甲基化組學全流程生信分析教程

甲基化組學全流程分析和可視化教程

讀取數(shù)據(jù)目錄下的idat文件的甲基化全流程一鍵分析

功能簡介

  1. 甲基化分析模塊可以實現(xiàn)甲基化芯片450K, 870kEPIC數(shù)據(jù)的自動讀取,可以讀取idat文件,也可以讀取beta甲基化矩陣文件
  2. 甲基化數(shù)據(jù)的缺失值插值
  3. 甲基化數(shù)據(jù)的質(zhì)控分析
  4. 甲基化數(shù)據(jù)的歸一化處理分析
  5. 甲基化數(shù)據(jù)的SVD分析
  6. 甲基化數(shù)據(jù)的Combat去除批次效應(yīng)分析
  7. 甲基化數(shù)據(jù)的DMP差異甲基化位點分析
  8. 甲基化數(shù)據(jù)的DMR差異甲基化區(qū)域分析
  9. 甲基化數(shù)據(jù)的差異block分析
  10. 甲基化數(shù)據(jù)的GSEA分析
  11. 甲基化數(shù)據(jù)的CNA分析

參數(shù)解釋

func_arraytype:可選450k或EPIC,EPIC是870K的甲基化芯片

func_resultsDir: 分析結(jié)果要保存的目錄

func_compare__groups__str: 做DMP和DMR分析時候要指定的比較分組,多個分組間用;號隔開

func_runBlock:是否進行比較耗時的block分析,默認為FALSE

func_runGSEA: 是否進行比較耗時的GSEA分析,默認為FALSE

func_runCNA: 是否進行比較耗時的CNA分析,默認為FALSE

nested_function: 是否嵌套函數(shù)

run_file_path: 甲基化.idat格式的原始數(shù)據(jù)所在的目錄

run_read_file:是否要讀取文件

run_analysis_type_name: 分析項目名稱

run_add__res__dir: 是否要創(chuàng)建res_dir結(jié)果目錄

run_add_save_file_prefix: 是否要添加結(jié)果保存文件的前綴

run_add__parent__dir:是否在上一級目錄下創(chuàng)建目錄或保存結(jié)果

提交

參數(shù)給定的默認值

func_arraytype: 450K ;

func_resultsDir: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results/ ;

func_compare__groups__str: T-C ; func_runBlock: FALSE ; func_runGSEA: FALSE ; func_runCNA: FALSE ; nested_function: TRUE ;

run_file_path: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_raw/ ;

run_read_file: FALSE ; run_analysis_type_name: 10.met_analysis_from_idat ;

run_add__res__dir: FALSE ; run_add_save_file_prefix: FALSE ;

run_add__parent__dir: FALSE

窗口截圖

運行中的顯示信息

執(zhí)行中亏掀,請稍后, 運行結(jié)果保存的目錄位置為: D:/omics_tools/demo_data/methylation; 分析結(jié)果日志保存的路徑為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\10.met_analysis_from_idat_last_final_run_res_log.csv

運行完成的顯示信息

結(jié)果展示

讀取甲基化beta矩陣文件的甲基化全流程一鍵分析

功能簡介

  1. 甲基化分析模塊可以實現(xiàn)甲基化芯片450K, 870kEPIC數(shù)據(jù)的自動讀取一膨,可以讀取idat文件龙考,也可以讀取beta甲基化矩陣文件
  2. 甲基化數(shù)據(jù)的缺失值插值
  3. 甲基化數(shù)據(jù)的質(zhì)控分析
  4. 甲基化數(shù)據(jù)的歸一化處理分析
  5. 甲基化數(shù)據(jù)的SVD分析
  6. 甲基化數(shù)據(jù)的Combat去除批次效應(yīng)分析
  7. 甲基化數(shù)據(jù)的DMP差異甲基化位點分析
  8. 甲基化數(shù)據(jù)的DMR差異甲基化區(qū)域分析
  9. 甲基化數(shù)據(jù)的差異block分析
  10. 甲基化數(shù)據(jù)的GSEA分析
  11. 甲基化數(shù)據(jù)的CNA分析

