細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境（無菌、適宜溫度析珊、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等）羡鸥，使之生存、生長忠寻、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法惧浴。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)奕剃。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)衷旅，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過程纵朋，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)氖炼ィ克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞操软，這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié)嘁锯，而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù)寺鸥，通過細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞猪钮，又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝胆建、細(xì)胞的生長增殖等烤低。
影響細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些：
1．無菌環(huán)境
無毒和無菌是體外培養(yǎng)細(xì)胞的首要條件。細(xì)胞在活體內(nèi)笆载，解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的入侵扑馁，但細(xì)胞在體外培養(yǎng)的過程中，缺乏機(jī)體免疫系統(tǒng)的保護(hù)而喪失對(duì)微生物的防御能力和對(duì)有害物質(zhì)的解毒能力凉驻。為保證細(xì)胞能在體外環(huán)境中生長繁殖腻要，必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個(gè)人衛(wèi)生涝登、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作雄家。
常見的微生物污染有支原體、細(xì)菌胀滚、真菌趟济。支原體無致死毒性乱投，可與細(xì)胞長期共存，對(duì)細(xì)胞有潛在影響顷编，但體積小戚炫，不易鑒別，可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進(jìn)行檢測(cè)媳纬。細(xì)菌增殖快双肤，在短時(shí)間內(nèi)即可大量擴(kuò)增，并產(chǎn)生毒素殺死細(xì)胞钮惠。真菌的種類繁多茅糜，肉眼可見，漂浮于培養(yǎng)液面上萌腿，可呈絲狀限匣、管狀或樹枝狀等抖苦。
2.合適的溫度
一般哺乳類與禽類細(xì)胞在體外培養(yǎng)的適宜溫度是37～38℃毁菱，不適宜的環(huán)境溫度會(huì)影響細(xì)胞的生長。細(xì)胞對(duì)低溫的耐受能力要強(qiáng)于對(duì)高溫的耐受能力锌历，在低溫下贮庞，細(xì)胞的代謝活力及核分裂能力降低。若溫度不低于0℃究西，雖然細(xì)胞代謝受到影響窗慎，但無損傷作用；25～35℃時(shí)卤材，細(xì)胞以緩慢的速度生長遮斥；但若被置于40℃數(shù)小時(shí)，則不僅不利于細(xì)胞生存扇丛、生長术吗，甚至可導(dǎo)致其死亡。
3.適宜的滲透壓
高滲溶液或低滲溶液會(huì)引起細(xì)胞發(fā)生褶皺帆精、腫脹较屿、破裂。因此卓练，滲透壓是體外培養(yǎng)細(xì)胞的重要條件之一隘蝎。多數(shù)體外培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)滲透壓都有一定的耐受能力，實(shí)際應(yīng)用中襟企，260～320mmol/L的滲透壓可適用于大多數(shù)細(xì)胞嘱么。
4．氣體環(huán)境與pH
細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要理想的氣體環(huán)境，氧氣顽悼、二氧化碳是細(xì)胞生存的必要條件曼振。氧氣參與細(xì)胞的三羧酸循環(huán)辉川，為細(xì)胞生存、代謝與合成提供能量拴测；二氧化碳既是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物乓旗，是細(xì)胞生長的必需成分，又與維持培養(yǎng)液的pH有關(guān)集索。大多數(shù)細(xì)胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4屿愚。在開放式培養(yǎng)中，以5%的二氧化碳?xì)怏w比例為宜务荆。
