0 緒論

0.1 什么是微生物凿渊？它包括哪些類群使鹅？

微生物是一切肉眼看不 見或看不清的微小生物的總稱绝淡。類群包括所有無細胞結構的病毒、所有原核生物和真核生物中的真菌 锄贷、單細胞藻類和原生動物等译蒂。

0.2 微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一個谊却？

1. 體積小柔昼，比面值大（是其他四大共性的基礎）
2. 吸收多，轉化快：
3. 生長旺炎辨，繁殖快：
4. 適應強捕透，易變異：
5. 分布廣，種類多

0.3 簡述微生物學發(fā)展史上5個時期的特點和代表人物蹦魔。

1. 史前期（朦朧）：未見微生物個體激率；憑實踐經驗利用微生物進行有益活動；
2. 初創(chuàng)期（形態(tài)）：自制單式顯微鏡觀察微生物個體勿决；出于愛好對微生物進行形態(tài)描述乒躺；代表：列文虎克——微生物學的先驅者；
3. 奠基期（生理）：建立微生物學低缩；創(chuàng)立微生物學基本研究方法嘉冒；運用“實踐－理論－實踐”的思想開展研究；建立應用性分之學科咆繁；進入尋找病原菌的黃金時期讳推；代表：巴斯德——微生物學奠基人，科赫——細菌學奠基人玩般；
4. 發(fā)展期（生化）：酵母的生化研究银觅；發(fā)現微生物的代謝統(tǒng)一性；形成普通微生物學坏为；開始尋找微生物的有益代謝產物究驴；青霉素的發(fā)現推動微生物的工業(yè)化培養(yǎng)镊绪；代表：E. Buchner——生物化學奠基人；
5. 成熟期（分子）：1??運用分子生物學理論和現代研究方法洒忧；2??基因工程與發(fā)酵工程蝴韭；3??理論性、交叉性熙侍、應用性和實驗性分支學科的發(fā)展榄鉴；4??微生物學的基礎理論和實驗技術推動生命科學各領域發(fā)展；5??微生物基因組研究測進生物信息學和合成生物學的到來蛉抓。

0.4 人類遲至19世紀才真正認識微生物庆尘，其中主要克服了哪些重大障礙？

1. 個體微兄パ：列文虎克第一個制造顯微鏡讓肉眼可觀察到微生物細胞减余；
2. 雜居混生：科赫發(fā)明固體培養(yǎng)基對微生物進行純種分離；
3. 因果難聯(lián)：巴斯德運用滅菌技術惩系，發(fā)現了腐敗的來源位岔，推翻自然發(fā)生學說而確立了胚種學說。

1 原核生物

1.1 細菌的基本形態(tài)有哪幾類堡牡？還有哪些特殊形態(tài)抒抬？

球菌、桿菌和螺旋菌晤柄；螺旋菌中擦剑，螺旋不足一環(huán)稱為弧菌，2 至 6 環(huán)芥颈、小而堅硬的稱螺菌惠勒，超過 6 環(huán)、長而柔軟的稱螺旋體爬坑。

除此以外纠屋，還有芽生和有附屬物的細菌，以及絲狀細菌盾计。

1.2 試圖示 G+ 和 G- 細菌細胞壁的主要構造售担，并簡要說明其異同。

G＋細胞的細胞壁署辉，主要是極厚的肽聚糖族铆，其中嵌有磷壁酸，脂磷壁酸跨越肽聚糖層哭尝，與細胞膜間存在周質空間哥攘。G－細胞的細胞膜與外膜間有周質空間，包括一層薄的肽聚糖，和脂蛋白献丑，脂蛋白再連接由磷脂層和脂多糖層構成的外膜末捣，其中嵌入外膜蛋白和孔蛋白侠姑。

1）在厚度上创橄，G＋細胞的細胞壁遠大于 G－ 細胞的；2）在組成上莽红，G＋的較簡單妥畏，主要含肽聚糖和磷壁酸，G－則成分復雜安吁；3）在層次上醉蚁，G＋ 細胞的較簡單，而 G－細胞的層次較多鬼店；4）另外网棍，G＋的周質空間在質膜與細胞壁間，而G－細胞的則在質膜與外膜間妇智。

