產(chǎn)品特點
◎獨特的核酸富集因子旁仿,可高效聚集病毒核酸,大幅提升病毒核酸的提取得率孽糖;
◎采用真空濃縮技術(shù)枯冈,可高效富集提取較大水樣中的病毒核酸,有效解決了水體中病毒含量較低办悟、必須富集提取的難題尘奏;
◎操作非常簡單,只需20多分鐘即可完成病毒核酸提取病蛉,不需要剪碎濾膜炫加,不需要調(diào)PH瑰煎,不需要冗長的振蕩破碎,有效降低操作者病毒接觸感染的風(fēng)險俗孝。
產(chǎn)品介紹
水體中病毒核酸的提取一直是個難題酒甸,主要原因有二:①水體中病毒含量較低,必須富集才能提取到足量檢測的病毒核酸赋铝;②病毒本體較小插勤,無法通過微孔濾膜過濾截取。百代生物經(jīng)長期研發(fā)柬甥,研發(fā)成功了專門提取水體樣本中病毒核酸的富集提取試劑盒饮六,有效解決了病毒核酸提取的上述難題。試劑盒配置獨特配方的病毒裂解液苛蒲,可快速裂解病毒本體卤橄,充分釋放病毒核酸,核酸富集因子可使釋放出來的病毒核酸聚集在一起臂外,大幅提升病毒核酸的提取得率窟扑。試劑盒配套BIOG便攜式真空裝置使用,采用美國實驗室進口的高效核酸吸附膜漏健,可高效富集提取較大量水樣中的病毒核酸嚎货,有效解決了水體病毒含量較少、必須富集提取的難題蔫浆。BIOG水樣病毒核酸提取試劑盒操作非常簡單殖属,只需20多分鐘即可將病毒核酸提取完畢,中間無濾膜剪碎步驟瓦盛,不需要調(diào)PH洗显,不需要冗長的振蕩破碎,不僅可大量節(jié)約研究者的操作時間還可有效降低操作人員病毒接觸感染的風(fēng)險原环。提取的病毒核酸純度高挠唆,無腐殖質(zhì)、多糖嘱吗、蛋白玄组、色素等污染,可直接應(yīng)用于PCR谒麦、RT-PCR俄讹、熒光定量RT-PCR、測序和分子雜交等弄匕。
操作步驟
1. 請自行準備:無水乙醇颅悉、異丙醇、50mL潔凈燒杯迁匠、1.5mL無RNA酶離心管、50mL一次性無菌注射器。
2. 取出洗滌液城丧,按終濃度70%的比例加入無水乙醇延曙,如3mL加入7mL無水乙醇;15mL加入35mL無水乙醇亡哄,充分混勻枝缔。
3. 取50mL潔凈燒杯1只,加入10mL預(yù)處理過的水樣蚊惯,再加入0.5mL核酸富集因子愿卸、5mL病毒裂解液及50μL 消化液,攪拌混勻截型,65℃放置15分鐘趴荸。
4. 取出燒杯,自然冷卻到室溫宦焦,加入15mL異丙醇发钝,攪拌混勻。
5. 將富集吸附柱放在抽濾裝置上波闹,再將50mL無菌注射器針筒插入富集吸附柱上端酝豪,將上述溶液全部轉(zhuǎn)入針筒內(nèi),靜置2 分鐘精堕,真空抽濾至富集吸附柱內(nèi)液體剛剛抽濾完畢(注意不要抽濾太干孵淘,太干不利于后續(xù)步驟開展)。
6. 向針筒內(nèi)加入1mL 洗滌液歹篓,靜置2分鐘瘫证,真空抽濾至富集吸附柱內(nèi)液體剛剛抽濾完畢(注意不要抽濾太干,太干不利于后續(xù)步驟開展)滋捶。
7. 向針筒內(nèi)加入0.5mL 洗滌液痛悯,靜置2分鐘,抽濾2 分鐘重窟。
8. 按每份樣本20μL 取洗脫液(如10份提取樣本载萌,即取200μL 洗脫液),放置于1.5mL無RNA酶離心管巡扇,65℃預(yù)熱扭仁。
9. 將富集吸附柱放入收集管內(nèi),12,000 rpm 常溫離心3分鐘厅翔,離去殘留的洗滌液乖坠。
10. 取出富集吸附柱,放入新的1.5mL無RNA酶離心管內(nèi)刀闷,加入20 μL 上述預(yù)熱的洗脫液熊泵,靜置2分鐘仰迁,12,000 rpm常溫離心2 分鐘,收集核酸溶液顽分。提取的核酸即可用于下一步實驗或-70℃保存徐许。
特別說明:1.本試劑盒配套BIOG真空核酸提取裝置使用,單次可提取10mL之內(nèi)量的水樣病毒核酸卒蘸,研究者也可根據(jù)實驗需要進行多次抽濾雌隅,提取更大量的水樣;2缸沃、比較潔凈的水樣如飲用水恰起、泳池水、水庫水趾牧、海水等可直接進行病毒核酸提取检盼,污染水體或雜質(zhì)較多的水體應(yīng)進行預(yù)過濾,以除去較大的顆粒物武氓,可以使用研究者已有的水樣預(yù)處理裝置梯皿,也可使用BIOG水樣過濾器;3县恕、洗滌液最好現(xiàn)用現(xiàn)配东羹,按需計算用量后配制;4忠烛、為防RNA酶污染属提,實驗過程中最好戴一次性干凈手套、口罩美尸,使用處理過的無RNA酶的容器和無RNA酶的超純水冤议;5、提取的核酸如暫不使用师坎,應(yīng)-70℃保存恕酸,可適當(dāng)加入RNA保護因子(貨號:51090,一般20μLRNA溶液加入1μL)胯陋;6蕊温、本試劑主要用于提取水樣病毒核酸,也可用于提取水樣細菌核酸遏乔,但不適于提取細胞壁較厚的真菌和其它生物的核酸义矛。