產(chǎn)品特點(diǎn)
◎操作簡(jiǎn)便快速歪今,20分鐘左右可獲得理想的DNA嚎幸;
◎提取DNA純度高,無抑制劑寄猩,1.7<A260/A280≤2.0嫉晶;
◎產(chǎn)量更高,較國內(nèi)同類產(chǎn)品高出20%田篇;
◎樣本范圍廣替废,可用于新鮮、冷凍或陳舊的全血樣本泊柬。
產(chǎn)品介紹
BIOG 劑盒采用獨(dú)特的裂解液配方椎镣,可直接從新鮮、冷凍或陳舊的全血中提取高質(zhì)量的基因組DNA兽赁,也可以直接提取得到血液中感染的細(xì)菌或轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞DNA状答, 省去了一般血液DNA提取試劑盒所需的白細(xì)胞分離步驟冷守,操作簡(jiǎn)便快速,只需20分鐘左右即可完成血液DNA提取惊科,并且DNA提取得率較高拍摇,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因組DNA。BIOG Blood DNA Isolate Kit采用了最新的優(yōu)質(zhì)離子膜馆截,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化授翻,提取得到的DNA純度更高,最大限度地去除了蛋白孙咪、色素堪唐、脂類等雜質(zhì)污染,可以直接應(yīng)用于PCR翎蹈、熒光定量PCR和各種酶切試驗(yàn)等淮菠。
操作步驟?(請(qǐng)自行準(zhǔn)備無水乙醇、異丙醇和滅菌1.5mL離心管):
1. 取出洗滌液荤堪,按以下操作:
a) 洗滌液A:21mL加入9mL無水乙醇合陵;42mL加入18mL無水乙醇,混勻澄阳。
b) 洗滌液B:9mL加入21mL無水乙醇拥知;18mL加入42mL無水乙醇,混勻碎赢。
c) 配制好的洗滌液如出現(xiàn)沉淀低剔,可在37℃溶解,搖勻后使用肮塞。
2. 取1.5mL離心管襟齿,加入200μL血液樣本,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液枕赵,振蕩混勻猜欺,65℃水浴10 分鐘。
3. 加入150μL異丙醇(總體積的25%)拷窜,混合均勻开皿,如有半透明懸浮物,不影響DNA的提取與后續(xù)實(shí)驗(yàn)篮昧。
4. 將吸附柱放入收集管內(nèi)赋荆,將上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi),12,000 rpm 離心1 分鐘恋谭,棄收集管內(nèi)廢液糠睡;
5. 將吸附柱放回收集管內(nèi)挽鞠,加500μL 洗滌液A至吸附柱內(nèi)疚颊,12,000 rpm 離心1 分鐘狈孔,棄收集管內(nèi)廢液。
6. 將吸附柱放回收集管內(nèi)材义,加500μL 洗滌液B至吸附柱內(nèi)均抽,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液其掂。
7. 按每份樣本40μL 取洗脫液(如10份提取樣本油挥,即取400μL 洗脫液),放置于滅菌1.5mL離心管款熬,65℃預(yù)熱深寥。
8. 將吸附柱放回收集管內(nèi),12,000 rpm 離心2 分鐘贤牛,離去殘留的洗滌液惋鹅。
9. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 滅菌離心管內(nèi)殉簸,在吸附柱中心加入40 μL 預(yù)熱洗脫液闰集,靜置2分鐘,12,000 rpm 離心1分鐘般卑,收集DNA溶液武鲁。提取的DNA即可用于下一步實(shí)驗(yàn)或-20℃保存。
注意事項(xiàng):
1.裂解液蝠检、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì)沐鼠,操作過程請(qǐng)做好防護(hù)措施,避免直接接觸皮膚叹谁,防止吸入口鼻迟杂。如不慎沾染皮膚或眼睛,請(qǐng)立即用清水或生理鹽水沖洗本慕,必要時(shí)請(qǐng)就醫(yī)排拷。
2.如血液量不足200μL,請(qǐng)用0.85% 生理鹽水補(bǔ)至200μL锅尘;如血液量超出200μL监氢,請(qǐng)使用BIOG中量血液DNA提取試劑盒或BIOG血液富集DNA提取試劑盒。
3. 如果提取的血液為鳥類藤违、禽類的血液浪腐,因有核紅細(xì)胞較多,提取血液量應(yīng)適當(dāng)減少顿乒,研究者應(yīng)先進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)议街,選擇合適用量。
4.提取的DNA如暫不使用璧榄,應(yīng)-20℃保存特漩。
操作步驟?(請(qǐng)自行準(zhǔn)備無水乙醇吧雹、異丙醇和滅菌1.5mL離心管):
1. 取出洗滌液,按以下操作:
a) 洗滌液A:21mL加入9mL無水乙醇涂身;42mL加入18mL無水乙醇雄卷,混勻。
b) 洗滌液B:9mL加入21mL無水乙醇蛤售;18mL加入42mL無水乙醇丁鹉,混勻。
c) 配制好的洗滌液如出現(xiàn)沉淀悴能,可在37℃溶解揣钦,搖勻后使用。
2. 取1.5mL離心管漠酿,加入200μL血液樣本拂盯,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液,振蕩混勻记靡,65℃水浴10 分鐘谈竿。
3. 加入150μL異丙醇(總體積的25%),混合均勻摸吠,如有半透明懸浮物空凸,不影響DNA的提取與后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
4. 將吸附柱放入收集管內(nèi)寸痢,將上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi)呀洲,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液啼止;
5. 將吸附柱放回收集管內(nèi)道逗,加500μL 洗滌液A至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 離心1 分鐘献烦,棄收集管內(nèi)廢液滓窍。
6. 將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL 洗滌液B至吸附柱內(nèi)巩那,12,000 rpm 離心1 分鐘吏夯,棄收集管內(nèi)廢液。
7. 按每份樣本40μL 取洗脫液(如10份提取樣本即横,即取400μL 洗脫液)噪生,放置于滅菌1.5mL離心管,65℃預(yù)熱东囚。
8. 將吸附柱放回收集管內(nèi)跺嗽,12,000 rpm 離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液。
9. 取出吸附柱桨嫁,放入新的1.5 mL 滅菌離心管內(nèi)植兰,在吸附柱中心加入40 μL 預(yù)熱洗脫液,靜置2分鐘瞧甩,12,000 rpm 離心1分鐘钉跷,收集DNA溶液弥鹦。提取的DNA即可用于下一步實(shí)驗(yàn)或-20℃保存肚逸。
注意事項(xiàng):
1.裂解液、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì)彬坏,操作過程請(qǐng)做好防護(hù)措施朦促,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻栓始。如不慎沾染皮膚或眼睛务冕,請(qǐng)立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時(shí)請(qǐng)就醫(yī)幻赚。
2.如血液量不足200μL禀忆,請(qǐng)用0.85% 生理鹽水補(bǔ)至200μL;如血液量超出200μL落恼,請(qǐng)使用BIOG中量血液DNA提取試劑盒或BIOG血液富集DNA提取試劑盒箩退。
3. 如果提取的血液為鳥類、禽類的血液佳谦,因有核紅細(xì)胞較多戴涝,提取血液量應(yīng)適當(dāng)減少,研究者應(yīng)先進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)出嘹,選擇合適用量陕壹。
4.提取的DNA如暫不使用识埋,應(yīng)-20℃保存。