293細胞不是一個人在戰(zhàn)斗
對于做分子生物學(xué)實驗的人來說才写，293細胞再熟悉不過了葡兑。常在文獻中看到不同的293名字，全然沒考慮過293細胞原來還是團隊作案赞草，分身無數(shù)讹堤。
293細胞家族譜系
從文章中看到293細胞的譜系變化如下
不同293細胞的區(qū)別與使用范圍
1. HEK293 or 293 cells
在1973年，科學(xué)家從一個父母譜系不祥的人類流產(chǎn)胚胎的腎臟中分離出最原始的293細胞（human embryonic kidney (HEK) 293 cell line）房资，該細胞被轉(zhuǎn)入修改后的5型腺病毒DNA片段蜕劝，一開始轉(zhuǎn)化非常困難，一直到幾個月后轰异，科學(xué)家得到一個穩(wěn)定的可以快速生長的293單克隆細胞株岖沛，自此HEK293 or 293細胞(ATCC CRL-1573)誕生。已知這個長達4.35 kb的腺病毒基因組片段已整合到宿主細胞的19號染色體中搭独，并編碼E1A/E1B蛋白婴削，這些蛋白可干擾控制細胞周期的信號通路通路并抑制細胞凋亡。細胞遺傳學(xué)分析證實293系假三倍體牙肝。https://www.atcc.org/products/all/CRL-1573.aspx#characteristics為了方便起見唉俗，以下HEK293全用293來指代。
2. 293S
1985年配椭，使用逐漸適應(yīng)性培養(yǎng)的方法（培養(yǎng)在低鈣環(huán)境中）虫溜，從293細胞中構(gòu)建出了293S細胞。293S后面的S是suspension（懸腹筛住）的縮寫衡楞，顧名思義，293S就是懸浮的293細胞敦姻。而這個細胞的構(gòu)建過程大約花費了7個月的時間瘾境。
2.1 293SG
2001-2002年293SG細胞出現(xiàn)，該細胞由293S經(jīng)由甲磺酸乙酯（EMS）誘變得來镰惦，并篩選出蓖麻毒素抗性克隆迷守。 該品系缺乏N-乙酰氨基葡萄糖氨基轉(zhuǎn)移酶I活性（由MGAT1基因編碼），因此主要用于Man5GlcNAc2 N-聚糖修飾糖蛋白旺入。 然后兑凿，獲得含有TetR報告系統(tǒng)的糖工程細胞，可使用四環(huán)素誘導(dǎo)的蛋白表達茵瘾。 該細胞系被廣泛用于生產(chǎn)均一的N-糖基化蛋白急膀，并被稱為293SG。同時還有用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用篩選的293FTM和糖工程技術(shù)293SGGD細胞系（2010年）龄捡。
3. 293T
1985年卓嫂，表達SV40 T抗原的溫敏等位基因的293T誕生，這使得含有SV40 ori的載體得以擴增聘殖，從而顯著提高瞬時轉(zhuǎn)染的表達水平晨雳。SV40 T可與p53形成復(fù)合物并抑制p53行瑞，從而可能進一步損害基因組完整性。需要注意的是餐禁，由于SV40大T抗原的存在血久，該細胞對G418耐藥，因此在使用該細胞進行試驗的時候應(yīng)避免使用G418作為抗性基因篩選帮非。
什么是SV40氧吐？
