如何在病毒含量較低的水體中叭披,提取到足量檢測的病毒核酸?

產(chǎn)品特點

◎獨特的核酸富集因子玩讳,可高效聚集病毒核酸趋观,大幅提升病毒核酸的提取得率;

◎采用真空濃縮技術(shù)锋边,可高效富集提取較大水樣中的病毒核酸皱坛,有效解決了水體中病毒含量較低、必須富集提取的難題豆巨;

◎操作非常簡單剩辟,只需20多分鐘即可完成病毒核酸提取,不需要剪碎濾膜往扔,不需要調(diào)PH贩猎,不需要冗長的振蕩破碎,有效降低操作者病毒接觸感染的風(fēng)險萍膛。

產(chǎn)品介紹

水體中病毒核酸的提取一直是個難題吭服,主要原因有二:①水體中病毒含量較低,必須富集才能提取到足量檢測的病毒核酸蝗罗;②病毒本體較小艇棕,無法通過微孔濾膜過濾截取。百代生物經(jīng)長期研發(fā)串塑,研發(fā)成功了專門提取水體樣本中病毒核酸的富集提取試劑盒沼琉,有效解決了病毒核酸提取的上述難題。試劑盒配置獨特配方的病毒裂解液桩匪,可快速裂解病毒本體打瘪,充分釋放病毒核酸,核酸富集因子可使釋放出來的病毒核酸聚集在一起傻昙,大幅提升病毒核酸的提取得率闺骚。試劑盒配套BIOG便攜式真空裝置使用,采用美國實驗室進口的高效核酸吸附膜妆档,可高效富集提取較大量水樣中的病毒核酸僻爽,有效解決了水體病毒含量較少、必須富集提取的難題过吻。BIOG水樣病毒核酸提取試劑盒操作非常簡單进泼,只需20多分鐘即可將病毒核酸提取完畢蔗衡,中間無濾膜剪碎步驟,不需要調(diào)PH乳绕,不需要冗長的振蕩破碎绞惦,不僅可大量節(jié)約研究者的操作時間還可有效降低操作人員病毒接觸感染的風(fēng)險。提取的病毒核酸純度高洋措,無腐殖質(zhì)济蝉、多糖、蛋白菠发、色素等污染王滤,可直接應(yīng)用于PCR、RT-PCR滓鸠、熒光定量RT-PCR雁乡、測序和分子雜交等。

操作步驟

1. 請自行準備:無水乙醇糜俗、異丙醇踱稍、50mL潔凈燒杯、1.5mL無RNA酶離心管悠抹、50mL一次性無菌注射器珠月。

2. 取出洗滌液,按終濃度70%的比例加入無水乙醇楔敌,如3mL加入7mL無水乙醇啤挎;15mL加入35mL無水乙醇,充分混勻卵凑。

3. 取50mL潔凈燒杯1只庆聘,加入10mL預(yù)處理過的水樣,再加入0.5mL核酸富集因子氛谜、5mL病毒裂解液及50μL 消化液掏觉,攪拌混勻,65℃放置15分鐘值漫。

4. 取出燒杯,自然冷卻到室溫织盼,加入15mL異丙醇杨何,攪拌混勻。

5. 將富集吸附柱放在抽濾裝置上沥邻,再將50mL無菌注射器針筒插入富集吸附柱上端危虱,將上述溶液全部轉(zhuǎn)入針筒內(nèi),靜置2 分鐘唐全,真空抽濾至富集吸附柱內(nèi)液體剛剛抽濾完畢(注意不要抽濾太干埃跷,太干不利于后續(xù)步驟開展)蕊玷。

6. 向針筒內(nèi)加入1mL 洗滌液,靜置2分鐘弥雹,真空抽濾至富集吸附柱內(nèi)液體剛剛抽濾完畢(注意不要抽濾太干,太干不利于后續(xù)步驟開展)。

7. 向針筒內(nèi)加入0.5mL 洗滌液薯演,靜置2分鐘耻姥,抽濾2 分鐘。

8. 按每份樣本20μL 取洗脫液(如10份提取樣本厕吉,即取200μL 洗脫液)酱固,放置于1.5mL無RNA酶離心管,65℃預(yù)熱头朱。

9. 將富集吸附柱放入收集管內(nèi)运悲,12,000 rpm 常溫離心3分鐘,離去殘留的洗滌液项钮。

10. 取出富集吸附柱扇苞,放入新的1.5mL無RNA酶離心管內(nèi),加入20 μL 上述預(yù)熱的洗脫液寄纵,靜置2分鐘鳖敷,12,000 rpm常溫離心2 分鐘,收集核酸溶液程拭。提取的核酸即可用于下一步實驗或-70℃保存定踱。

特別說明:1.本試劑盒配套BIOG真空核酸提取裝置使用,單次可提取10mL之內(nèi)量的水樣病毒核酸恃鞋,研究者也可根據(jù)實驗需要進行多次抽濾崖媚,提取更大量的水樣;2恤浪、比較潔凈的水樣如飲用水畅哑、泳池水、水庫水水由、海水等可直接進行病毒核酸提取荠呐,污染水體或雜質(zhì)較多的水體應(yīng)進行預(yù)過濾,以除去較大的顆粒物砂客,可以使用研究者已有的水樣預(yù)處理裝置泥张,也可使用BIOG水樣過濾器;3鞠值、洗滌液最好現(xiàn)用現(xiàn)配媚创,按需計算用量后配制;4彤恶、為防RNA酶污染钞钙,實驗過程中最好戴一次性干凈手套鳄橘、口罩,使用處理過的無RNA酶的容器和無RNA酶的超純水芒炼;5瘫怜、提取的核酸如暫不使用,應(yīng)-70℃保存焕议,可適當加入RNA保護因子(貨號:51090宝磨,一般20μLRNA溶液加入1μL);6盅安、本試劑主要用于提取水樣病毒核酸唤锉,也可用于提取水樣細菌核酸,但不適于提取細胞壁較厚的真菌和其它生物的核酸别瞭。


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