一哎甲、肝炎病毒
甲乙丙丁戊：慢性乙肝蔫敲、丙肝--原發(fā)性肝細胞癌、密切關系
病原：非嗜肝性病毒→也可急性肝炎：EB病毒炭玫、巨細胞病毒奈嘿、單純皰疹病毒、柯薩奇吞加、水痘-帶狀皰疹裙犹、麻疹尽狠、副黏液病毒
1.甲肝
小RNA病毒科、正鏈RNA叶圃。抵抗最強的病毒之一袄膏。1:4000甲醛溶液/福爾馬林、37℃71 h滅活
2.乙肝
嗜肝DNA病毒科掺冠。3種形態(tài)：22nm小球型外膜顆粒沉馆、22nm寬-管型顆粒、完整的42nm的Dane顆粒(雙層外殼)
不完全雙鏈環(huán)狀DNA德崭、長鏈(-)鏈斥黑，短鏈(+)鏈5'末端固定、3'末端位置不固定
高壓滅菌接癌、100℃10 mins滅活
3.丙肝
黃病毒科。50nm球形顆粒扣讼、正鏈RNA缺猛、1:1000福爾馬林37℃96 h處理、100℃5 mins椭符、60℃ 10 h荔燎，傳染性消失
4.丁肝
衛(wèi)星病毒科。缺陷病毒销钝。必須HBV or 其他<u>嗜肝DNA病毒</u>輔助才能增殖有咨。環(huán)狀RNA。核心外包以HBsAg蒸健。對脂溶劑(氯仿)等敏感座享。
5.戊肝
分類爭議。正鏈RNA似忧。對高熱敏感渣叛、煮沸滅活。
檢測
- 甲肝
糞口傳播盯捌、糞便主要傳染源淳衙。ALT↑、膽紅素≥1mg饺著、尿膽紅素+箫攀、抗HAV IgM+、抗HAV IgG 4倍↑ - 乙肝
母嬰幼衰、輸血&血源性傳播靴跛、性接觸為主的密接。體液傳染源渡嚣。ALT↑汤求、膽紅素↑俏险、尿膽紅素+、白蛋白↓扬绪、A/G蛋白比例失常竖独、γ-球蛋白↑、HBV DNA+挤牛、HBsAg&\HBeAg+莹痢、抗HBc IgM+ - 丙肝
母嬰、血為主墓赴、性接觸不多竞膳。ALT↑、膽紅素↑诫硕、HCV RNA+坦辟、抗HCV+ - 丁肝
血、血制品章办、注射器锉走、針頭。ALT↑藕届、膽紅素↑挪蹭、HBsAg+、HDAg & HDA RNA & 抗HDV + - 戊肝
糞口傳播休偶、水源污染→流行梁厉。ALT↑、膽紅素BIL＞10mg/L or 尿膽紅素+踏兜、抗HEV IgM+词顾、抗HEV IgG 4倍↑
二、HIV
性接觸碱妆、血液计技、母嬰。81年首次報道山橄、83年分離出HIV垮媒、85年我國發(fā)現(xiàn)。
(一)病原
逆轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬航棱，2型：HIV-1(占95%↑)睡雇、HIV-2。
2條相同的單股正鏈RNA饮醇。env編碼：外膜蛋白gp120穿膜蛋白gp41它抱；gag編碼：基質(zhì)蛋白p17、核衣殼蛋白p7p9朴艰、衣殼蛋白p24
理化抵抗力弱观蓄，56℃10 mins混移、各類消毒劑5 mins滅活。20~22℃ 7d侮穿、冷凍血制品68℃72 h 滅活歌径、紫外線不敏感
(二)病原分離方法
- 樣本采集
外周抗凝全血,ACD、CPD亲茅、肝素抗凝回铛，避免EDTA。 - 分離病原
BSL-3克锣、生物安全柜進行茵肃。離心→去掉血漿→用<u>淋巴細胞分離液</u>分離外周血單核細胞-PBMC。
最敏感分離技術--共培養(yǎng)袭祟，與未感染PBMC混合培養(yǎng)验残。生長慢、7~14 d可檢測逆轉(zhuǎn)錄活性or p24抗原巾乳。
（三）核酸檢測-定性/定量
- 定性:PCR您没、RT-PCR
- 定量:逆轉(zhuǎn)錄PCR、核酸序列擴增實驗NASBA想鹰、分支DNA雜交試驗bDNA
- HIV核酸檢測陰性-不能排除感染紊婉、報告本次陰性
- HIV核酸檢測陽性-不能單獨用于診斷药版、輔助指標辑舷。
（四）抗原檢測
感染早期、發(fā)病期-檢出率較高
適用于:
- HIV-1抗體不確定or窗口期輔助診斷
- 嬰兒早期輔助鑒別診斷
- 四代ELISA試劑陽性槽片、抗體確認陰性者輔助診斷
- 監(jiān)測病程進展&治療效果
- ELISA測p24抗原何缓，可使窗口期縮短1周。
- 抗體出現(xiàn)后还栓、p24陰性碌廓；感染后期再出現(xiàn)。
- 敏感性30%~90%剩盒，低于VL谷婆。陽性結(jié)果必須中和試驗確認。
（五）抗體檢測
- 抗體篩查試驗
- 酶聯(lián)免疫吸附法
- 凝集法
- 層析法
常規(guī)檢測宜ELISA辽聊、自采自供血單位必須HIV抗體檢測纪挎。
- 抗體確認試驗
免疫印跡試驗WB(常用)、條帶免疫試驗LIATAK HIV Ⅲ跟匆、放射免疫沉淀RIPA异袄、免疫熒光IFA.
