Autocamtide 2, amide是鈣調(diào)蛋白激酶 (CaMK) 家族實驗的底物(100 μM final concentration)闽烙。
Autocamtide 2, amide is a substrate (100 μM final concentration) for CaMK family assays.
編號: 200825
中文名稱: 鈣調(diào)蛋白激酶底物Autocamtide 2, amide
英文名: Autocamtide 2, amide
單字母: H2N-KKALRRQETVDAL-NH2
三字母: H2N-Lys-Lys-Ala-Leu-Arg-Arg-Gln-Glu-Thr-Val-Asp-Ala-Leu-NH2
氨基酸個數(shù): 13
分子式: C65H119N23O19
平均分子量: 1526.78
精確分子量: 1525.91
等電點(PI): 11.66
pH=7.0時的凈電荷數(shù): 2.98
平均親水性: 0.9
疏水性值: -0.97
來源: 人工化學合成，僅限科學研究使用筷厘，不得用于人體鸣峭。
儲存條件: 負80℃至負20℃
標簽: 酶底物肽
Caspase酶對應的底物，Caspases（半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶酥艳，半胱氨酸依賴性天冬氨酸定向蛋白酶）是一類蛋白酶家族摊溶，其功能與凋亡（程序性細胞死亡），壞死和發(fā)燒（炎癥）的過程密切相關充石。
什么是胱天蛋白酶莫换？
胱天蛋白酶（Caspases）是含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶，它們是為細胞凋亡的主要介質(zhì)骤铃。多種受體拉岁，例如TNF-α 受體，F(xiàn)asL受體惰爬，TLR和死亡受體喊暖，以及Bcl-2和凋亡抑制劑（IAP）蛋白家族參與并調(diào)節(jié)該caspase依賴性凋亡途徑。一旦Caspase受到上游信號（外部或內(nèi)在）刺激被激活撕瞧，即會參與執(zhí)行下游蛋白底物的水解作用陵叽，并觸發(fā)一系列事件，導致細胞分解丛版，死亡巩掺，吞噬作用和細胞碎片的清除。
人Caspases酶
人的Caspases家族基于序列相似性和生物學功能等共性主要可分為三大類：第一類由具有長胱天蛋白酶募集結構域的“炎癥”胱天蛋白酶組成页畦，他們對P4位上的較大的芳香族或疏水性殘基具有親和力胖替。第二類由具有短的前體結構域的“細胞凋亡效應”胱天蛋白酶組成，而第三類由具有長的前提結構域的Pap位置具有亮氨酸或纈氨酸底物親和力的“凋亡引發(fā)劑”胱天蛋白酶組成（表1）。
啟動器Caspase和效應器Caspase酶
根據(jù)其在凋亡胱天蛋白酶途徑中的作用独令，胱天蛋白酶可分為兩類：啟動器和效應器Caspase酶端朵。啟動器和效應器Caspas酶都具有由小亞基和大亞基組成的催化位點，Caspase酶的識別位
凋亡啟動器Caspase酶记焊，例如caspase-2逸月，-8，-9和-10可以啟動caspase激活級聯(lián)反應遍膜。Caspase-8對于形成死亡誘導信號復合物（DISC）是必不可少的碗硬，并且在激活后，Caspase-8激活下游效應子Caspase（例如Caspase 3）并介導線粒體中細胞色素c的釋放瓢颅。Caspase-8已被證明對IETD肽序列具有相對較高的底物選擇性恩尾。凋亡效應胱天蛋白酶例如Caspase-3，-6和-7雖然不負責啟動級聯(lián)途徑挽懦，但是當被激活時翰意，它們在級聯(lián)的中間和后續(xù)步驟中起著不可或缺的作用。Caspase-3（CPP32 / apopain）是關鍵效應器信柿，因為它放大了來自啟動器Caspase的信號冀偶，使用對Caspase-3有選擇性的DEVD肽序列對活化的Caspase-3進行檢測，可以檢測Caspase-3的活性渔嚷。
Caspase酶底物和抑制劑
Caspase底物和抑制劑由兩個關鍵成分組成：Caspase識別序列和信號產(chǎn)生或蛋白酶抑制基序进鸠。不同Caspase識別序列不同，一般由三個或四個氨基酸組成（表2）形病。Caspase酶識別序列的N端通常有乙蹩湍辏基（Ac）或碳苯甲氧基（Z）基團修飾，以增強膜的通透性漠吻。對應的Caspase識別特定的肽序列為其酶促反應切割位點量瓜，釋放產(chǎn)生信號或抑制信號的基序。Caspase的顯色和熒光底物均以相似的方式起作用途乃，其中底物的信號或顏色強度與蛋白水解活性成正比绍傲。
Caspase酶的顯色底物
Caspase的顯色底物是有Caspase識別序列及生色基團組成，常見的生色團有pNA（對硝基苯胺或4-硝基苯胺）耍共，可使用酶標儀或分光光度計在405 nm處進行光密度檢測烫饼。
Caspase的熒光底物
Caspase的熒光底物的結構包含與半胱天冬酶識別相關的熒光團，例如7-氨基-4-甲基香豆素（AMC）划提，7-氨基-4-三氟甲基香豆素（AFC）枫弟， Rhodamine 110（R110）或ProRed?620邢享。R110的Caspase底物比基于香豆素的Caspase底物（例如AMC和AFC）更敏感鹏往，但由于兩步裂解過程，其動態(tài)范圍更窄。 建議將R110標記的Caspase底物用于終點法測定伊履，而將AMC和AFC標記的 Caspase底物用于動力學測定韩容。
