RNA-seq分析簡潔版,用重新下載的肝癌數(shù)據(jù)進(jìn)行從頭分析,包含了以下詳細(xì)過程的幾乎所有流程代碼和部分關(guān)鍵結(jié)果奖亚。同時,KEGG可視化部分用了ClusterProfiler的結(jié)果。并把counts結(jié)果菲饼,DEGs結(jié)果和gene symbols 全部整合到一個矩陣中嘿期。
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RNA-seq詳細(xì)分析過程啃勉,從軟件安裝到富集分析,完整流程鏈接如下:
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RNA-seq(1) :用conda安裝RNA-seq所需要的工具
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RNA-seq(2)-1:原始數(shù)據(jù)下載的幾種方法
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RNA-seq(2)-2:下載數(shù)據(jù)
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RNA-seq(3):sra到fastq格式轉(zhuǎn)換并進(jìn)行質(zhì)量控制
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RNA-seq(4):下載參考基因組及基因注釋
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RNA-seq(5):序列比對:Hisat2
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RNA-seq(6): reads計(jì)數(shù)历谍,合并矩陣并進(jìn)行注釋
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RNA-seq(7): DEseq2篩選差異表達(dá)基因并注釋(bioMart
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RNA-seq(8): 探索分析結(jié)果:Data visulization
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RNA-seq(9):富集分析(功能注釋)
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RNA-seq(10):KEGG通路可視化:gage和pathview
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后記:下面接著前面的DEGs往下寫,主要有
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PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建(Cytoscape)先提前看下co-expression的理論基礎(chǔ)和意義以及工具
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關(guān)鍵基因篩選辣垒,也先提前看下關(guān)鍵基因和hub基因等的區(qū)別聯(lián)系等