MV-4-11(人髓性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)培養(yǎng)教程

細(xì)胞名稱(chēng):MV-4-11(人髓性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞)

細(xì)胞別稱(chēng):MV-4-11;MV-4:11;MV4:11;MV4;11;MV4;11;MV411;MV(4;11);MV4II

細(xì)胞貨號(hào):SNL-379

生長(zhǎng)特性:懸浮

培養(yǎng)條件:IMDM+10%FBS+1%P/S

培養(yǎng)環(huán)境:37℃卵洗;5%CO2弥咪;飽和濕度

細(xì)胞簡(jiǎn)介:MV-4-11細(xì)胞由Rovera課題組建立,來(lái)源于一名患有人雙表型髓性單核細(xì)胞白血簿壑痢(biphenotypic B myelomonocytic leukemia)的10歲男孩的外周血。Interleukin(IL)-3可以獨(dú)立地支持該細(xì)胞長(zhǎng)期生長(zhǎng)扳躬,使用10%FBS培養(yǎng)時(shí)則不需要額外添加IL-3,但是在IL-3和粒細(xì)胞/巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)均處于低濃度的情況下贷币,IL-3會(huì)抑制MV-4-11細(xì)胞的增殖击胜。粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)會(huì)協(xié)同GM-CSF促進(jìn)MV-4-11細(xì)胞的增殖役纹,而單獨(dú)的G-CSF會(huì)短暫刺激該細(xì)胞系。據(jù)文獻(xiàn)[PubMed:3500218]報(bào)道促脉,間接免疫熒光法檢測(cè)髓性單核細(xì)胞抗原CD15,超過(guò)96%的該細(xì)胞為陽(yáng)性瘸味,40~96%為單核細(xì)胞抗原CD4陽(yáng)性宫仗,4-11%為單核細(xì)胞抗原CD10陽(yáng)性硫戈。MV-4-11細(xì)胞可以用于3D細(xì)胞培養(yǎng)、免疫紊亂丁逝、免疫學(xué)研究汁胆,也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主霜幼。

MV-4-11細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)

1細(xì)胞特性:MV-4-11細(xì)胞懸浮圓形生長(zhǎng),偶有小聚團(tuán)罪既,屬于正持猓現(xiàn)象,無(wú)需吹散丢间;圓形透亮探熔、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞烘挫,如果無(wú)法判斷,可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率饮六;少量細(xì)胞附著瓶底屬于正常現(xiàn)象卤橄,可將懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新瓶绿满,丟棄貼壁的細(xì)胞窟扑;

2對(duì)血清要求高:MV-4-11細(xì)胞對(duì)血清要求高喇颁,建議使用進(jìn)口優(yōu)質(zhì)血清進(jìn)行培養(yǎng)辜膝。

3不建議頻繁離心:MV-4-11細(xì)胞對(duì)離心敏感,常規(guī)擴(kuò)增培養(yǎng)時(shí)不建議頻繁離心厂抖,換液可使用半換液法,傳代可混勻后直接分瓶并補(bǔ)足培養(yǎng)基(具體操作步驟見(jiàn)下文)忱辅。若細(xì)胞碎片較多七蜘,且細(xì)胞密度較高時(shí)可以低速離心以去除部分碎片墙懂。

4培養(yǎng)時(shí)存在部分細(xì)胞碎片:培養(yǎng)時(shí)存在部分細(xì)胞碎片是正常現(xiàn)象损搬,若碎片比較多碧库,可以待細(xì)胞密度較大時(shí)通過(guò)低速離心(900rpm巧勤,3min)去除部分碎片;若碎片不多颅悉,則無(wú)需特殊處理;低速離心會(huì)損失少量細(xì)胞剩瓶,在細(xì)胞密度低時(shí)不要離心驹溃,應(yīng)該等細(xì)胞增殖到可以傳代的密度再離心。

5合理控制細(xì)胞密度:MV-4-11細(xì)胞有密度依賴(lài)性豌鹤,密度低時(shí)增殖較慢。推薦將細(xì)胞密度控制在50-100萬(wàn)細(xì)胞/mL傍药,密度到100萬(wàn)細(xì)胞/mL即可按1:2傳代磺平。

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