Transwell實驗

定義:一類有通透性的杯狀裝置饲鄙,可認(rèn)為是一種膜濾器(Membrane filters)沫屡,或者是一種通透性的支架(permeable supports)退渗。

組成:杯子底層是一張有通透性的膜纽窟,杯子其余部分的材料與普通的孔板是一樣鸣剪。這層膜帶有微孔寓辱,孔徑大小有0.1-12.0μm压状,根據(jù)不同需要可用不同材料魂贬,一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane)。

原理:將Transwell小室放入培養(yǎng)板中籽前,小室內(nèi)稱為上室亭珍,培養(yǎng)板內(nèi)成為下室,上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液枝哄,下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液肄梨,上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。細(xì)胞種在上室內(nèi)膘格,由于聚碳酸酯膜有通透性峭范,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞,從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細(xì)胞生長瘪贱、運動等的影響纱控。

常用實驗:

(1)共培養(yǎng)體系

小于3.0um孔徑條件下,細(xì)胞不會遷徙通過菜秦,因此甜害,若研究不涉及細(xì)胞運動能力,不需要細(xì)胞穿過聚碳酸酯膜球昨,則應(yīng)選擇3.0μm以下孔徑尔店。常用0.4、3.0μm。我們實驗室用的是0.4μm嚣州。將細(xì)胞A種于上室鲫售,細(xì)胞B種于下室,可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的影響该肴。


(2)趨化性實驗

可用5.0情竹、8.0、12.0μm膜匀哄,上室細(xì)胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室秦效,計數(shù)進入下室的細(xì)胞量可反映下室成分對上室細(xì)胞的趨化能力。

①細(xì)胞B(下室)對細(xì)胞A(上室)的趨化作用:將細(xì)胞A種于上室涎嚼,細(xì)胞B種于下室阱州,可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的趨化作用。

②趨化因子對細(xì)胞的趨化作用:將細(xì)胞種于上室法梯,下室加入某種趨化因子苔货,可研究該趨化因子對細(xì)胞的趨化作用。

(3)腫瘤細(xì)胞遷移實驗

常用8.0鹊汛、12.0μm膜蒲赂,原理與腫瘤細(xì)胞遷移實驗類似阱冶。

上室種腫瘤細(xì)胞刁憋,下室加入FBS或某些特定的趨化因子,腫瘤細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑木蹬,但與腫瘤細(xì)胞遷移實驗不同的是至耻,聚碳酸酯膜上室側(cè)鋪上一層基質(zhì)膠,用以模仿體內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)镊叁,細(xì)胞欲進入下室尘颓,先要分泌基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)將基質(zhì)膠降解,方可通過聚碳酸酯膜晦譬。計數(shù)進入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的侵襲能力疤苹。

