題目：
同種異體Vγ9Vδ2 T細(xì)胞免疫療法具有良好的臨床安全性昵骤，可延長晚期肺癌或肝癌患者的生存期
Allogeneic Vγ9Vδ2 T-cell immunotherapy exhibits promising clinical safety and prolongs the survival of patients with late-stage lung or liver cancer
作者：
尹芝南榆鼠，暨南大學(xué)
期刊：
Xu Y, Xiang Z, Alnaggar M, Kouakanou L, Li J, He J, Yang J, Hu Y, Chen Y, Lin L, Hao J, Li J, Chen J, Li M, Wu Q, Peters C, Zhou Q, Li J, Liang Y, Wang X, Han B, Ma M, Kabelitz D, Xu K, Tu W, Wu Y, Yin Z. Allogeneic Vγ9Vδ2 T-cell immunotherapy exhibits promising clinical safety and prolongs the survival of patients with late-stage lung or liver cancer. Cell Mol Immunol. 2021 Feb.
目的
為了將同種異體Vγ9Vδ2 T細(xì)胞應(yīng)用于過繼免疫治療，需要優(yōu)化用于在體外獲得具有最佳效應(yīng)功能的足夠細(xì)胞數(shù)量的方法覆醇，并且還需要證明臨床安全性和有效性。因此炭臭，我們開發(fā)了一種新配方來改善來自健康供體的外周γδ T細(xì)胞的擴增永脓。然后，我們使用人源化小鼠模型驗證了擴增的γδ T細(xì)胞在體內(nèi)的治療效果;此外鞋仍，擴增的γδ T細(xì)胞被過繼轉(zhuǎn)移到晚期肝癌和肺癌患者中常摧。
科學(xué)障礙
目前至少有兩個科學(xué)障礙需要克服，才能有效地將同種異體Vγ9Vδ2 T細(xì)胞應(yīng)用于臨床腫瘤治療。
一是需要優(yōu)化現(xiàn)有的細(xì)胞擴增方法落午，以獲得大量具有較強抗腫瘤活性的Vγ9Vδ2 T細(xì)胞谎懦。這里的一個障礙是外周血中Vγ9Vδ2 T細(xì)胞的數(shù)量有限，通常占外周血T細(xì)胞的2-4%溃斋。
第二個科學(xué)障礙是同種異體Vγ9Vδ2 T細(xì)胞轉(zhuǎn)移的臨床安全性需要科學(xué)證明界拦。這只能通過癌癥患者的臨床研究來實現(xiàn)。
材料方法
1.Vγ9Vδ2 T細(xì)胞功能分析
用 2CD5 抗體和 CD28抗體刺激 Vγ28Vδ6 T 細(xì)胞 5 小時梗劫。然后享甸，用表面標(biāo)志物抗人CD3-APC-H7，抗人TCR Vδ2-PerCP和抗人CD107a-APC抗體染色細(xì)胞梳侨。染色后蛉威，分別使用裂解液和透化液固定和透化細(xì)胞。隨后走哺，用抗人IFN-γ-PE-Cy7蚯嫌，抗人TNF-α-PE及其相應(yīng)的同種型對照處理核標(biāo)志物。
細(xì)胞周期丙躏、細(xì)胞增殖（Ki-67择示，BioLegend，克卤撕摺：Ki-67）对妄、細(xì)胞分化（CD45RA，BioLegend敢朱，克隆：HI100）摩瞎、CD27（BioLegend拴签，克隆：O323）旗们、線粒體和共刺激分子蚓哩。
2.體外細(xì)胞毒性測定
2μM CFSE預(yù)染幾種人癌細(xì)胞系。將效應(yīng)細(xì)胞和靶細(xì)胞在37°C下以不同的E：T比（1：1上渴，1:5和1:10）共培養(yǎng)6小時岸梨。使用流式細(xì)胞術(shù)和PI染色分析癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。
3.使用人源化小鼠體內(nèi)評估Vγ9Vδ2 T細(xì)胞的抗腫瘤活性
結(jié)果
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我們發(fā)現(xiàn)稠氮，擴增的細(xì)胞在體外和人源化小鼠模型中都具有顯著改善的免疫效應(yīng)功能曹阔，包括增殖、分化和癌細(xì)胞殺傷隔披。此外赃份，一項針對132名晚期癌癥患者的I期臨床試驗，共輸注414個細(xì)胞，明確驗證了同種異體Vγ9Vδ2 T細(xì)胞的臨床安全性抓韩。在這132例患者中纠永，接受≥8次細(xì)胞輸注的肝癌患者和10例肺癌患者生存期大大延長，初步驗證了同種異體Vγ5Vδ9 T細(xì)胞治療的有效性谒拴。我們的臨床研究強調(diào)了同種異體Vγ2Vδ9 T細(xì)胞免疫療法的安全性和有效性尝江，這將激發(fā)進一步的臨床研究，并最終使癌癥患者受益英上。
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新配方促進了Vγ9Vδ2 T細(xì)胞的增殖和分化
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3.新配方減少了細(xì)胞凋亡炭序，NF細(xì)胞表達(dá)的共刺激分子水平高于OF細(xì)胞
4.NF細(xì)胞表現(xiàn)出比OF細(xì)胞更強的細(xì)胞能量代謝。報道的文獻(xiàn)表明糖酵解在活化和效應(yīng)CD8 T細(xì)胞中占主導(dǎo)地位善延，揭示NF是否改變Vγ9Vδ2 T細(xì)胞的細(xì)胞代謝是有意義的少态。
5.NF細(xì)胞表達(dá)更高水平的效應(yīng)分子，對癌細(xì)胞的體外殺傷能力強于OF細(xì)胞易遣。NF大大上調(diào)了與活化（NKG2D）彼妻，效應(yīng)功能（IFN-γ和TNF-α）和脫顆粒（CD107a）相關(guān)的分子的表達(dá)。
- 人源化小鼠NF細(xì)胞抗腫瘤活性的體內(nèi)驗證豆茫。未經(jīng)治療和OF細(xì)胞處理的小鼠分別存活不到62天和88天侨歉。相比之下，對于NF細(xì)胞處理的小鼠揩魂，一只小鼠存活了98天幽邓，另一只存活了118天，其余三只小鼠在第238天處死時仍然活著（兩只沒有腫瘤火脉，一只在第125天復(fù)發(fā)腫瘤）牵舵。此外，我們進行了實時成像以可視化人源化小鼠中A549癌細(xì)胞和γδ T細(xì)胞的共定位倦挂，結(jié)果顯示畸颅，在輸注后48小時，只有NF細(xì)胞（紅色）與腫瘤細(xì)胞（綠色）在視覺上共定位（圖）方援。[4e]没炒，暗示NF細(xì)胞的歸巢能力更強。
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使用異體Vγ9Vδ2 T細(xì)胞擴增的新配方對晚期肝肺癌患者進行免疫治療犯戏。只有8名肝癌和10名肺癌患者接受了≥5次NF細(xì)胞輸注送火。（1-2×108每次處理的細(xì)胞，純度>90%）先匪。
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