1.3 試圖示肽聚糖的模式構造

結構單位有：乙酰葡糖胺滥玷、N－乙酰胞壁酸、四肽尾巍棱、肽橋惑畴。它們構成一個肽聚糖的單體。

1.4 試比較鞭毛航徙，菌毛與性菌毛的異同如贷。

鞭毛是生長在某些細菌表面的長絲狀、波曲的蛋白質附屬物到踏，具有運動功能杠袱，由基體、鞭毛鉤和鞭毛絲構成窝稿；菌毛是纖細楣富、中空、短直讹躯、數量較多的蛋白質類附屬物菩彬，有調節(jié)細菌吸附性的功能；性菌毛的構造和成分與菌毛相同潮梯，但較長骗灶、較粗，數量少秉馏，其傳遞遺傳物質的功能耙旦。

1.5 試述芽孢的構造及研究芽孢的理論及實際意義。

芽孢是在細胞內形成的厚壁構造萝究，其核心為芽孢壁和芽孢質膜包裹的芽胞質和芽孢核區(qū)免都，其外依次是皮層锉罐、芽孢衣和孢外壁。

對于理論意義绕娘，芽孢的有無脓规、形態(tài)、大小和著生位置是細菌分類和鑒定中的重要形態(tài)學指標险领；對于實際意義侨舆，芽孢的存在可提高菌種的篩選效率、有利于菌種長期保藏绢陌、方便判斷各種消毒殺菌措施的優(yōu)劣挨下。

1.6 試比較古生菌、細菌和真核生物間的主要差別脐湾。

1. 古生菌含有聚多糖臭笆，糖蛋白或脂蛋白質，無肽聚糖秤掌；
2. 古生菌的醇與甘油通過醚鍵相連愁铺；細菌的脂肪酸與甘油通過酯鍵相連；
3. 真核生物和細菌中由典型的磷脂机杜；古生菌的細胞質膜為單層帜讲，或雙層多分支的脂肪鏈。
4. 古生菌細胞含一個染色體椒拗，是閉合環(huán)狀雙鏈 DNA似将，比細菌染色體小，核小體與 DNA 復制蛋白類似真核生物蚀苛。
5. 古生菌 mRNA 可能為多基因在验，無 RNA 拼接；
6. 古生菌啟動子類似細菌啟動子堵未；
7. 古生菌具有細菌和真核生物tRNA所沒有的修飾堿基腋舌；
8. 古生菌核糖體為 70S，形狀多變渗蟹，與細菌和真核生物都不同块饺；
9. 延伸因子 EF-2 與真核生物相似；

1.7 試設計一張表格雌芽，比較一下 6 大類原核生物的主要特性授艰。

6 大類原核生物分別為：細菌、放線菌世落、藍細菌淮腾、枝原體、立克次氏體和衣原體。

特征比較：略谷朝，見周德慶 P42 小結洲押。

2 真核微生物

2.0 試簡介菌絲、菌絲體圆凰、子實體杈帐、酵母菌、霉菌送朱、蕈菌娘荡、芽痕、 真菌絲驶沼、假菌絲等名詞。（一星）

• 菌絲：霉菌營養(yǎng)體的基本單位争群。有無隔菌絲（長管狀單細胞回怜，多核）和有隔菌絲（成串多細胞，一個或多個細胞核）兩種换薄。
• 菌絲體：許多菌絲交織而成的一個菌絲集團玉雾。密布在固體營養(yǎng)基質內部、吸取營養(yǎng)物的稱為營養(yǎng)菌絲體轻要；伸展到空間的稱為氣生菌絲體复旬。兩種菌絲體還在進化中發(fā)展出各種特化構造。
• 子實體：特化的氣生菌絲冲泥，交織成墊狀驹碍、殼狀等。是繁殖器官凡恍，在其里面或上面可形成有性孢子或無性孢子志秃。
• 酵母菌：泛指能發(fā)酵糖類的各種單細胞真菌，不是分類學上的名詞嚼酝。
• 霉菌：是一些引起物質霉變的 “絲狀真菌” 的統(tǒng)稱浮还，不是分類學上的名詞。
• 蕈菌：又稱傘菌闽巩，是一些 “能形成大型肉質子實體的真菌” 的統(tǒng)稱钧舌，不是分類學上的名詞。包括大多數擔子菌類和少數子囊菌類涎跨。
• 芽痕：芽殖（一種無性繁殖）中洼冻，芽體脫離母體后在母體上留下芽痕（bud scar）。
• 假菌絲：酵母進行一連串芽殖后六敬，子細胞與母細胞不立即分離碘赖、以狹小的面積相連而成藕節(jié)狀的細胞串，稱為假菌絲。
• 真菌絲：細胞串成竹節(jié)狀普泡，細胞相連且橫隔面積與細胞直徑一致播掷，稱為真菌絲。

