與SF通過共價相互作用使尿素酶失活的建議一致失受,純化的幽門螺桿菌尿素酶與SF的孵育導致260-320 nm區(qū)域紫外線吸收的時間依賴性增加(圖1)霜幼。 吸收增加的變化幅度取決于SF的濃度。?
圖1B顯示了SF濃度為7.4至740μM的60分鐘后在280 nm處觀察到的吸收差異军援。 觀察到的吸收變化與SF的異硫氰酸酯(-N = C = S)基團與尿素酶的一個或多個半胱氨酸硫醇基團與在該波長區(qū)域吸收更強的二硫代氨基甲酸酯的相互作用相一致桩警。
- N = C = S + HS - R → ?- NH - C(SR) = S
(圖1)
(A)用740μM蘿卜硫素處理12捞慌、30、76和120分鐘的部分純化的幽門螺桿菌尿素酶(9μg/ mL)的差異光譜隨時間變化情況寝衫。 對照比色杯中含有同等濃度的蘿卜硫素什燕。 (B)當將蘿卜硫素(7.4 – 740μM)加入部分純化的幽門螺桿菌尿素酶(30μg/ mL)中時,在60分鐘內(nèi)在280 nm處的吸收變化情況竞端。
尿素酶和尿素酶-SF復合物之間的差異光譜具有兩個吸收最大值(在280 nm和320 nm附近)屎即。 后者與二硫代氨基甲酸酯的形成一致。 差異光譜中的兩個等吸收點(在250和330 nm附近)表明事富,這些光譜變化的反應涉及到相對特定的化學反應(如圖1A所示)技俐。
參考資料:
[1] Y. Zhang, Role of glutathione in the accumulation of anticarcinogenic?
isothiocyanates and their glutathione conjugates by murine hepatoma cells, Carcinogenesis 21 (2000) 1175–1182.