及時止損需要細心辐赞，時時觀察和記錄括享，尤其在做了不規(guī)范的操作，看到了不符合預期的現(xiàn)象時珍促，必須詳細記錄铃辖，把現(xiàn)象解釋清楚了再進行下一步操作，不然做多錯多猪叙。
比如6月底開始做crispr篩選娇斩，有兩個地方出現(xiàn)了不規(guī)范操作和不符合預期現(xiàn)象：（1）測病毒滴度：paper上是離心轉染，24孔板轉染細胞量非常大穴翩，為2*10^6個/孔犬第。我轉染時沒有離心，轉染后換上清時芒帕，大量的細胞沒有貼壁而丟失歉嗓，實驗結果就不準確，重復結果一致性差背蟆。下一步實驗只能在不準確的數(shù)據(jù)基礎上進行（2）paper說計算抗生素致死劑量時要取最低濃度鉴分，不然可能會殺死被轉入了多個質(zhì)粒的細胞，而且在做最低殺傷曲線時带膀，鋪板的細胞量非常少志珍，約為10%鋪板密度。轉染后垛叨，細胞密度接近90%伦糯，我用最低濃度，培養(yǎng)上清15ml嗽元，開始藥篩3天后觀察細胞并沒有太多懸浮細胞敛纲，藥篩持續(xù)了6天，沒有出現(xiàn)預期現(xiàn)象还棱，培養(yǎng)皿里的細胞幾乎沒減少载慈，但是對照組的細胞被殺死完了，我也不清楚到底是否轉染成功了珍手，沒有收獲一些細胞用pcr或者加大抗生素濃度進一步驗證办铡，而是繼續(xù)進行了下一步實驗辞做，到了今天收獲的細胞dna擴增不出來sgRNA片段，不排除是當時沒有轉染成功寡具。
方法：每日記錄實驗流水賬秤茅，各種細節(jié)；每日反省今日的不符合規(guī)范的操作和不符合預期的現(xiàn)象童叠；每周進行工作總結框喳，回顧計劃目的，調(diào)整實施方法和方向厦坛。
持續(xù)的飽有能量的工作狀態(tài)的方法：偶爾打雞血很容易五垮，但是持續(xù)的、專注的杜秸、時時充滿能量的去做一件事情非常困難放仗，這是一件反人性的事情，人性就是懶惰撬碟、隨時轉移注意力诞挨、好奇、喜新厭舊呢蛤。就比如人們總是對商店新品充滿了好奇和興趣惶傻。工作狀態(tài)受到心理和生理兩方面的影響，要想在生理和心理兩方面都達到充沛積極的狀態(tài)其障，必要靠意志力約束自己進行生理上和心理上的練習银室，這是反人性的，所以也是很困難的励翼，絕大多數(shù)人做不到粮揉，做到了也就超出了絕大多數(shù)人。deadline就是生產(chǎn)力抚笔，人在輕松自在無目標約束的情況下生產(chǎn)力是極其低下的扶认，尤其是長期工作，很容易忘記初心殊橙，這也是人性辐宾，所以必須時時反省，反省自己開始一項任務時的原因膨蛮、預期結果是什么叠纹。
方法：
生理、心理練習包括早晨八段錦敞葛、呼吸練習誉察、冥想；晚上瑜伽惹谐、呼吸練習持偏、冥想驼卖，每日堅持不輟，除非在禁食日鸿秆，重感冒日可以停一次酌畜，其余時間都必須練習。修習不凈觀卿叽，戒除對于電子產(chǎn)品桥胞、各種娛樂的貪戀，無事可做就發(fā)呆考婴，練習靜默贩虾。
不忘初心：在開始一項計劃之前，一定要詳細記錄開始計劃的初衷沥阱、可行性整胃、可能的困難，預期產(chǎn)出喳钟。