2.1 試列表比較真菌孢子的類型撼班、主要特點和代表種屬歧匈。

• 無性孢子：
  1. 游動孢子：有鞭毛，能游泳砰嘁。代表：壺菌件炉。
  2. 孢囊孢子：水生型有鞭毛。代表：根霉矮湘、毛霉胃夏。
  3. 分生孢子：外形極多樣菊卷，數量極多，少數為多細胞。代表：曲霉污呼、青霉项郊。
  4. 節(jié)孢子：柱形偏化，各孢子同時形成嗅绰。代表：白地霉。
  5. 厚垣孢子：在菌絲頂端或中間形成向族。代表：總狀毛霉呵燕。
  6. 芽孢子：在酵母上出芽形成。代表：假絲酵母件相。
  7. 擲孢子：鐮再扭、豆、腎形适肠，成熟時從母細胞射出霍衫。代表：擲孢酵母屬。
• 有性孢子：
  1. 卵孢子：厚壁侯养，休眠敦跌。代表：德氏腐霉。
  2. 接合孢子：厚壁逛揩，休眠柠傍，大，深色辩稽。代表：根霉惧笛、毛霉。
  3. 子囊孢子：長在各種子囊內逞泄。代表：脈孢菌患整、紅曲拜效。
  4. 擔孢子：長在特有的擔子上。代表：蘑菇各谚、香菇紧憾。

3 病毒

3.0 名詞解釋：核衣殼、溫和噬菌體昌渤、溶源性赴穗。（一星）

• 核衣殼：包括衣殼和核心，是任何真病毒都具有的基本結構膀息。
• 溫和噬菌體：侵入細胞后般眉，基因組整合到宿主基因組、與宿主細胞 DNA 同步復制潜支，并隨著宿主細胞的生長繁殖而傳下去,一般情況下不引起宿主細胞裂解的噬菌體甸赃。
• 溶源性：侵入宿主細胞后，噬菌體基因組整合到宿主的基因組上毁腿、并隨宿主基因組的復制而進行同步復制辑奈，而并不引起宿主細胞裂解，這種現象成為溶源性已烤。

3.1 什么是烈性噬菌體？以 T 偶數噬菌體為例妓羊，簡述其生活周期胯究。

烈性噬菌體是侵入細胞后在其中完成復制和完成其生活周期、并最后摧毀和裂解細菌細胞的噬菌體躁绸。

以 T 偶數噬菌體為例裕循，烈性噬菌體的生活周期——裂解性周期可分為 5 部分。

1. 吸附：噬菌體在隨機碰撞中净刮。尾絲尖端與宿主細胞表面的特異性受體接觸剥哑、結合；
2. 侵入：吸附淹父、固著后株婴，尾鞘把尾管推出，水解并侵入細胞壁暑认，插入細胞膜后注射核酸困介；
3. 增殖：噬菌體以核酸利用宿主細胞的代謝系統(tǒng)，產生大量的病毒蛋白質和核酸蘸际；
4. 裝配：新合成的病毒 DNA 與衣殼蛋白質進行自組裝座哩，成為成熟的噬菌體；
5. 裂解：大量子代噬菌體成熟后粮彤，通過脂肪酶和溶菌酶促進細胞裂解根穷，從而完成子代噬菌體的釋放姜骡。

4 營養(yǎng)與培養(yǎng)基

復習要點：

4.1 營養(yǎng)與營養(yǎng)物質

微生物為了生存就必須從環(huán)境中吸取各種物質以合成細胞物質、提供能量以及在新陳代謝中起調節(jié)作用屿良；其中具有營養(yǎng)功能的物質圈澈，稱為營養(yǎng)物質。

