小白日記第一天,記錄一下自己查找motif的步驟渣叛,以便日后忘記了再重學(xué)。之前也用過許多軟件盯捌,都是在要用的時(shí)候上網(wǎng)上各種搜索操作步驟淳衙,邊學(xué)邊用,只顧獲得結(jié)果了饺著,從未意識(shí)到要將操作步驟整理下來箫攀,以致于到下次再用之時(shí),又要重頭學(xué)起幼衰,再走一遭曾經(jīng)走過的彎路靴跛。幡然醒悟那樣的費(fèi)時(shí)費(fèi)力,于是便逼迫自己養(yǎng)成及時(shí)整理的習(xí)慣塑顺,下次再用之時(shí)便能節(jié)省些時(shí)間汤求。
一、序列處理
將所獲得的序列在NCBI網(wǎng)站上進(jìn)行ORF預(yù)測(cè)(網(wǎng)址:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/orffinder/)严拒,然后選定目標(biāo)ORF區(qū)并下載相應(yīng)的蛋白序列扬绪,具體操作如下圖1和圖2。
在圖2界面左下角點(diǎn)擊smart blast(圖3)裤唠,可獲得與目標(biāo)蛋白序列比對(duì)相似度較高的其它物種的蛋白序列挤牛,勾選相應(yīng)的參比蛋白序列,下載下來(圖4)种蘸。
將目標(biāo)蛋白序列與下載的參比蛋白序列全部整合到一個(gè)文本文件里墓赴,序列保持fasta格式竞膳。(我是在DNAMAN里進(jìn)行的,將所有的序列復(fù)制粘貼進(jìn)去诫硕,然后保存時(shí)選擇保存為所有格式坦辟,之后用記事本打開即可。簡(jiǎn)單操作可直接復(fù)制粘貼到記事本里即可)章办。
二锉走、查找motif
進(jìn)入meme網(wǎng)站(網(wǎng)址:http://meme-suite.org/tools/meme),按下圖5所標(biāo)示步驟操作即可藕届。注意:步驟2中選擇的文本文件不能僅含有一個(gè)蛋白序列挪蹭,至少需要兩個(gè)序列,否則提交后會(huì)出現(xiàn)“序列太少”提示休偶,網(wǎng)站將不查找梁厉。
三、查找結(jié)果展示
點(diǎn)擊郵箱中收到的鏈接便可查看查找結(jié)果踏兜,我打開的是以HTML格式展示的結(jié)果词顾,如下圖6所示。
雖然獲得了結(jié)果庇麦,但是似乎有種沒有完全弄明白的感覺计技。