學習小組Day7筆記--王英芳

測序知識

  • 區(qū)分一二三代
  • 二代流程
  • NGS組學

測序過程和原理

一代sanger sequencing

sanger sequencing.png
  • 測序讀長可達1000bp,準確性高達99.999%
  • 聚合酶活性下降谓松,一次只測一條拳氢,通量低

二代測序

  • Roche:454技術
  • illumina:Solexa/Hiseq
  • ABI:SOLID技術

illunima Hiseq 測序原理
PE (Pair End)

  • flowcell: 測序反應的載體/容器,1個flowcell有8個lane


    flow cell.png
  • lane: 測序反應的平行泳道越败,試劑添加、洗脫等過程的發(fā)生位置
  • tile: 每次熒光掃描的位置硼瓣,肉眼是看不到的
  • 雙端測序: 可能序列比較長有四五百bp究飞,兩邊各測120-150bp
  • junction: 雙端測序中間一些沒有測到的區(qū)域
  • flowcell構造:一個lane包含兩列(swath),每一列有60個tile堂鲤,每個tile會種下不同的cluster亿傅,每個tile在一次循環(huán)中會拍照4次(每個堿基一次)

-sequence by synthesis SBS
原理介紹視頻:https://share.weiyun.com/5qojuBY 密碼: 密碼:bxsry4

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  • 構建文庫


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測序知識


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