用TBtools做物種內(nèi)共線(xiàn)性分析(僅步驟)

主要是參考https://www.tinymind.net.cn/articles/64d36abc7fd091

首先我們拿到的是以下的材料


搜狗截圖20200509201150.png

1. Blast比對(duì)

根據(jù)以下選擇blast


blast_1.png

然后將豌豆的fasta文件自己和自己比對(duì)(一般Hits數(shù)最少選擇5個(gè))


blast_2.png

這個(gè)時(shí)間比較長(zhǎng)罪治,我電腦大概用了一個(gè)晚上
得到了以下文件,命名是自己命的脱衙,(額...豌豆的簡(jiǎn)寫(xiě)應(yīng)該是Ps的,我最開(kāi)始寫(xiě)的Pi鲫骗,這個(gè)問(wèn)題不大哈哈)


blast_3.png

2. 獲得基因的位置信息

在搜索欄查找粘捎,然后點(diǎn)Text merge for MCScanx


MCScan_1.png

將blast結(jié)果簡(jiǎn)化


MCScan_2.png
得到Pisum_sativum.sim.gff文件

3. 進(jìn)行自我比對(duì)

將tab文件和sim.gff文件放入quick run MCScanX Wrapper,設(shè)置好保存結(jié)果路徑

MCScan_3.png

得到的結(jié)果如下
MCScan_4.png

其中tandem用excel打開(kāi)矮瘟,電腦原因目前打不開(kāi)了庐扫,如果打開(kāi)饭望,進(jìn)行分列
方法參考https://baijiahao.baidu.com/s?id=1623642728105642204&wfr=spider&for=pc
選擇根據(jù)步驟逗號(hào)處打鉤
然后將第一列另存為存為txt格式
如下圖
geneIDtext.png

獲得基因間關(guān)系的link文件,用Text merge for MCScanX
links_1.png

同理形庭,將link文件用excel打開(kāi)進(jìn)行分列铅辞,然后直接另存為txt
如圖


links_2.png

4. 可視化

基因組已經(jīng)組裝到染色體的,就不需要分析scaffold了萨醒,所以把原始gff文件scaffold的行刪除掉斟珊,只留下染色體,然后另存為Pisum_sativum_v1a_genes_del_scaffolfd.gff3(文件名)


gff_1.png

用circle gene view進(jìn)行可視化


view.png

然后就會(huì)得到以下的圖


view2.png

調(diào)整調(diào)整參數(shù) 顏色富纸,得到以下圖像
view3.png

...

大致的步驟就是這樣囤踩,但是我們要看特定基因的共線(xiàn)性旨椒,那么只需要將circle gene view中的set input gene ID list改改成特定的gene文本就行

但是我們得到的gene list是這樣的,這個(gè)gene list就是要看這些特定基因的共線(xiàn)性


gene1.png

但是links文件中是這樣的


gene2.png

所以要處理以下gene的ID堵漱,將.1 .2等刪掉钩乍,并且只留一個(gè),如Psat1g090040.1和Psat1g090040.3怔锌,變成Psat1g090040,并且只留一個(gè)Psat1g090040
后續(xù)處理就不在此做了

...
結(jié)束

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