目的-阻斷免疫抑制性PD-1 / PD-L1途徑在多種癌癥類型中均具有抗腫瘤活性浮定，并且PD-L1在腫瘤細(xì)胞和浸潤(rùn)性髓樣細(xì)胞上的表達(dá)與反應(yīng)的可能性相關(guān)伦连。 我們先前發(fā)現(xiàn)撮躁，PDG-L1 +與PD-L1（-）黑色素瘤中的TILs過度表達(dá)了IFNG（干擾素-γ），通過促進(jìn)PD-L1的展示而產(chǎn)生了適應(yīng)性免疫抵抗牙甫。 進(jìn)行當(dāng)前的研究以鑒定PD-L1 +黑色素瘤微環(huán)境中協(xié)同促進(jìn)免疫抑制的其他因素滩褥。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)-用免疫組織化學(xué)（IHC）評(píng)估存檔的福爾馬林固定石蠟包埋的黑色素瘤標(biāo)本在腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1蛋白表達(dá)病蛉。 使用全基因組表達(dá)分析，定量（q）RT-PCR瑰煎，免疫組織化學(xué)和功能性體外驗(yàn)證研究來(lái)評(píng)估PD-L1 +與PD-L1（-）黑色素瘤中差異表達(dá)的因子铺然。
結(jié)果-基于全基因組表達(dá)譜的功能注釋聚類揭示了PD-L1 +黑色素瘤中上調(diào)的途徑，涉及免疫細(xì)胞激活酒甸，炎癥以及抗原加工和呈遞魄健。 通過qRT-PCR進(jìn)行的分析表明，PD-L1 +黑色素瘤中功能相關(guān)基因的過量表達(dá)插勤，涉及CD8 + T細(xì)胞活化（CD8A沽瘦，IFNG，PRF1农尖，CCL5）析恋，抗原呈遞（CD163，TLR3盛卡，CXCL1助隧，LYZ）和免疫抑制[ PDCD1（PD-1），CD274（PD-L1）滑沧，LAG3并村，IL10]巍实。 功能研究表明，某些因素（包括IL-10和IL-32-γ）可誘導(dǎo)PD-L1在單核細(xì)胞而非腫瘤細(xì)胞上的表達(dá)哩牍。
結(jié)論—這些研究闡明了腫瘤微環(huán)境中免疫檢查點(diǎn)調(diào)節(jié)的復(fù)雜性棚潦，確定了可能導(dǎo)致協(xié)同免疫抑制的多種因素。 這些因素可能提供抗PD-1 / PD-L1治療的腫瘤逃逸機(jī)制姐叁，在組合免疫調(diào)節(jié)治療策略中應(yīng)考慮將它們作為共同靶向瓦盛。
方法
黑色素瘤標(biāo)本通過免疫組織化學(xué)（IHC）分析
全基因組微陣列分析
多重 qRT-PCR
組織切片中淋巴細(xì)胞活化基因3（LAG-3）表達(dá)的分析
細(xì)胞培養(yǎng)
重組細(xì)胞因子和趨化因子
細(xì)胞因子和趨化因子對(duì)培養(yǎng)的黑色素瘤PD-L1表達(dá)的影響
細(xì)胞因子和趨化因子對(duì)人PBMC（T細(xì)胞和單核細(xì)胞）PD-1 / PD-L1表達(dá)的影響
流式細(xì)胞儀分析
結(jié)果
