測序知識
- 區(qū)分一二三代
- 二代流程
- NGS組學
測序過程和原理
一代sanger sequencing
sanger sequencing.png
- 測序讀長可達1000bp,準確性高達99.999%
- 聚合酶活性下降谓松,一次只測一條拳氢,通量低
二代測序
- Roche:454技術
- illumina:Solexa/Hiseq
- ABI:SOLID技術
illunima Hiseq 測序原理
PE (Pair End)
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flowcell: 測序反應的載體/容器,1個flowcell有8個lane
flow cell.png - lane: 測序反應的平行泳道越败,試劑添加、洗脫等過程的發(fā)生位置
- tile: 每次熒光掃描的位置硼瓣,肉眼是看不到的
- 雙端測序: 可能序列比較長有四五百bp究飞,兩邊各測120-150bp
- junction: 雙端測序中間一些沒有測到的區(qū)域
- flowcell構造:一個lane包含兩列(swath),每一列有60個tile堂鲤,每個tile會種下不同的cluster亿傅,每個tile在一次循環(huán)中會拍照4次(每個堿基一次)
-sequence by synthesis SBS
原理介紹視頻:https://share.weiyun.com/5qojuBY 密碼: 密碼:bxsry4
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構建文庫
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測序知識
學習小組Day7思維導圖-一二三代測序.png
day7學習未完待續(xù)