FastQC質(zhì)控報告解讀

一般FastQC分析結(jié)果產(chǎn)生有2種類型的文件宴咧,一種.zip,一種.html径缅。直接點擊.html文件掺栅,即可在瀏覽器中查看質(zhì)控結(jié)果報告。

總覽
Summary

首先是Summary芥驳,這一部分是整個報告的目錄柿冲,整個報告分成若干個部分。合格會有綠色的對勾兆旬,警告是黃色感嘆號假抄,不合格是紅叉。

The analysis in FastQC is performed by a series of analysis modules. The left hand side of the main interactive display or the top of the HTML report show a summary of the modules which were run, and a quick evaluation of whether the results of the module seem entirely normal (green tick), slightly abnormal (orange triangle) or very unusual (red cross).

1.1 Basic Statistics

Filename: 文件名
File type: 文件類型
Encoding: 測序平臺的版本和相應(yīng)的編碼版本號丽猬,在計算Phred反推error P時有用
Total Sequences: 輸入文本的reads數(shù)量
Sequence length: 測序長度
%GC: GC含量宿饱,表示整體序列的GC含量。

1.2 Per base sequence quality

縱坐標(biāo)為測序質(zhì)量脚祟,用單堿基錯誤率Q表示谬以,其中Q = -10*log10(error P)。根據(jù)測序質(zhì)量劃分成3個區(qū)間由桌,0-20之間为黎,紅色背景邮丰,測序質(zhì)量差;20-28之間铭乾,黃色背景剪廉,測序質(zhì)量一般;28以上炕檩,綠色背景斗蒋,測序質(zhì)量高。
橫坐標(biāo)為序列長度笛质,從序列的起始位置開始泉沾,統(tǒng)計所有序列在該位置上堿基的質(zhì)量,并用箱線圖表示妇押,箱線圖上紅色的線代表所有堿基質(zhì)量的中位數(shù)跷究,藍(lán)色的線帶代表所有堿基質(zhì)量的平均數(shù),黃色箱體的上下邊緣分別代表上下四分位數(shù)敲霍,箱體圖最下方的橫線代表第10百分位數(shù)揭朝,最上方的橫線代表第90百分位數(shù)。

1.3 Per tile sequence quality

每個tail測序情況色冀,橫軸表示堿基位置,縱軸表示tail的index編號柱嫌,這個圖主要是為了防止在測序過程中某些tail受到不可控因素的影響而出現(xiàn)測序質(zhì)量偏低锋恬,藍(lán)色表示測序質(zhì)量很高,暖色表示測序質(zhì)量不高编丘。當(dāng)某些tail出現(xiàn)暖色与学,可以在后續(xù)分析中把該tail測序的結(jié)果全部去除。

1.4 Per sequence quality scores

假如1條序列長度為63bp嘉抓,那么這63個位置每個位置Q值的平均值就是這條reads的質(zhì)量值索守。
橫軸是0-40,表示Q值抑片,縱軸是每個值對應(yīng)的reads數(shù)目卵佛。

1.5 Per base sequence content

橫坐標(biāo)為序列長度,縱坐標(biāo)為各堿基的百分比敞斋。理論上來說截汪,A和T應(yīng)該相等,G和C應(yīng)該相等植捎。

1.6 Per sequence GC content

橫坐標(biāo)為reads GC含量(0 - 100%)衙解,縱坐標(biāo)為每條序列GC含量對應(yīng)的數(shù)量。
藍(lán)線是程序根據(jù)經(jīng)驗分布給出的理論值焰枢,紅色是真實值蚓峦,兩條線應(yīng)該比較接近才比較好舌剂。當(dāng)紅色出現(xiàn)雙峰時表示混入了其它物種DNA序列。

1.7 Per base N content

當(dāng)出現(xiàn)測序儀不能分辨的堿基時會產(chǎn)生N暑椰,該圖統(tǒng)計了N堿基的含量分布霍转。橫坐標(biāo)為序列長度,縱坐標(biāo)為N堿基的比例干茉。

1.8 Sequence Length Distribution
1.9 Sequence Duplication Levels

統(tǒng)計序列完全一致的reads的頻率谴忧,橫坐標(biāo)表示重復(fù)的次數(shù),縱坐標(biāo)表示重復(fù)的reads的數(shù)目( 以unique reads的總數(shù)作為100%)角虫。測序深度越高沾谓,越容易產(chǎn)生一定程度的duplication,這是正常的現(xiàn)象戳鹅,但如果duplication的程度很高均驶,就提示我們可能有bias的存在。
發(fā)現(xiàn)一個講得非常好的文章枫虏,鏈解放在這里:https://zhuanlan.zhihu.com/p/44914479

1.10 Overrepresented Sequences

反復(fù)出現(xiàn)的序列妇穴。

1.11 Adapter Content

此圖衡量的是序列中兩端adapter的情況,橫坐標(biāo)為堿基在reads中的位置隶债,縱坐標(biāo)表示該位置的堿基為測序接頭序列堿基的百分比腾它。

參考:
http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/Help/
https://cloud.tencent.com/developer/article/1625196
https://zhuanlan.zhihu.com/p/20731723

