在蛋白質(zhì)制備過程及保存過程中減少或避免蛋白的活性丟失是非常重要的工作，那么我們就要去了解蛋白質(zhì)失活的機(jī)制页屠。下面就簡單的介紹蛋白質(zhì)失活的機(jī)制。
蛋白質(zhì)水解酶水解
在蛋白質(zhì)制備過程中體系中含有蛋白水解酶鹊杖，那么目標(biāo)蛋白質(zhì)就可能會被水解酶水解從而失活筒严，在制備過程添加蛋白酶抑制劑即可避免目標(biāo)蛋白被水解酶水解术吗。
聚合作用
蛋白質(zhì)首先發(fā)生可逆性伸展尉辑，伸展的蛋白分子之間發(fā)送締合，減少了疏水氨基酸暴露于水溶劑较屿，最后可能發(fā)生蛋白分子之間二硫鍵的形成隧魄，從而是蛋白沉淀析出卓练。發(fā)生蛋白聚合最明顯的是有沉淀析出，有的聚合是可逆聚合购啄，有的聚合是不可逆聚合襟企。
極端pH
活性中心氨基酸必須基團(tuán)電離；
pH的變化也可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)的伸展狮含，而引起聚合顽悼。
氧化作用
各種氧化劑能氧化帶芳香簇側(cè)鏈的氨基酸，主要是Cys,Trp,Met容易被氧化几迄。
離子型表面活性劑
離子型表面活性劑在很低濃度下可使蛋白分子之間發(fā)生劇烈作用蔚龙。
還原劑
二硫鍵被SH還原，接著β消除映胁，所形成的巰基與胱氨酸或其它氨基酸的巰基反應(yīng)木羹。
金屬離子
金屬離子與蛋白質(zhì)的巰基，二硫鍵解孙，及色氨酸及組氨酸反應(yīng)形成硫醇鹽坑填。
變性劑
如高濃縮的尿素及鹽酸胍可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化；
螯合劑如EDTA會讓需要金屬輔助因子的蛋白質(zhì)不可逆失活弛姜，但同時EDTA可穩(wěn)定不需要金屬輔助因子的蛋白質(zhì)脐瑰。
熱
熱失活是蛋白制備過程中最常見的失活因素，分為伸展性失活廷臼，和不可逆失活蚪黑。如Asp和Ser自高溫孵育過程中會消旋。
機(jī)械力
如震動中剩，剪切力忌穿，超聲波等都有可能導(dǎo)致蛋白不可逆失活
輻射作用
輻射過程中產(chǎn)品的自由基（OH ,H2O2,O2)會直接或間接的作用于蛋白質(zhì)。
冷凍和脫水
冷凍和脫水過程中结啼，溶質(zhì)分子被濃縮掠剑，引起蛋白質(zhì)微環(huán)境pH和離子強(qiáng)度的劇烈變化，減弱疏水作用力郊愧，并可能引起二硫交換和巰基的氧化朴译。
寡聚蛋白解聚成單體
寡居蛋白解聚成單體時也會失去活性。
錯誤再折疊
這種現(xiàn)象在包涵體復(fù)性時比較常見属铁，變性的蛋白溶液在復(fù)性過程出差錯誤的再折疊形成錯誤匹配的蛋白質(zhì)形式眠寿。
