁殖噬菌體:可以通過如上所述制備帶有軟瓊脂/宿主覆蓋物的平板并用大約 0.5 mL 濃縮噬菌體覆蓋表面來繁殖噬菌體冲泥【园或者,您可以將噬菌體直接添加到融化的瓊脂/宿主中凡恍,然后倒在平板上志秃。對于較大量,可以使用推薦的瓊脂制備大尺寸 T 燒瓶嚼酝,并將約 12.0 mL 融化的軟瓊脂/宿主倒在表面上浮还。然后讓噬菌體在硬化的表面上運行。噬菌體也可以在如上所述傾倒之前直接添加到融化的軟瓊脂中闽巩。孵育24小時后钧舌,從瓊脂平板表面刮去軟瓊脂。以約 1000 rpm 的速度離心 25 分鐘涎跨,沉淀細胞碎片和瓊脂洼冻。保存上清液。使上清液通過 0.22 μm Millipore 過濾器隅很,并將濾液儲存在 4-8°C 下碘赖。裂解物應(yīng)在冷藏條件下長期保持活力。它們也可以在有或沒有冷凍保護劑的情況下冷凍外构。如果可以的話普泡,液氮儲存是長期儲存的最佳方法。大多數(shù)噬菌體也可以冷凍干燥审编。 ATCC? 使用雙倍濃度脫脂牛奶與濾液各半混合撼班。注:大多數(shù)噬菌體也可采用肉湯繁殖方法。除非另有說明垒酬,ATCC? 使用 MH Adams 噬菌體(Interscience Publishers, Inc.砰嘁,紐約,1959)中描述的 Adams 瓊脂覆蓋方法進行常規(guī)噬菌體生產(chǎn)勘究。
保存說明:-80°C 或更低