最后編輯于
?著作權(quán)歸作者所有,轉(zhuǎn)載或內(nèi)容合作請聯(lián)系作者
  • 序言:七十年代末,一起剝皮案震驚了整個濱河市死讹,隨后出現(xiàn)的幾起案子瞒滴,更是在濱河造成了極大的恐慌,老刑警劉巖赞警,帶你破解...
    沈念sama閱讀 207,113評論 6 481
  • 序言:濱河連續(xù)發(fā)生了三起死亡事件妓忍,死亡現(xiàn)場離奇詭異,居然都是意外死亡愧旦,警方通過查閱死者的電腦和手機(jī)世剖,發(fā)現(xiàn)死者居然都...
    沈念sama閱讀 88,644評論 2 381
  • 文/潘曉璐 我一進(jìn)店門,熙熙樓的掌柜王于貴愁眉苦臉地迎上來笤虫,“玉大人旁瘫,你說我怎么就攤上這事∏眚牵” “怎么了境蜕?”我有些...
    開封第一講書人閱讀 153,340評論 0 344
  • 文/不壞的土叔 我叫張陵,是天一觀的道長凌停。 經(jīng)常有香客問我粱年,道長,這世上最難降的妖魔是什么罚拟? 我笑而不...
    開封第一講書人閱讀 55,449評論 1 279
  • 正文 為了忘掉前任台诗,我火速辦了婚禮完箩,結(jié)果婚禮上,老公的妹妹穿的比我還像新娘拉队。我一直安慰自己弊知,他們只是感情好,可當(dāng)我...
    茶點故事閱讀 64,445評論 5 374
  • 文/花漫 我一把揭開白布粱快。 她就那樣靜靜地躺著秩彤,像睡著了一般。 火紅的嫁衣襯著肌膚如雪事哭。 梳的紋絲不亂的頭發(fā)上漫雷,一...
    開封第一講書人閱讀 49,166評論 1 284
  • 那天,我揣著相機(jī)與錄音鳍咱,去河邊找鬼降盹。 笑死,一個胖子當(dāng)著我的面吹牛谤辜,可吹牛的內(nèi)容都是我干的蓄坏。 我是一名探鬼主播,決...
    沈念sama閱讀 38,442評論 3 401
  • 文/蒼蘭香墨 我猛地睜開眼丑念,長吁一口氣:“原來是場噩夢啊……” “哼涡戳!你這毒婦竟也來了?” 一聲冷哼從身側(cè)響起脯倚,我...
    開封第一講書人閱讀 37,105評論 0 261
  • 序言:老撾萬榮一對情侶失蹤妹蔽,失蹤者是張志新(化名)和其女友劉穎,沒想到半個月后挠将,有當(dāng)?shù)厝嗽跇淞掷锇l(fā)現(xiàn)了一具尸體,經(jīng)...
    沈念sama閱讀 43,601評論 1 300
  • 正文 獨居荒郊野嶺守林人離奇死亡编整,尸身上長有42處帶血的膿包…… 初始之章·張勛 以下內(nèi)容為張勛視角 年9月15日...
    茶點故事閱讀 36,066評論 2 325
  • 正文 我和宋清朗相戀三年舔稀,在試婚紗的時候發(fā)現(xiàn)自己被綠了。 大學(xué)時的朋友給我發(fā)了我未婚夫和他白月光在一起吃飯的照片掌测。...
    茶點故事閱讀 38,161評論 1 334
  • 序言:一個原本活蹦亂跳的男人離奇死亡内贮,死狀恐怖,靈堂內(nèi)的尸體忽然破棺而出汞斧,到底是詐尸還是另有隱情夜郁,我是刑警寧澤,帶...
    沈念sama閱讀 33,792評論 4 323
  • 正文 年R本政府宣布粘勒,位于F島的核電站竞端,受9級特大地震影響,放射性物質(zhì)發(fā)生泄漏庙睡。R本人自食惡果不足惜事富,卻給世界環(huán)境...
    茶點故事閱讀 39,351評論 3 307
  • 文/蒙蒙 一技俐、第九天 我趴在偏房一處隱蔽的房頂上張望。 院中可真熱鬧统台,春花似錦雕擂、人聲如沸。這莊子的主人今日做“春日...
    開封第一講書人閱讀 30,352評論 0 19
  • 文/蒼蘭香墨 我抬頭看了看天上的太陽。三九已至贵扰,卻和暖如春仇穗,著一層夾襖步出監(jiān)牢的瞬間,已是汗流浹背拔鹰。 一陣腳步聲響...
    開封第一講書人閱讀 31,584評論 1 261
  • 我被黑心中介騙來泰國打工仪缸, 沒想到剛下飛機(jī)就差點兒被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道東北人列肢。 一個月前我還...
    沈念sama閱讀 45,618評論 2 355
  • 正文 我出身青樓恰画,卻偏偏與公主長得像,于是被迫代替她去往敵國和親瓷马。 傳聞我的和親對象是個殘疾皇子拴还,可洞房花燭夜當(dāng)晚...
    茶點故事閱讀 42,916評論 2 344

推薦閱讀更多精彩內(nèi)容