模塊使用講解

參數(shù)解釋

func_arraytype: 可選450k或EPIC,EPIC是870K的甲基化芯片

func_met__probe__col:甲基化探針所在的列名,當從beta文件開始分析時匙睹,要提供

func_resultsDir:分析結(jié)果要保存的目錄

func_sample__anno__file:樣本注釋信息的文件咐鹤,默認是空轻局,如果file_path給的是beta矩陣文件,則需要給出sample.anno.file

func_compare__groups__str:做DMP和DMR分析時候要指定的比較分組,多個分組間用;號隔開

func_runBlock: 是否進行比較耗時的block分析,默認為FALSE

func_runGSEA:是否進行比較耗時的GSEA分析,默認為FALSE

func_runCNA:是否進行比較耗時的CNA分析,默認為FALSE

nested_function:是否嵌套函數(shù)

run_file_path:甲基化beta矩陣的文件路徑

run_read_file:是否要讀取文件

run_analysis_type_name:分析項目名稱

run_add__res__dir:是否要創(chuàng)建res_dir結(jié)果目錄

run_add_save_file_prefix京办;是否要添加結(jié)果保存文件的前綴

run_add__parent__dir:是否在上一級目錄下創(chuàng)建目錄或保存結(jié)果

提交

給定參數(shù)的默認值

func_arraytype: 450K ;

func_met__probe__col: V1 ;

func_resultsDir: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results/ ; func_sample__anno__file: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results/myImpute_pd.csv ; func_compare__groups__str: T-C ; func_runBlock: FALSE ;

func_runGSEA: FALSE ;

func_runCNA: FALSE ;

nested_function: TRUE ;

run_file_path: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results/myLoad_beta.csv ;

run_read_file: FALSE ;

run_analysis_type_name: 10.met_analysis_from_beta ;

run_add__res__dir: FALSE ;

run_add_save_file_prefix: FALSE ;

run_add__parent__dir: FALSE

窗口截圖

運行中的顯示信息

分析正在執(zhí)行中,請稍后, 運行結(jié)果保存的目錄位置為: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results; 運行結(jié)果日志保存的路徑為: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results\10.met_analysis_from_beta_last_final_run_res_log.csv

結(jié)果展示

樣本的PCA分群聚類分析和剔除異常樣本

樣本的PCA分群聚類分析

刪除異常樣本

剔除異常樣本后再次進行PCA分群聚類分析

DMRs差異甲基化區(qū)域的基因組circos圖

參數(shù)解釋

func_chr__col: bed文件中染色體編號所在的列名

func_start__col: bed文件中起始位置所在的列名

func_end__col: bed文件中終止位置所在的列名

func_value__col: bed文件中結(jié)果數(shù)值所在的列名

func_use__value__threshold: 是否對value的閾值進行篩選,默認為TRUE

func_value__threshold: bed文件中結(jié)果數(shù)值的閾值,默認為0

func_p__value__col: bed文件中p值所在的列名

func_title:圖表的標題

func_chr__track:是否繪制不同顏色的染色體軌道

func_species:物種的基因組版本號

nested_function:是否嵌套函數(shù)

run_file_path:甲基化DMRs結(jié)果的文件路徑

run_read_file:是否要讀取文件

run_analysis_type_name:分析項目名稱

run_add__res__dir:是否要創(chuàng)建res_dir結(jié)果目錄

run_add_save_file_prefix:是否要添加結(jié)果保存文件的前綴

run_add__parent__dir:是否在上一級目錄下創(chuàng)建目錄或保存結(jié)果

提交

已給定參數(shù)的默認值

func_chr__col: seqnames ;

func_start__col: start ;

func_end__col: end ;

func_value__col: value ;

func_use__value__threshold: TRUE ;

func_value__threshold: 0 ;

func_p__value__col: p.value ;

func_title: DMRs genome plot ;

func_chr__track: FALSE ;

func_species: hg19 ;

nested_function: TRUE ;

run_file_path: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results/myDMR_BumphunterDMR.csv ; run_read_file: FALSE ;

run_analysis_type_name: 10.circlize_plot ;

run_add__res__dir: TRUE ;

run_add_save_file_prefix: TRUE ;

run_add__parent__dir: TRUE

運行中的顯示信息

分析正在執(zhí)行中,請稍后, 運行結(jié)果保存的目錄位置為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\10.circlize_plot; 運行結(jié)果日志保存的路徑為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\10.circlize_plot\10.circlize_plot_last_final_run_res_log.csv

