近年來，miRNA引起了越來越多研究人員的注意砂沛，其在生物發(fā)育烫扼、細胞分化和疾病發(fā)生等各種生物學(xué)過程中起著非常重要的作用，今天碍庵，小編就來教大家如何利用miRNA發(fā)2到3分的文章映企，下面舉一個例子來說明：

我們來分析一下作者都做了什么首先作者提出觀點悟狱，microRNA 342已被發(fā)現(xiàn)在多種類型的癌癥中起重要作用，但是在鼻咽癌中堰氓，目前還沒有關(guān)于microRNA 342分子及其作用機制的研究挤渐，因此，本研究旨在檢測miR-342在鼻咽癌中的表達双絮，探討miR-342在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中的作用浴麻，并探討其可能的分子機制。

然后看作者的研究思路和方法是什么

研究人員從臨床病例中獲得52例病變組織和11例正常組織標(biāo)本用于臨床實驗囤攀，根據(jù)腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)展時期不同進行分類软免，另外從美國ATCC機構(gòu)購買了NPC?SUNE1,?5-8F and 293T三個細胞系，對細胞系進行培養(yǎng)以及轉(zhuǎn)染焚挠，轉(zhuǎn)染48 h后膏萧，用逆轉(zhuǎn)錄-定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）檢測miR 342表達。轉(zhuǎn)染后24和48 h進行MTT和Transwell侵襲試驗宣蔚。轉(zhuǎn)染后72小時進行Western印跡分析向抢。此外认境，作者還采用了生物信息學(xué)方法對miR342的靶點基因進行了分析胚委。最后進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

結(jié)果

用RT-qPCR的方法檢測出人鼻咽癌組織和正常鼻咽上皮標(biāo)本中miR－342的表達水平：鼻咽癌組織中mir?342的表達明顯低于正常鼻咽上皮組織（P＜0.05）叉信。此外亩冬，還檢測了鼻咽癌細胞株SUNE1和5-8F細胞和正常鼻咽上皮NP65細胞中miR 342的表達水平：

miR342低表達與腫瘤不同的發(fā)展時期有顯著相關(guān)性，而與性別或年齡無關(guān)硼身。

用miR?342模擬物或NC轉(zhuǎn)染SUNE1細胞48 h后硅急，RT-qPCR檢測結(jié)果顯示，miR 342基因轉(zhuǎn)染的SUNE1細胞中miR342的水平明顯升高佳遂，MTT實驗結(jié)果顯示miR342的異位表達抑制了SUNE1細胞的增殖营袜，MIR 342模擬物轉(zhuǎn)染SUNE1細胞后，與NC轉(zhuǎn)染細胞相比丑罪，細胞浸潤明顯減少荚板。

此外研究人員在細胞實驗中采用了熒光素酶報告基因?qū)嶒瀬碜C實了ZEB1是鼻咽癌中miR 342的直接靶點，在臨床鼻咽癌組織和正常鼻咽上皮標(biāo)本中也檢測到了ZEB1的表達吩屹。

隨后跪另，研究人員又通過ZEB1基因敲除實驗證實miR342是通過抑制靶基因ZEB1抑制鼻咽癌細胞增殖和侵襲。?

文章分析完了煤搜，我們來總結(jié)一下作者的研究思路：作者首先提出一個已知的對其他癌癥有抑制作用的miR342分子可能也會對鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展起重要的抑制作用免绿，然后進行一系列的常規(guī)實驗對該假設(shè)進行驗證，除了細胞實驗外作者還設(shè)計了臨床實驗來增進實驗結(jié)果的可信度擦盾、準(zhǔn)確性和實用性嘲驾，另外作者對miR342的直接靶基因也進行了假設(shè)淌哟，之后用實驗驗證假設(shè)的結(jié)果，一篇文章就這樣完成了辽故。

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