營養(yǎng)則是有機體吸取和利用營養(yǎng)物質的過程管引。

4.2 自養(yǎng)與異養(yǎng)微生物

必須利用有機碳源的微生物就是異養(yǎng)微生物士败；以無機碳源作唯一或主要碳源的微生物就是自養(yǎng)微生物。

4.3 微生物的營養(yǎng)類型并舉例說明

營養(yǎng)類型是根據微生物生長所需要的主要營養(yǎng)要素即能源和碳源的不同而劃分的微生物類型褥伴。按對能源谅将、氫供體和基本碳源的需要可以分為 4 種類型：

1. 光能自養(yǎng)型：能源是光，氫供體和基本碳源（CO2）都是無機物重慢，實例有藍細菌饥臂、紫硫細菌、藻類等似踱；
2. 光能異養(yǎng)型：能源是光隅熙，氫供體是有機物，基本碳源是簡單有機物和 CO2核芽，實例有紅螺菌科的細菌囚戚。
3. 化能自養(yǎng)型：能源、氫供體和基本碳源（CO2）都是無機物轧简，實例有硝化細菌驰坊、硫化細菌等；
4. 化能異養(yǎng)型：能源哮独、氫供體和基本碳源都是有機物拳芙，實例包括絕大多數原核生物、全部真菌和原生動物皮璧。

4.4 營養(yǎng)物質進入胞內的方式及異同點

方式包括單純擴散舟扎、促進擴散、主動運輸和基團移位悴务。它們的異同點概括如下：

• 運送方式：
  • 不通過膜蛋白：單純擴散
  • 通過膜蛋白：
    • 不耗能：促進擴散
    • 耗能：
      • 分子不變：主動運輸
      • 分子改變：集團移位

4.5 鑒別培養(yǎng)基的定義睹限，以 EMB 為例說明其具有鑒定功能的原因。

鑒別培養(yǎng)基（differential medium）是用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基惨寿，在培養(yǎng)基中加入能與某種代謝產物發(fā)生顯色反應的指示劑邦泄，從而產生某種明顯的特征性變化，以區(qū)別不同的微生物裂垦。

例如伊紅美蘭乳糖培養(yǎng)基（Eosin Methylene Blue顺囊，EMB）：

1. 其中的伊紅和美藍染料可抑制 G+ 細菌，因而篩選出容易培養(yǎng)的 G- 細菌蕉拢；
   1. 能分解乳糖的細菌會產酸特碳，
      1. 若產酸能力強诚亚，會染上酸性染料伊紅，并與美藍結合使菌落染上深紫色和綠色金屬光澤午乓；
      2. 若產酸能力弱站宗，則菌落會染上棕色;
   2. 不發(fā)酵乳糖的細菌，則不能產酸益愈，即不結合伊紅梢灭，菌落無色透明。

由此蒸其，根據菌落的顏色即可在 EMB 培養(yǎng)基上鑒別出 3 種類群的微生物敏释。

5 新陳代謝

 復習重點：

9.1 從遞氫體、受氫體摸袁、終產物钥顽、產能機制、產能效率方面比較有氧呼吸靠汁、厭氧呼吸及發(fā)酵

比較氧化磷酸化蜂大、底物水平磷酸化、光能磷酸化

化能自養(yǎng)微生物的特點及生長緩慢的原因蝶怔？

兩用代謝途徑及代謝回補順序的定義與意義

9.2 生物固氮反應的六要素及不同固氮菌的避氧機制

• 固氮反應 6 要素有：

  1. 能量ATP的供體（N2:ATP=1:18-24）
  • 還原力[H]及其傳遞載體：
    • 還原力由NAD(P)H2提供;
    • 傳遞載體：鐵氧還蛋白( Fd )奶浦，黃素氧還蛋白( Fld )
  • 固氮酶（固二氮酶和固二氮還原酶）
  • 底物N2
  • Mg2+
  • 嚴格的厭氧微環(huán)境