窗口截圖

運行完成的顯示信息

執(zhí)行已完成,運行結(jié)果保存的目錄位置為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\10.circlize_plot; 分析結(jié)果日志保存的路徑為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\10.circlize_plot\10.circlize_plot_last_final_run_res_log.csv

結(jié)果展示

結(jié)果文件列表

Circos圖

差異甲基化位點結(jié)果的棒棒糖圖可視化

參數(shù)解釋

func_data__type:數(shù)據(jù)類型選擇methylation

func_sequence__type: 序列類型猾昆,是DNA還是protein

func_gtf__anno__file: hg19的基因組注釋gtf文件,450K和EPIC都是用的hg19基因組

func_gene__list__str:選擇繪制的基因,多個基因用分號分割來批量繪制

func_gene__col: DMP結(jié)果文件中基因名稱的列名

func_pos__col: DMP甲基化位點位置所在的列名

func_pos__name__col: 甲基化探針名稱所在的列名

func_value__col: DMP結(jié)果的組間甲基化差值所在的列名

func_pval__col: DMP結(jié)果的p值所在的列名

nested_function: 是否嵌套函數(shù)

run_file_path: 甲基化DMP結(jié)果的文件路徑

run_read_file: 是否要讀取文件

run_analysis_type_name: 分析項目名稱

run_add__res__dir: 是否要創(chuàng)建res_dir結(jié)果目錄

run_add_save_file_prefix: 是否要添加結(jié)果保存文件的前綴

run_add__parent__dir:是否在上一級目錄下創(chuàng)建目錄或保存結(jié)果

提交

已給定的參數(shù)默認值

func_data__type: methylation ;

func_sequence__type: DNA ;

func_gtf__anno__file: E:/data/download/Homo_sapiens.GRCh37.75.genome_anno.csv ; func_gene__list__str: HOXB3;CLDN18 ;

func_gene__col: gene ;

func_pos__col: MAPINFO ;

func_pos__name__col: V1 ;

func_value__col: Diff.Value ;

func_pval__col: P.Value ;

nested_function: TRUE ;

run_file_path: D:/omics_tools/demo_data/methylation/lung_results/myDMP_C_to_T_with_gene_anno.csv ; run_read_file: FALSE ;

run_analysis_type_name: 9.met_lollipot_plot ;

run_add__res__dir: TRUE ;

run_add_save_file_prefix: TRUE ;

run_add__parent__dir: TRUE

窗口截圖

運行中的顯示信息

執(zhí)行中,請稍后, 運行結(jié)果保存的目錄位置為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\9.met_lollipot_plot; 分析結(jié)果日志保存的路徑為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\9.met_lollipot_plot\9.met_lollipot_plot_last_final_run_res_log.csv

運行完成的顯示信息

執(zhí)行已完成,運行結(jié)果保存的目錄位置為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\9.met_lollipot_plot; 分析結(jié)果日志保存的路徑為: D:/omics_tools/demo_data/methylation\9.met_lollipot_plot\9.met_lollipot_plot_last_final_run_res_log.csv

結(jié)果展示

結(jié)果文件列表

結(jié)果圖

差異甲基化DMPs的統(tǒng)計分析條形圖可視化

差異甲基化基因的火山圖繪制

差異甲基化基因的GO骡苞,KEGG和GSEA富集分析

差異甲基化基因的GO和KEGG富集分析

GO富集分析結(jié)果圖

KEGG富集分析結(jié)果圖

GSEA富集分析

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