SV40全名猿猴空泡病毒40（Simian vacuolating virus 40）或猿猴病毒40（Simian virus 40），是一種多瘤病毒末盔，也是一種DNA病毒筑舅，有造成腫瘤發(fā)生的潛在能力，不過通常會維持于潛伏感染（latent infection）狀態(tài)陨舱。這種病毒是在1960年翠拣，于用來生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎疫苗的恒河猴細胞中發(fā)現(xiàn)。它由于在受感染的青猴細胞所產(chǎn)生的異常數(shù)量的液泡而得名游盲。這種病毒在獼猴中是休眠而不引起癥狀误墓。在野外很多獼猴種群均有發(fā)現(xiàn)，它極少造成疾病益缎。然而谜慌，在具有免疫缺陷—由于，比如說莺奔，受猴免疫缺陷病毒感染—的猴中欣范，SV40表現(xiàn)得非常像人的JC和BK多瘤病毒，造成腎臟疾病和有時是類似于進行性多灶性白質(zhì)腦病的脫髓鞘疾病弊仪。在其它物種，尤其是倉鼠]杖刷，SV40引起多種腫瘤励饵，通常是肉瘤。在大鼠中滑燃，這種致瘤的SV40大T抗原被用來建立關(guān)于原始神經(jīng)外胚層瘤和成神經(jīng)管細胞瘤的腦腫瘤模型
SV40 T antigen
SV40大T抗原（猿猴空泡病毒40 TAg）是六聚體蛋白役听，它是衍生自SV40病毒的顯性作用癌蛋白。TAg能夠誘導(dǎo)多種細胞類型的惡性轉(zhuǎn)化表窘。TAg的轉(zhuǎn)化活性很大程度上歸因于它對視網(wǎng)膜母細胞瘤[pRb和p53腫瘤抑制蛋白的干擾典予。因此，SV40 T結(jié)合p53并導(dǎo)致細胞周期控制失調(diào)乐严，從而使得細胞轉(zhuǎn)化效率提高瘤袖。
簡單小結(jié)：通過上面的描述，我們這里有一張更為詳細的293細胞譜系圖
3.1 293T/17 和 293T/17 SF
（1） 293T/17由293T細胞中共轉(zhuǎn)染入pBND （從BAG質(zhì)粒修改而來）和 pZAP （wild-type moloney virus昂验，小鼠白血病病毒M-MuLV改造而來）質(zhì)粒而得捂敌。該細胞系在保有293T細胞的特性之外艾扮，由于逆轉(zhuǎn)錄病毒片段的插入，使得細胞可以用于產(chǎn)高滴度的逆轉(zhuǎn)錄病毒占婉，同時該細胞仍在對G418耐藥泡嘴。
（2）根據(jù)ATCC的介紹，293T/17 SF是懸浮狀態(tài)的293T/17逆济。由于SV40 T的存在酌予，使其可以用于提高瞬時轉(zhuǎn)染情況下細胞的蛋白表達水平。已經(jīng)證實含有CMV啟動子的表達載體在293T/17 SF細胞系中具有高水平的蛋白表達奖慌。但文獻中圖示提出293T/17 SF是由293T/17經(jīng)由EBV病毒感染而來抛虫，但我沒有找到相關(guān)證據(jù)，該文獻也并未指出參考資料升薯，有可能是圖片指示不明莱褒。
尋找pZAP和pBND，這兩個質(zhì)粒打到谷歌上都很難搜索出來涎劈，對于pZAP還好广凸，而pBND只有在非常老的文章里面我才能找到一些蹤影。通過研究者兩個質(zhì)粒的backbone以及文章描述蛛枚，我們大概可以明白：（1）293T細胞具有SV40 T區(qū)域谅海，使得帶有SV40 ori質(zhì)粒能夠快速擴增；（2）在293T細胞中轉(zhuǎn)入帶有逆轉(zhuǎn)錄病毒元件+半乳糖苷酶(B-galactosidase)-SV40 promoter的質(zhì)粒蹦浦，結(jié)合SV40大T抗原扭吁，從此逆轉(zhuǎn)錄病毒產(chǎn)量得以提高。
3.2 ANJOU 65 cells
將pCRIPenv-和pCRIPgag-2載體共轉(zhuǎn)染到293T/17中盲镶，得到ANJOU 65細胞系侥袜。ANJOU 65細胞與pCRIPgag-2和pGPT2E載體共轉(zhuǎn)染，獲得BOSC 23生態(tài)型包膜表達包裝細胞系溉贿。ANJOU 65細胞也與pCRIPAMgag載體和表達gpt耐藥基因的質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染枫吧，獲得Bing(見ATCC CRL-11554)兩性包膜表達包裝細胞系。
