CRISPR/Cas9基因敲除實(shí)驗(yàn)全記錄(1)確定目標(biāo)基因

引子

前陣子才寫(xiě)道
CRISPR-Cas9基因敲除實(shí)驗(yàn)步驟 Month 4 --可能的收官之帖(但還遠(yuǎn)未結(jié)束)
說(shuō)自己收官之作庶骄,哪里想到這么快就要繼續(xù)開(kāi)始新的實(shí)驗(yàn)了瞪讼。

有幾點(diǎn)要聲明:首先妇垢,這些記錄都是我真是的實(shí)驗(yàn)思路歷程驳概,出于保密原則贩虾,不會(huì)透露課題任何敏感信息杆麸,所有例子均為杜撰搁进;其次,我知無(wú)不言但不一定能言盡昔头,畢竟篇幅有限饼问;再者,這些只是我個(gè)人的記錄揭斧,回答疑問(wèn)僅是出于好意莱革;之前有人問(wèn)我要protocol峻堰,其實(shí)我想說(shuō),思路是最重要的盅视,實(shí)驗(yàn)protocol哪里去拿不到呢捐名;最后,我感謝一直以來(lái)幫助我的人們闹击,正是因?yàn)榻邮芰诉@么多的幫助镶蹋,才促使我寫(xiě)下這些紀(jì)錄希望能幫助到別人,感謝赏半。

今天主要的內(nèi)容是準(zhǔn)備工作

1. preparation

(1) clear objectives 明確目標(biāo)--敲除抑癌基因 2019/07/16~2019/07/18

首先贺归,登錄Catalogue Of Somatic Mutations In cancer (COSMIC) Database https://cancer.sanger.ac.uk/cosmic

[圖片上傳失敗...(image-2bfdf5-1563514224716)]

其次,根據(jù)癌癥類(lèi)型查看腫瘤體細(xì)胞突變統(tǒng)計(jì)断箫,并下載體細(xì)胞突變list拂酣。

find and download

接著,找到tumor suppressor gene database https://bioinfo.uth.edu/TSGene/仲义,摸索并下載相應(yīng)的腫瘤抑制基因數(shù)據(jù)list

TSGs

同時(shí)婶熬,通過(guò)網(wǎng)頁(yè)搜索,盡量查到更多關(guān)于Tumor suppressor gene相關(guān)信息

https://www.cellsignal.com/contents/resources-reference-tables/human-oncogenes-amp-tumor-suppressor-genes/science-tables-oncogene

CST with oncogene and tumor suppressor gene

再者光坝,使用R語(yǔ)言將從不同database獲取得到的tumor suppressor gene的list進(jìn)行overlap尸诽,再查閱overlap剩余基因在目的細(xì)胞中的表達(dá)水平--該部分依賴(lài)生物信息學(xué)技術(shù),本部分結(jié)果省略盯另。

最后性含,最終還需要文獻(xiàn)再次確認(rèn)該基因與自己課題項(xiàng)目的相關(guān)性,并其做好文獻(xiàn)背景調(diào)查鸳惯,最終確認(rèn)目的基因商蕴。

2. 小結(jié)

首先知道自己要做什么,明確目標(biāo)之后要盡可能利用自己能用到的所有資源芝发,快速绪商,精準(zhǔn)的篩選目的基因。

感謝師兄DZ

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