PCR:一種快速的DNA復(fù)制方法,由變性--退火(復(fù)性)--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成砚著。
RT-PCR:反轉(zhuǎn)錄baiPCR(reverse transcription-PCR),是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的一種廣泛應(yīng)用的變形痴昧。在RT-PCR中稽穆,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成為互補DNA(cDNA),再以此為模板通過PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增剪个。
QRT-PCR在RT-PCR體系中同時加入內(nèi)參標(biāo)基因的引物秧骑,使目的基因和內(nèi)參基因在同一條件下同時擴(kuò)增版确。在擴(kuò)增反映結(jié)束之后,可以通過凝膠電泳的方法對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行半定量分析乎折,但分析的是PCR終產(chǎn)物绒疗,不能準(zhǔn)確分析未經(jīng)PCR信號放大之前的起始模板量。
real-time PCR:實時PCR(real-time PCR)屬于定量PCR(Q-PCR)的一種骂澄,以一定時間內(nèi)DNA的增幅量為基礎(chǔ)進(jìn)行DNA的定量分析吓蘑。
Real-timePCR與reverse transcription PCR相結(jié)合,能用微量的RNA來找出特定時間細(xì)胞組織內(nèi)的特別表達(dá)的遺傳基因坟冲。這兩種RT PCR的組合又被稱之為定量RT-PCR(QRT-PCR)磨镶。
擴(kuò)展資料:
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制健提,PCR的最大特點琳猫,是能將微量的DNA大幅增加。
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈私痹,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結(jié)合脐嫂,再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈紊遵≌饲В基于聚合酶制造的PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備,能在變性溫度暗膜,復(fù)性溫度匀奏,延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。