最后編輯于
?著作權(quán)歸作者所有,轉(zhuǎn)載或內(nèi)容合作請聯(lián)系作者
  • 序言:七十年代末,一起剝皮案震驚了整個濱河市敛腌,隨后出現(xiàn)的幾起案子卧土,更是在濱河造成了極大的恐慌,老刑警劉巖像樊,帶你破解...
    沈念sama閱讀 206,013評論 6 481
  • 序言:濱河連續(xù)發(fā)生了三起死亡事件尤莺,死亡現(xiàn)場離奇詭異,居然都是意外死亡生棍,警方通過查閱死者的電腦和手機颤霎,發(fā)現(xiàn)死者居然都...
    沈念sama閱讀 88,205評論 2 382
  • 文/潘曉璐 我一進店門,熙熙樓的掌柜王于貴愁眉苦臉地迎上來,“玉大人友酱,你說我怎么就攤上這事晴音。” “怎么了缔杉?”我有些...
    開封第一講書人閱讀 152,370評論 0 342
  • 文/不壞的土叔 我叫張陵段多,是天一觀的道長。 經(jīng)常有香客問我壮吩,道長进苍,這世上最難降的妖魔是什么? 我笑而不...
    開封第一講書人閱讀 55,168評論 1 278
  • 正文 為了忘掉前任鸭叙,我火速辦了婚禮觉啊,結(jié)果婚禮上,老公的妹妹穿的比我還像新娘沈贝。我一直安慰自己杠人,他們只是感情好,可當(dāng)我...
    茶點故事閱讀 64,153評論 5 371
  • 文/花漫 我一把揭開白布宋下。 她就那樣靜靜地躺著嗡善,像睡著了一般。 火紅的嫁衣襯著肌膚如雪学歧。 梳的紋絲不亂的頭發(fā)上罩引,一...
    開封第一講書人閱讀 48,954評論 1 283
  • 那天,我揣著相機與錄音枝笨,去河邊找鬼袁铐。 笑死,一個胖子當(dāng)著我的面吹牛横浑,可吹牛的內(nèi)容都是我干的剔桨。 我是一名探鬼主播,決...
    沈念sama閱讀 38,271評論 3 399
  • 文/蒼蘭香墨 我猛地睜開眼徙融,長吁一口氣:“原來是場噩夢啊……” “哼洒缀!你這毒婦竟也來了?” 一聲冷哼從身側(cè)響起欺冀,我...
    開封第一講書人閱讀 36,916評論 0 259
  • 序言:老撾萬榮一對情侶失蹤树绩,失蹤者是張志新(化名)和其女友劉穎,沒想到半個月后脚猾,有當(dāng)?shù)厝嗽跇淞掷锇l(fā)現(xiàn)了一具尸體葱峡,經(jīng)...
    沈念sama閱讀 43,382評論 1 300
  • 正文 獨居荒郊野嶺守林人離奇死亡,尸身上長有42處帶血的膿包…… 初始之章·張勛 以下內(nèi)容為張勛視角 年9月15日...
    茶點故事閱讀 35,877評論 2 323
  • 正文 我和宋清朗相戀三年龙助,在試婚紗的時候發(fā)現(xiàn)自己被綠了砰奕。 大學(xué)時的朋友給我發(fā)了我未婚夫和他白月光在一起吃飯的照片蛛芥。...
    茶點故事閱讀 37,989評論 1 333
  • 序言:一個原本活蹦亂跳的男人離奇死亡,死狀恐怖军援,靈堂內(nèi)的尸體忽然破棺而出仅淑,到底是詐尸還是另有隱情,我是刑警寧澤胸哥,帶...
    沈念sama閱讀 33,624評論 4 322
  • 正文 年R本政府宣布涯竟,位于F島的核電站,受9級特大地震影響空厌,放射性物質(zhì)發(fā)生泄漏庐船。R本人自食惡果不足惜,卻給世界環(huán)境...
    茶點故事閱讀 39,209評論 3 307
  • 文/蒙蒙 一嘲更、第九天 我趴在偏房一處隱蔽的房頂上張望筐钟。 院中可真熱鬧,春花似錦赋朦、人聲如沸篓冲。這莊子的主人今日做“春日...
    開封第一講書人閱讀 30,199評論 0 19
  • 文/蒼蘭香墨 我抬頭看了看天上的太陽壹将。三九已至,卻和暖如春毛嫉,著一層夾襖步出監(jiān)牢的瞬間诽俯,已是汗流浹背。 一陣腳步聲響...
    開封第一講書人閱讀 31,418評論 1 260
  • 我被黑心中介騙來泰國打工狱庇, 沒想到剛下飛機就差點兒被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留惊畏,地道東北人。 一個月前我還...
    沈念sama閱讀 45,401評論 2 352
  • 正文 我出身青樓密任,卻偏偏與公主長得像,于是被迫代替她去往敵國和親偷俭。 傳聞我的和親對象是個殘疾皇子浪讳,可洞房花燭夜當(dāng)晚...
    茶點故事閱讀 42,700評論 2 345

推薦閱讀更多精彩內(nèi)容