• 避氧機制：

  1. 好氧性自生固氮菌的抗氧保護機制
     • 呼吸保護：極強的呼吸作用迅速消耗氧
     • 構象保護：固氮酶形成一個無固氮活性但能防止氧害的特殊構象
  2. 放氧性光合生物（藍細菌）固氮酶的抗氧保護機制
     • 分化出特殊的還原性異形胞
     • 非異形胞藍細菌：白天與晚上分開進行
  3. 豆科植物根瘤菌固氮酶的抗氧保護機制
     － 豆血紅蛋白：通過氧化態(tài)（Fe3+）和還原態(tài)（ Fe2+ ）間的變化起緩沖作用，控制游離氧水平

9.3 微生物代謝調節(jié)的特點及在發(fā)酵工業(yè)的意義

6 生長與控制

 無重點

微生物的生長與繁殖之間的關系如何? 研究它們的生長繁殖有何理論與實踐意義?

單細胞微生物的典型生長曲線包括哪幾個時期? 影響延滯期長短的因素主要有哪些? 延滯期有何特點? 實踐上如何縮短它? 指數期有何特點? 處于此期的微生物有何應用? 穩(wěn)定期有何特點? 穩(wěn)定期到來的原因有哪些?

典型生長曲線包括：延滯期踢星、指數期财喳、穩(wěn)定期、衰亡期斩狱。

延滯期。主要特點有：1）生長速率常數為 0扎瓶，2）細胞形態(tài)變大或增長所踊，3）細胞內 RNA 尤其是 rRNA 含量增高，4）合成代謝活躍概荷，5）對外界不良條件敏感秕岛。影響延滯期長短的因素包括：接種齡、接種量误证、培養(yǎng)基成分继薛；實踐中通過增大接種量、用營養(yǎng)豐富的天然培養(yǎng)基來縮短延滯期愈捅。

指數期遏考。主要特點有：1）生長速率常數 R 最大，2）平衡生長蓝谨，3）酶系統(tǒng)活躍灌具、代謝旺盛青团。應用：由于整個群體的生理特性較一致、細胞各成分平衡增長和生長速率恒定的優(yōu)點咖楣，指數期群體可 1）用作代謝督笆、生理和酶學等研究的良好材料，2）增殖噬菌體的最適宿主诱贿，3）發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料娃肿。

穩(wěn)定期。主要特點有：1）新增細胞數與衰亡細胞數相等珠十，2）菌體產量達到最大值料扰。進入穩(wěn)定期的原因有：1）營養(yǎng)物質耗盡，2）營養(yǎng)物的比例失調宵睦，3）有害代謝產物的積累记罚，4）理化條件越來越不適宜。

什么是同步生長? 試以 Helmstetter-Cummings 法來說明獲得微生物同步生長的方法.

同步生長指通過同步培養(yǎng)技術使微生物群體中的各個個體處于分裂步調一致的生長狀態(tài)壳嚎。方法包括 1）環(huán)境條件誘導法（氯霉素抑制蛋白質合成桐智、細菌芽孢誘導發(fā)芽、藻類細胞的光照和黑暗控制）烟馅；機械篩選法（體積说庭、大小相似性），包括Helmstetter-Cummings 膜洗脫法郑趁。

Helmstetter-Cummings 膜洗脫法把細胞用濾膜吸附帶相反電荷的細胞刊驴，隨后用新鮮培養(yǎng)液洗脫。最先洗脫的是未吸附細胞寡润；而后捆憎，由于吸附的細胞發(fā)生分裂，其子細胞被培養(yǎng)液洗脫梭纹，收集剛滴下的培養(yǎng)液可獲得同不生長的細胞躲惰。

什么是連續(xù)培養(yǎng)? 試比較兩類連續(xù)培養(yǎng)器(恒濁器和恒化器)的特點和應用范圍。

連續(xù)培養(yǎng)向培養(yǎng)容器中連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)液变抽，使微生物的液體培養(yǎng)物長期維持穩(wěn)定础拨、高速生長狀態(tài)的一種溢流培養(yǎng)技術。

