一骚露、核酸
核酸本質(zhì)上是由3'蹬挤，5'-磷酸二酯鍵連接的dNTP多聚核苷酸長(zhǎng)鏈組成。根據(jù)核苷酸的不同核酸分為脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）棘幸。核酸提取過(guò)程中經(jīng)常涉及到的操作是基因組DNA和總RNA的提取焰扳。
DNA易溶于水，不溶于苯酚、乙醇吨悍、異丙醇扫茅、氯仿等有機(jī)溶劑。
DNA提取總的原則是：
① 提取過(guò)程中防止和抑制細(xì)胞中DNase對(duì)DNA 降解育瓜；
② 保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性葫隙；
③ 核酸樣品中不應(yīng)存在對(duì)酶有抑制作用的有機(jī)溶劑和過(guò)高濃度的金屬離子；
④ 盡量去除蛋白質(zhì)躏仇、糖恋脚、脂等其他大分子的污染；
⑤ 去除其他核酸分子如RNA的污染
二焰手、HP Fungal DNA Kit — HP真菌DNA提取試劑盒
該試劑盒采用CTAB法和硅膠柱相結(jié)合的純化方式慧起，適用于從富含多糖類、酚類或DNA含量低的新鮮或干燥的真菌中提取高純度的基因組DNA册倒。新鮮或干燥的真菌組織研磨后，經(jīng)CTAB裂解液裂解磺送，氯仿抽提去除多聚糖和其他影響下游應(yīng)用的各種雜質(zhì)驻子，調(diào)節(jié)結(jié)合條件，轉(zhuǎn)移至HiBind柱子中離心吸附DNA估灿，兩次快速洗滌去除殘留的多糖類等雜質(zhì)崇呵，最后用低鹽緩沖液洗脫DNA。
十六烷基三甲基溴化銨（hexadecyltrimethyl-ammoniumbromide,CTAB）是一種陽(yáng)離子去污劑馅袁，能溶解細(xì)胞膜域慷，并具有從低離子強(qiáng)度溶液中沉淀核酸與酸性多聚糖的特性，與核酸結(jié)合汗销，使核酸便于分離犹褒。
二、實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備：
β-巰基乙醇弛针、氯仿叠骑、異戊醇、無(wú)水乙醇削茁、液氮宙枷、研缽、10/2/1.5mL離心管茧跋、液氮神器慰丛、65℃水浴鍋、渦旋振蕩器瘾杭、65℃ddH2O
三诅病、注意事項(xiàng)
五、Steps：
⒈于液氮中充分研磨新鮮菌絲，轉(zhuǎn)移至2mL離心管中睬隶，加入500μLCPL Buffer 和10μLβ-巰基乙醇锣夹，渦旋混勻，裂解樣品苏潜；
⒉在65℃水浴鍋孵育15min银萍，在孵育期間取出離心管混勻2次；
⒊加入500μL氯仿：異戊醇（24:1）混合液恤左，渦旋混勻贴唇，≥10000g離心5min；
⒋轉(zhuǎn)移300μL上清液到新的1.5離心管中飞袋；
⒌加入150CXD和300μL無(wú)水乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件戳气，渦旋混勻；
⒍轉(zhuǎn)移上述混合液到HiBind DNA Column 中巧鸭，10000g離心1min瓶您；
⒎加入650μLSPW Wash Buffer，10000g離心1min纲仍，棄濾液呀袱；
⒏重復(fù)步驟7；
⒐空甩2min郑叠；
⒑200μLddH2O洗脫兩遍夜赵。
思考
Q1：氯仿的作用？
A1：加大比重乡革，使得有機(jī)相始終在下層寇僧，方便水相的回收
Q2：異戊醇的作用？
A2：異戊醇的作用主要是讓離心后上下層的界面更加清晰沸版，也方便水相的回收
四嘁傀、純度檢測(cè)