三、脊髓灰質(zhì)炎病毒(小兒麻痹癥玛臂、VP1烤蜕、人橫紋肌瘤細胞RD封孙、轉(zhuǎn)人脊灰病毒受體的小鼠肺細胞L20B)
糞口傳播、感染后多數(shù)無癥狀--亞臨床經(jīng)過1%~1‰急性單/雙側(cè)性弛緩性麻痹讽营。急性傳染病
(一)病原
小核糖核酸病毒科(甲肝虎忌、小RNA病毒科)、腸道病毒屬斑匪。單股正鏈RNA呐籽。耐寒-70℃8年、4℃數(shù)周蚀瘸、不耐干燥(不宜冷凍干燥法保存)狡蝶、不耐熱60℃30 mins滅活。煮沸贮勃、紫外-迅速殺死贪惹。對高錳酸鉀、過氧化氫寂嘉、漂白粉敏感奏瞬。
分為ⅠⅡⅢ3個血清型，衣殼蛋白60個相同亞單位組成泉孩，亞單位由VP1~4蛋白組成硼端。VP1最主要抗原--引起中和反應。
(二)病原分離
糞便-最主要標本寓搬。麻痹前期&麻痹后2周內(nèi)珍昨、排毒呈間歇性，間隔采2份糞便句喷。間隔24~48 h镣典。
4℃↓保存，帶冰運輸唾琼。
所有糞便標本必須氯仿處理兄春，去除<u>細菌、真菌锡溯、有包膜病毒&細胞毒性脂類赶舆、分散病毒。</u>
兩種傳代細胞:人橫紋肌瘤細胞-RD祭饭、轉(zhuǎn)人脊灰病毒受體的小鼠肺細胞-L20B芜茵。
(三)特征性基因和抗原檢測
特異性核酸片段:VP1基因、VP4基因等甜癞。
PCR & 核苷酸序列測定
(四)抗體檢測
VP1蛋白-最主要抗原夕晓，ELISA檢測脊灰病毒的中和抗體--現(xiàn)已<u>不推薦</u>，僅用于抗體水平調(diào)查悠咱。IgG≥1:100為+蒸辆。
四征炼、麻疹病毒(丙類、Vero/SLAM推薦躬贡、PBMC谆奥、血凝素HA-凝集猴紅細胞、血溶素HL拂玻、F和H蛋白--中和抗原酸些、N和H基因)
發(fā)熱、呼吸道卡他癥狀檐蚜、全身斑丘疹--急性傳染病魄懂，丙類傳染病。65年麻疹減毒活疫苗闯第、疫苗可預防-死亡數(shù)最多市栗。
（一）病原
副黏病毒科麻疹病毒屬、有包膜病毒咳短。單股負鏈RNA填帽。
糖蛋白:血凝素HA(<u>凝集猴紅細胞</u>)、血溶素HL咙好。均為中和抗原篡腌、誘導中和抗體產(chǎn)生。
麻疹病毒抗原性穩(wěn)定勾效、1個血清型嘹悼。8個基因組A~H、23個基因型葵第。
理化因素绘迁、一般消毒劑都敏感合溺，56℃30 mins滅活卒密。
（二）病原分離方法
出疹前3天~出疹后3天<u>咽拭子、尿液棠赛、淋巴細胞哮奇。</u>
細胞培養(yǎng):Vero細胞(非洲綠猴腎細胞)、PBMC睛约、B95a(EB病毒轉(zhuǎn)化的狨猴淋巴母細胞)停用鼎俘、WHO推薦Vero/SLAM。
（三）特征性基因與抗原檢測
N基因 & H基因最易變異辩涝、N基因450個核苷酸-鑒定型別最小序列贸伐。
F蛋白 & H蛋白--中和抗原、誘導中和抗體怔揩。
（四）抗體檢測
- IgM抗體出現(xiàn)--早期麻疹感染捉邢。出疹3天內(nèi)75%檢測到脯丝、陰性不排除，3天后采第2支血伏伐。
- IgG終身--抗體陽性率調(diào)查宠进、人群抗體水平、疫苗初免結(jié)果藐翎。
