一.第一代測序
必備概念:
ddNTP 雙脫氧的核苷酸吗蚌,可以被DNA聚合酶識(shí)別結(jié)合到DNA鏈上,但由于沒有本來要用來和下一個(gè)核苷酸形成磷酸二酯鍵的氧囤萤,所以在它后面DNA鏈終止昼窗,并且暗搓搓的人類給他上面帶了熒光標(biāo)記。
dNTP 正常的脫氧核苷酸(4種)
電泳 磷酸鹽主鏈賦予DNA負(fù)電荷涛舍,DNA從負(fù)極開始遷移澄惊,較小的較輕長度的DNA進(jìn)一步遷移到電泳板的底部(最后排出來四大組長度依次遞增的閃熒光的東西)
(受本人知識(shí)水平所限,此處只做最土著的解答)
參考解說
整個(gè)過程類似于想要知道一排人都是誰(男富雅,女掸驱,小男孩,小女孩的隨機(jī)組合)没佑,然后給它復(fù)制出n列毕贼,加入美男,美女蛤奢,乖男孩鬼癣,乖女孩,因?yàn)橛置烙止院竺娌缓靡馑荚僬救肆似》罚⑶疫@個(gè)又美又乖的我們還能看得見待秃!神奇!(別問為啥一開始的看不見瓜晤,可能不好看吧)然后大家排排坐锥余,從長到短,我們就依次可以得出每個(gè)位次上的是誰痢掠,然后再根據(jù)互補(bǔ)原則知道之前的是誰驱犹。完美!
二.第二代測序
基本流程:
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放幾個(gè)參考鏈接
day7學(xué)習(xí)內(nèi)容
測序技術(shù)原理及常用數(shù)據(jù)格式簡介
二代測序的一大特點(diǎn)是邊合成邊測序足画,每次只添加一種ddNTP雄驹,拍照后洗去,加入激發(fā)熒光緩沖液淹辞,使其可繼續(xù)連接后再添加新的ddNTP医舆。