比較：略绍载。

試列表比較滅菌诡宗、消毒、防腐和化療的特點（原理击儡、對象等）塔沃，并各舉實例加以說明。

7 遺傳與育種

請你設計篩選營養(yǎng)缺陷型突變體的方案

在培養(yǎng)基中以該營養(yǎng)物作為唯一的碳源曙痘、氮源或其他必要營養(yǎng)芳悲，然后對樣本進行培養(yǎng)立肘；形成的菌落即為篩選所得

何謂菌種退化？

衰退（degeneration名扛，退化谅年？）： 菌種在培養(yǎng)或保藏過程中，由于自發(fā)突變的存在肮韧，出現某些原有優(yōu)良生產性狀的劣化融蹂、遺傳標記的丟失等現象，稱為菌種的衰退弄企。

常見的衰退的原因有基因突變和分離現象超燃。常見的衰退現象有：1）菌落和細胞形態(tài)的改變；2）生長速度緩慢拘领，產孢子越來越少意乓；3）抵抗力、抗不良環(huán)境能力減弱等约素；4）代謝產物生產能力或其對宿主寄生能力下降

8 生態(tài)

無思考題届良、重點

9 傳染與免疫

復習思考題

9.0 致病性，毒力圣猎，外毒素士葫，內毒素，類毒素送悔，抗原慢显，抗體， 單克隆抗體欠啤，變態(tài)反應荚藻，免疫佐劑，抗原決定簇洁段，抗原結 合價

9.1 病原微生物具有的與致病有關的特征有哪些鞋喇？

一方面是侵襲力，包括吸附和侵入能力眉撵、繁殖與擴散能力、對宿主防御機能的抵抗能力落塑；另一方面是破壞能力纽疟，包括對宿主細胞的直接破壞作用、產生毒素（外毒素憾赁、內毒素）污朽。

9.2 說明抗體在保護宿主健康中的作用。

有難度龙考。

_9.3 常用的免疫學技術有哪些蟆肆？主要原理是什么矾睦？

1. 血清學反應
   • 凝集反應：用顆粒性抗原與抗體在電解質參與下結合形成肉眼可見的凝集塊
   • 沉淀反應：可溶性或膠體抗原與相應的抗體結合后，在適量電解質存在下形成肉眼可見沉淀物
     1. 經典：環(huán)狀沉淀法炎功、絮狀沉淀法
     2. 現代：單向免疫擴散法枚冗、雙向免疫擴散法、對流免疫電泳法蛇损、火箭電泳法赁温、雙向免疫電泳法
2. 免疫熒光抗體技術：用已知的熒光抗體浸染待檢的含有抗原的細胞或組織切片，發(fā)生特異性結合淤齐，形成復合物而粘著在細胞上股囊，不易洗脫，在熒光顯微鏡下成為發(fā)出熒光的可見物
   • 酶聯(lián)免疫吸附法：先用酶標記抗原或抗體更啄，并以酶對底物的反應來指示抗體 或抗原反應特異性
3. 單克隆抗體技術：
   • 單克隆抗體：由單一克隆B細胞雜交瘤產生的稚疹、只識別抗原分子某一特定抗原決定簇的、具有高度特異性的抗體
   • 基因工程抗體：通過 PCR 技術獲得抗體基因或抗體基因片段祭务，再與適當載體重組后引入不同表達系統(tǒng)所產生的抗體

10 分類

何謂五界系統(tǒng)内狗？是誰提出來的？它有何優(yōu)缺點待牵？

Whittaker 提出的五界系統(tǒng)包括動物界其屏、植物界、原生生物界缨该、真菌界偎行、原核生物界。

它的優(yōu)點有：1）反映了從原核生物贰拿，到真核生物單細胞生物蛤袒，再到真核多細胞生物的三個進化階段；2）顯示了光合式營養(yǎng)膨更、吸收式營養(yǎng)妙真、攝食式營養(yǎng)三大進化方向。其缺點是原生生物界內的生物龐雜荚守、混亂珍德、親緣關系較遠，并不一定有共同的原核生物祖先矗漾，似乎不能作為一個自然的分類群锈候。

給你一個細菌培養(yǎng)物，如何將其鑒定到種敞贡？

得到微生物的純培養(yǎng)物后泵琳，先測定一系列經典的、必要的鑒定指標，如個體群體形態(tài)获列、生理生化反應特征谷市、生態(tài)特征、生活史等等击孩；然后根據這些指標迫悠，查找權威性的菌種鑒定手冊。

若查閱鑒定手冊過程中遇到困難溯壶，則按需要測定其他相關的指標及皂。