「文獻(xiàn)01」ATAC-pipe: ATAC-seq分析的工具包

日期:2019年1月6日——2019-Week1
分類:「工具」
題目:ATAC-pipe: general analysis of genome-wide chromatin accessibility
DOI: 10.1093/bib/bby056
雜志:Briefings in Bioinformatics
關(guān)鍵詞: ATAC; chromatin accessibility; transcription factor; regulatory network

摘要

ATAC-pipe是中科大Kun Qu實(shí)驗(yàn)室開發(fā)的一個(gè)打包軟件包自沧,用于分析bulk ATAC-Seq鞭铆。主要功能包括:

  • 鑒定顯著差異的開放染色質(zhì)區(qū)域
  • motif分析及相關(guān)的TFs對(duì)轉(zhuǎn)錄調(diào)控的影響
  • TF和motif的足跡分析以及核小體占位的可視化
  • 基于相關(guān)性的細(xì)胞聚類分析
  • 構(gòu)建TF調(diào)控網(wǎng)絡(luò)吼渡,評(píng)估TFs和基因間的相互作用

詳細(xì)用法參考: https://github.com/QuKunLab/ATAC-pipe
或者 manual for ATAC-pipe:
https://github.com/QuKunLab/ATAC-pipe/blob/master/Manual_for_ATAC-pipe.pdf


材料和方法

1. 流程和算法

ATAC-pipe是基于其他工具和軟件包的芝薇,需要在Linux/MAC OS平臺(tái)安裝 requires Bowtie2, Picard, MACS2, HOMER, Python和R的環(huán)境漓雅,以及相關(guān)的參考基因組和DESeq R包饵隙。

  • 比對(duì): Bowtie2
  • 去重: Picard
  • peak calling: MACS2
  • count標(biāo)準(zhǔn)化和差異分析:DESeq
  • 聚類和熱圖:Cluster 3.0 和 Treeview
  • TF motifs分析: Homer and msCentipede
  • 序列遷移丽猬,TSS富集值和分布拂铡,V-plot, TF調(diào)控網(wǎng)絡(luò):他們自己實(shí)驗(yàn)室寫的代碼

2. 與其他工具的比較

他們的介紹是「ATAC-pipe功能多,其他工具可能只是包含QC终惑,比對(duì)绍在,peak calling等基本步驟,但是ATAC-pipe還包含樣本聚類,motif 搜索偿渡,足跡驗(yàn)證臼寄、核小體占位分析和TF調(diào)控網(wǎng)絡(luò)分析,而且更重要的是可以鑒定顯著差異開放染色質(zhì)區(qū)域和這些區(qū)域的TF motif富集, 另外所需時(shí)間與其他工具相比較少」溜宽。
(他們介紹的優(yōu)點(diǎn)了解下即可吉拳,其實(shí)很多工具都可以實(shí)現(xiàn)相同的功能,其他工具的功能和原理也要了解一下)


ATAC-pipe與其他工具的比較

結(jié)果

看一下這個(gè)流程包可以給出哪些結(jié)果

結(jié)果1:質(zhì)控

測(cè)序質(zhì)量QC

實(shí)驗(yàn)QC

結(jié)果2:相關(guān)性和差異peaks分析

相關(guān)性和差異peaks分析

結(jié)果3:TF 富集分析

差異開放染色質(zhì)區(qū)域和這些區(qū)域的motif富集分析

結(jié)果4:TF motif足跡分析和核小體占位分析

TF motif足跡分析和核小體占位分析

結(jié)果5:TF驅(qū)動(dòng)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

TF驅(qū)動(dòng)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)

討論

使用他人打包的工具包有人可能覺得省時(shí)方便,但是會(huì)有很多限制适揉,不夠靈活留攒。而且他們這個(gè)工具包本身需要安裝很多工具,最終是包裝成python模塊嫉嘀,使用時(shí)是需要有l(wèi)inux和python基礎(chǔ)的炼邀。他們的分析結(jié)果有很多工具和方法可以實(shí)現(xiàn),對(duì)于這篇文章也就是了解下他們進(jìn)行ATAC-seq分析時(shí)使用的方法剪侮,同時(shí)了解下文章中做比較時(shí)提到其他工具拭宁。

如果想實(shí)現(xiàn)個(gè)性化和彈性化的分析,還是需要自己了解掌握每一步的分析流程瓣俯,具體方法可以參考之前的帖子:


另外記得在去年蘇州單細(xì)胞會(huì)議的海報(bào)展示在旱,Kun Qu老師實(shí)驗(yàn)室展示了一個(gè)用于sc-ATAC分析的工具包APEC(不知道發(fā)表沒)。


APEC的文章已在預(yù)印版上發(fā)出:https://www.biorxiv.org/content/early/2019/05/23/646331.full.pdf

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