產(chǎn)品特點(diǎn)
操作簡(jiǎn)便快速岛请,20分鐘左右可獲得理想的DNA;
◎提取DNA純度高警绩,無抑制劑崇败,1.7<A260/A280≤2.0;
◎產(chǎn)量更高肩祥,較國(guó)內(nèi)同類產(chǎn)品高出20%后室;
◎樣本范圍廣,可用于新鮮混狠、冷凍或陳舊的全血樣本岸霹。
產(chǎn)品介紹
BIOG Blood DNA Isolate Kit是專門用于血液DNA的提取純化。本試劑盒采用獨(dú)特的裂解液配方将饺,可直接從新鮮贡避、冷凍或陳舊的全血中提取高質(zhì)量的基因組DNA,也可以直接提取得到血液中感染的細(xì)菌或轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞DNA予弧, 省去了一般血液DNA提取試劑盒所需的白細(xì)胞分離步驟刮吧,操作簡(jiǎn)便快速,只需20分鐘左右即可完成血液DNA提取掖蛤,并且DNA提取得率較高杀捻,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因組DNA。BIOG Blood DNA Isolate Kit采用了最新的優(yōu)質(zhì)離子膜蚓庭,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化水醋,提取得到的DNA純度更高,最大限度地去除了蛋白彪置、色素拄踪、脂類等雜質(zhì)污染,可以直接應(yīng)用于PCR拳魁、熒光定量PCR和各種酶切試驗(yàn)等惶桐。
操作步驟?(請(qǐng)自行準(zhǔn)備無水乙醇、異丙醇和滅菌1.5mL離心管):
1. 取出洗滌液潘懊,按以下操作:
a) 洗滌液A:21mL加入9mL無水乙醇姚糊;42mL加入18mL無水乙醇,混勻授舟。
b) 洗滌液B:18mL加入42mL無水乙醇救恨;36mL加入84mL無水乙醇,混勻释树。
c) 配制好的洗滌液如出現(xiàn)沉淀肠槽,可在37℃溶解擎淤,搖勻后使用。
2. 取1.5mL離心管秸仙,加入200μL血液樣本嘴拢,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液,振蕩混勻寂纪,65℃水浴10 分鐘席吴。
3. 加入150μL異丙醇(總體積的25%),混合均勻捞蛋,如有半透明懸浮物孝冒,不影響DNA的提取與后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
4. 將吸附柱放入收集管內(nèi)拟杉,將上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi)庄涡,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液捣域;
5. 將吸附柱放回收集管內(nèi)啼染,加500μL 洗滌液A至吸附柱內(nèi)宴合,靜置1分鐘焕梅,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液卦洽。
6. 將吸附柱放回收集管內(nèi)贞言,加500μL 洗滌液B至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 離心1 分鐘阀蒂,棄收集管內(nèi)廢液该窗。
7. 將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL 洗滌液B至吸附柱內(nèi)蚤霞,12,000 rpm 離心1 分鐘酗失,棄收集管內(nèi)廢液。
8. 按每份樣本40μL 取洗脫液(如10份提取樣本昧绣,即取400μL 洗脫液)规肴,放置于滅菌1.5mL離心管,65℃預(yù)熱夜畴。
9. 將吸附柱放回收集管內(nèi)拖刃,12,000 rpm 離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液贪绘。
10. 取出吸附柱兑牡,放入新的1.5 mL 滅菌離心管內(nèi),在吸附柱中心加入40 μL 預(yù)熱洗脫液税灌,靜置2分鐘均函,12,000 rpm 離心1分鐘亿虽,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實(shí)驗(yàn)或-20℃保存边酒。
注意事項(xiàng):
1.裂解液经柴、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì),操作過程請(qǐng)做好防護(hù)措施墩朦,避免直接接觸皮膚坯认,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛氓涣,請(qǐng)立即用清水或生理鹽水沖洗牛哺,必要時(shí)請(qǐng)就醫(yī)。
2.如血液量不足200μL劳吠,請(qǐng)用0.85% 生理鹽水補(bǔ)至200μL引润;如血液量超出200μL,請(qǐng)使用BIOG中量血液DNA提取試劑盒或BIOG血液富集DNA提取試劑盒痒玩。
3. 如果提取的血液為鳥類淳附、禽類的血液,因有核紅細(xì)胞較多蠢古,提取血液量應(yīng)適當(dāng)減少奴曙,研究者應(yīng)先進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn),選擇合適用量草讶。
4.提取的DNA如暫不使用洽糟,應(yīng)-20℃保存。