細胞質(zhì)量決定實驗的進程與結(jié)果拍嵌,相信很多小伙伴在細胞培養(yǎng)上走了不少彎路松蒜,事實上因為細胞污染而耽誤了實驗進度,影響畢業(yè)和發(fā)文章的進程的事件時常發(fā)生赡勘。
所以今天學霸姐姐整理了一下細胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的一些現(xiàn)象與處理方法哟冬,希望可以幫到大家楼熄。
一、細菌污染
細菌污染最為常見浩峡,一旦操作稍有不當可岂,就會引起細胞污染,細菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細條沙狀翰灾,當然缕粹,根據(jù)感染的細菌不同稚茅,所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同,有球形致开、桿狀等峰锁,其次萎馅,培養(yǎng)液發(fā)黃双戳,變渾濁,可明顯看見培養(yǎng)皿中有細沙狀的沉淀物糜芳,時不時還有異樣氣味發(fā)出飒货,如下圖所示:
處理方法:
在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,可以用四環(huán)素峭竣,慶大霉素塘辅,或者鏈霉素,前兩者的工作濃度是50 μg/mL;鏈霉素的工作濃度是100 μg/mL皆撩。但是扣墩,細胞本身也有影響,狀態(tài)大不如從前扛吞,所以呻惕,防范于未然,正確操作滥比、嚴格執(zhí)行無菌操作規(guī)范亚脆,定期清理消毒培養(yǎng)設施才是關鍵!
二、真菌污染
真菌污染培養(yǎng)液清亮透明盲泛,不會像細菌感染大爆發(fā)濒持,所以很難早期發(fā)現(xiàn),鏡下有時候象絲狀寺滚,有時候象珊瑚狀柑营,慢慢地會長出很細的黑色絲狀物,這個時候村视,已經(jīng)晚了由境,細胞很難救活了。
處理方法:趕緊扔掉蓖议,不要再想挽救虏杰,即使再珍貴。然后徹底消毒滅菌培養(yǎng)間勒虾,CO2孵箱纺阔,器皿和培養(yǎng)液。
三修然、霉菌污染
同真菌感染一致笛钝,因為培養(yǎng)液是清亮的质况,所以霉菌污染早期難以發(fā)現(xiàn),等發(fā)現(xiàn)時往往已經(jīng)為時過晚了玻靡。培養(yǎng)液中慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)结榄,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,如同風中柳絮囤捻,一般不仔細看發(fā)覺不出來臼朗。細胞仍可生長,但時間一長蝎土,細胞的狀態(tài)就變差视哑,不再增長。見下圖誊涯。
處理方法:建議果斷舍棄該污染細胞挡毅,將環(huán)境徹底消毒,因為霉菌的頑固可能會導致下幾批細胞都會污染暴构,所以跪呈,采用酒精徹底底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新潔爾滅擦洗一遍取逾,把水盤里加上飽和量的硫酸銅耗绿。千萬不可大意!
四、支原體感染
培養(yǎng)液變渾濁菌赖,支原體感染細胞以后缭乘,細胞病變不很明顯,只是細胞狀態(tài)變差琉用、生長變慢堕绩,在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁邑时。細胞傳代以后就出現(xiàn)細胞間黑點奴紧,細胞空泡化,很多類似凋亡晶丘、壞死的細胞黍氮,最終細胞漂浮,完全死亡浅浮。
處理方法:
如果不是很珍貴的細胞的話沫浆,建議直接扔了吧。還是那句話滚秩,預防為主专执,如果是珍貴的細胞的話,建議使用——支原體清除培養(yǎng)基郁油。
好物推薦——Procell支原體清除培養(yǎng)基
此款支原體清除培養(yǎng)基是Procell在市面上已有的支原體清除培養(yǎng)基基礎上開發(fā)的新一代產(chǎn)品本股,含有清除支原體的特殊成分(一種混合制劑攀痊,可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關蛋白合成來取得良好的支原體清除效果,最大程度上挽救珍貴的細胞拄显,減少因支原體污染帶來的損失)苟径。
此產(chǎn)品經(jīng)過了數(shù)十種細胞的測試和長期的實驗驗證,對細胞無害躬审,對清除支原體污染效果顯著棘街,能夠很好的抑制和殺滅支原體。并且安全可靠盒件,工作濃度低蹬碧,無細胞毒性舱禽。
使用Procell支原體清除培養(yǎng)基處理污染細胞前后對比圖:
五炒刁、黑膠蟲污染
開始污染時對細胞無影響,當數(shù)量達到一定程度時就會對細胞產(chǎn)生影響誊稚。400倍顯微鏡下可見點狀或片狀游動小體翔始,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響里伯,細胞還是可以用的城瞎。常常是細胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運動物無明顯增多疾瓮,且培養(yǎng)液顏色脖镀、透明度無明顯變化,對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響狼电,在細胞增殖旺盛之后會自然消失蜒灰,除更換血清外無須特殊處理。
處理方法:可以增加細胞的種板密度肩碟,以提高細胞的生存率强窖,盡早處理細胞,越快越好削祈。如果實在來不及了翅溺,推薦使用——黑膠蟲清除培養(yǎng)基
好物推薦——Procell 黑膠蟲清除培養(yǎng)基
Procell 黑膠蟲清除培養(yǎng)基經(jīng)過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證,對細胞無害髓抑,對清除“黑膠蟲”污染效果顯著咙崎,能夠很好的殺滅和抑制“黑膠蟲”,秒殺其它品牌的支原體培養(yǎng)基吨拍。
使用Procell黑膠蟲清除培養(yǎng)基理污染細胞前后對比圖:
學會對各種污染情況的辨別和處理是一項不可或缺的實驗技能褪猛,希望大家在看完我們的文章后結(jié)合你的實驗操作,學會如何應對細胞污染密末。
好了握爷,學霸姐姐只能幫你到這里了跛璧,剩下的,就靠你自己了新啼。
生物女學霸追城,一個自稱學霸其實很渣的生物汪,
努力將有趣的燥撞、有用的座柱、有血有肉的科研那些事兒呈現(xiàn)給大家,
關注一個好不啦~