單細(xì)胞 | Pseudobulk RNA-seq

閱讀Integrated multi-omic characterization of congenital heart disease這篇文章的時候發(fā)現(xiàn)一張圖(圖2d、2e)弄息。
Fig. 2: snRNA-seq showing the unique transcriptional signature of cardiomyocytes in paediatric patients with CHD.

原文說使用了pseudo-bulk RNA-seq analysis尔崔,查看methods。

查了一下資料呛伴,Pseudobulk RNA-seq指的是把scRNA-seq數(shù)據(jù)按照基因累加counts表達(dá)值勃痴,當(dāng)作每個樣本或細(xì)胞類型的bulk RNA-seq數(shù)據(jù)谒所,目的是比較樣本或細(xì)胞類型間的總體差異。

主要有兩種形式:

1.一個樣本的所有scRNA-seq數(shù)據(jù)(或者隨機(jī)選一部分?jǐn)?shù)據(jù))合并成一個樣本的bulk數(shù)據(jù)沛申,比較不同樣本劣领。
2.scRNA-seq的某個或某種細(xì)胞簇下面的所有細(xì)胞合并成一個樣本的bulk數(shù)據(jù),比較不同細(xì)胞類型铁材。

前述文章圖片的數(shù)據(jù)就是把心肌細(xì)胞的三個亞類(CM1剖踊、CM2、CM3)按照不同疾病類型(Control衫贬、TOF德澈、DCM等)合并,使用PCA進(jìn)行評估展示固惯,發(fā)現(xiàn)CHD diagnosis是樣本間的主要差異來源梆造。

實(shí)現(xiàn)方法:

  1. R包:muscat,封裝好的函數(shù)直接用葬毫。
  2. 像文章中一樣镇辉,利用aggregate函數(shù)分組統(tǒng)計(jì),將單細(xì)胞數(shù)據(jù)整合成bulk數(shù)據(jù)贴捡,之后用Deseq2等方法分析差異忽肛。

參考文獻(xiàn):Nature, 2022, 608, 181–191.
Nature Communications, 2021, 12, 5692.

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