有誰(shuí)是用過(guò)老版本的maSigPro之后來(lái)到這里的嗎?
現(xiàn)在maSigPro
包中并沒(méi)有直接叫maSigPro()
的函數(shù)。通常來(lái)說(shuō),該包中的關(guān)鍵功能函數(shù)是用來(lái)處理時(shí)序表達(dá)數(shù)據(jù)的斑胜,因此我們需要使用其他函數(shù)來(lái)替代,例如p.vector()
色瘩、T.fit()
伪窖、get.siggenes()
等。
以下是maSigPro
的典型分析流程居兆,可以使用這些函數(shù)來(lái)進(jìn)行差異表達(dá)和時(shí)序數(shù)據(jù)分析:
完整分析流程:
-
設(shè)計(jì)矩陣(
make.design.matrix
):
首先,需要?jiǎng)?chuàng)建設(shè)計(jì)矩陣(design matrix)來(lái)描述你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)竹伸。design_grp <- make.design.matrix(design = data.frame(sample = c(1, 2, 3, 4), group = c(1, 1, 2, 2)), degree = 2)
-
初步差異表達(dá)分析(
p.vector
):
使用p.vector()
函數(shù)來(lái)擬合線性模型并計(jì)算每個(gè)基因的P值泥栖。fit <- p.vector(mono_ave, design_grp, Q = 0.05)
-
模型擬合與回歸(
T.fit
):
使用T.fit()
來(lái)進(jìn)一步擬合模型,得出最終的基因表達(dá)模式勋篓。fit2 <- T.fit(fit, step.method = "backward")
-
提取顯著基因(
get.siggenes
):
提取顯著差異表達(dá)的基因吧享,并可視化它們的表達(dá)模式。sig_genes <- get.siggenes(fit2, rsq = 0.7, vars = "group")
-
基因可視化(
see.genes
和PlotProfiles
):
可以用see.genes()
和PlotProfiles()
來(lái)可視化顯著基因的表達(dá)模式譬嚣。see.genes(sig_genes$group, show.fit = TRUE, dis = design_grp$dis)
代碼示例:
下面是一個(gè)完整的代碼流程示例:
# 加載 maSigPro 包
library(maSigPro)
# 創(chuàng)建設(shè)計(jì)矩陣
design_grp <- make.design.matrix(design = data.frame(sample = c(1, 2, 3, 4),
group = c(1, 1, 2, 2)),
degree = 2)
# 使用 p.vector 計(jì)算 P 值
fit <- p.vector(mono_ave, design_grp, Q = 0.05)
# 使用 T.fit 進(jìn)行回歸
fit2 <- T.fit(fit, step.method = "backward")
# 提取顯著基因
sig_genes <- get.siggenes(fit2, rsq = 0.7, vars = "group")
# 可視化顯著基因
see.genes(sig_genes$group, show.fit = TRUE, dis = design_grp$dis)
函數(shù)解釋:
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p.vector()
:該函數(shù)用于擬合基因表達(dá)數(shù)據(jù)與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的線性模型钢颂,并計(jì)算每個(gè)基因的P值。 -
T.fit()
:在初步篩選后拜银,進(jìn)一步擬合模型殊鞭,并通過(guò)回歸方法篩選出差異表達(dá)基因遭垛。 -
get.siggenes()
:從模型中提取顯著差異表達(dá)的基因。 -
see.genes()
:可視化顯著基因的表達(dá)模式操灿。
參考文獻(xiàn):
- Conesa, A., et al. (2006). maSigPro: a method to identify significantly differential expression profiles in time-course microarray experiments. Bioinformatics, 22(9), 1096-1102. [DOI:10.1093/bioinformatics/btl056]