轉(zhuǎn)化子的遺傳穩(wěn)定性的確定是通過將轉(zhuǎn)化子連續(xù)繼代五代甚至更多代以后阱佛,觀察其是否具有潮霉素B抗性,且通過PCR檢測(cè)是否仍然可以擴(kuò)出相應(yīng)大小的潮霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶基因片段。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
A,B,C三個(gè)基因在CYA固體培養(yǎng)基上共培養(yǎng)后均長出了相應(yīng)的轉(zhuǎn)化子咕别,接下來在抗性平板上傳三代,若能穩(wěn)定遺傳写穴,則提取Genome DNA惰拱,設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
傳代培養(yǎng):
CYA固體培養(yǎng)基(潮霉素B 250μg/mL啊送,羧芐青霉素鈉500μg/mL)
第一代轉(zhuǎn)化子.jpg
第二代轉(zhuǎn)化子.jpg
圖片來自挑取轉(zhuǎn)化子筆記.jpg