4. 293H
293H細胞來自表達E1A腺病毒基因的HEK293細胞宇色，具有更好的粘附性九杂，可用于用于噬菌斑檢測和其他依賴于anchorage dependent applications。
4.1 293E and 293-6E
（1）在293H中插入EBNA-1（Epstein-Barr virus nuclear antigen 1宣蠕，EBV病毒核抗原）基因得到293E例隆，在穩(wěn)定表達EBV’s EBNA1蛋白的細胞系中使用含有EBV oriP（EBV復(fù)制起點）的重組蛋白表達載體，可顯著提高重組蛋白產(chǎn)量抢蚀。
（2）293-6E是在293H細胞中插入缺少Gly-Gly-Ala重復(fù)區(qū)的EBNA1（EBNA1t）而得镀层，Gly-Gly-Ala結(jié)構(gòu)域的缺乏使得瞬時基因表達得到增強，蛋白表達能力提升皿曲。與HEK293-EBNA相比鹿响，其產(chǎn)生重組蛋白的能力增強羡微。
5. 293 F
293-F是293細胞系的一個快速增長的衍生細胞系，GIBCO說可以用于無菌懸浮培養(yǎng)惶我。
5.1 293FT cells
293FT細胞由293F細胞系中插入SV40 large T antigen妈倔，其特點是增殖速度快，易轉(zhuǎn)染绸贡，主要用于用于慢病毒的生產(chǎn)盯蝴。此外需要注意，該細胞也是G418耐藥細胞系听怕。
6. Flp-In? T-REx? 293 Cell Line （Thermo Fisher）
Flp-In 293 T-REx細胞系是為了快速生成穩(wěn)定的細胞系而設(shè)計的捧挺，它可以確保從Flp-In表達載體上獲得的蛋白的均勻表達。這些細胞在轉(zhuǎn)錄活躍的基因組位點上包含一個穩(wěn)定整合的FRT位點尿瞭，有針對性的整合Flp-In表達載體闽烙，確保高水平目的基因。Flp-In t -293細胞系包含穩(wěn)定整合的pFRT lacZeo和pcDNA 6 TR(來自T-REx系統(tǒng))声搁。用Flp- in表達載體和Flp重組酶載體pOG44共轉(zhuǎn)染Flp- in細胞系黑竞，可將表達載體定向整合到每個細胞的同一位點，保證基因表達的同質(zhì)性疏旨。（公司主頁翻譯而來）
6.1 293FTM cells
293FTM細胞來源于Flp-In 293 T-REx 293細胞很魂，該細胞系中轉(zhuǎn)入了ecotropic receptor質(zhì)粒和MAPPIT(哺乳動物蛋白-蛋白相互作用阱)報告質(zhì)粒，該細胞系主要用于蛋白相互作用關(guān)系的研究檐涝。
小結(jié)
綜合來看遏匆，293細胞在轉(zhuǎn)入SV40 T之后名字上會多一個“T”，該類細胞粘附生長并生長速度快谁榜，之后根據(jù)不同需求則有了不同的變體：（1）懸浮培養(yǎng)用293衍生細胞系幅聘，名字會加“S”或者“SF”，一般通過適應(yīng)性試驗得到窃植；（2）高產(chǎn)逆轉(zhuǎn)錄病毒293細胞系帝蒿，轉(zhuǎn)入帶有SV 40啟動子以及含有小鼠白血病腺病毒片段的載體，使得細胞高產(chǎn)腺病毒撕瞧；（3）用于產(chǎn)蛋白的293細胞陵叽；（4）用于包裝慢病毒的293細胞狞尔；（5）用于構(gòu)建特異性表達蛋白的293細胞丛版。具體該怎么選擇293細胞，心里有數(shù)了吧~
參考文獻：
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