完整報告熒光共定位的定量分析結(jié)果總共需要以下元素:
● ①紅色通道熒光圖像和散點圖
●?②綠色通道熒光圖像和散點圖
●?③熒光共定位圖像和散點圖
●?④熒光共定位圖像皮爾遜相關系數(shù)和重疊系數(shù)
前面2期內(nèi)容,將熒光共定位散點圖獲取、2個系數(shù)以及散點圖解析說完了。沒有看的可以再回顧一下排惨。
發(fā)現(xiàn)沒描焰?
咱們還少了單通道散點圖。這個散點圖是為了報告單通道情況下的熒光強度和背景情況揉阎,也是很重要的指標。
有了前面的基礎背捌,本次操作就非常簡單了毙籽。
圖文步驟
1. 用Image Pro Plus打開一紅色通道圖像,然后選擇Co-localiazation毡庆。
2.按照如下設置坑赡,然后點擊Forward。
3.?得到紅色通道散點圖么抗。
可以看出散點非常貼近X軸線毅否,且代表背景的散點區(qū)域也很干凈,說明紅色通道熒光的整體情況較好蝇刀。
既然是單通道螟加,必然不涉及共定位系數(shù)了。
4. 采用同樣的操作方法熊泵,得到綠色通道散點圖仰迁。
可以看到散點非常貼近Y軸線,背景區(qū)域干凈顽分,說明綠色通道熒光的整體情況也挺好徐许。(PS:遇到這種實驗結(jié)果,肯定是燒高香了W湔骸)
終于集齊所有元素雌隅,下期(也就是終章)將介紹熒光共定位定量分析的組圖方式和報告形式,到時你會得到下面一張圖缸沃。
下期預告:組圖方式和報告形式