尿液 RNA 如何提刃趟场氯窍?

BIOG特點(diǎn)

◎提取 RNA 純度高饲常,無抑制劑,A260/A280 為 1.8-2.0狼讨;

◎產(chǎn)率高贝淤,同樣的樣本量提取的 RNA 更多;

◎可用于尿液樣本中 RNA 的提取政供,提取后的 RNA 可用于核酸檢測使用播聪;

◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑,安全無毒布隔。

BIOG介紹

BIOG RNA Urine Kit 采用了最新的優(yōu)質(zhì)進(jìn)口離子膜离陶,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化,能高效地分離 RNA衅檀。提取得到的 RNA 較其它品牌的同類試劑盒產(chǎn)量更大招刨,純度更高,最大限度地去除了蛋白术吝、色素计济、脂類茸苇、DNA 等雜質(zhì)污染排苍,可以直接應(yīng)用于 Northern 雜交、RT-PCR学密、Real Time RT-PCR淘衙、cDNA 文庫構(gòu)建、體外翻譯等各種常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)腻暮。

操作步驟

1. 請自行準(zhǔn)備:無水乙醇彤守、生理鹽水、10mL 無 RNA 酶離心管哭靖、1.5mL 無 RNA 酶離心管具垫。

2. 取出析出液和洗滌液,按以下操作:

a) 析出液:4.5mL 加入 25.5mL 無水乙醇试幽,混勻筝蚕;9mL 加入 51mL 無水乙醇,混勻铺坞。

b) 洗滌液:9mL 加入 21mL 無水乙醇起宽,混勻;18mL 加入 42mL 無水乙醇济榨,混勻坯沪。

c) 配制好的析出液及洗滌液如出現(xiàn)沉淀,可在 37℃溶解擒滑,搖勻后使用腐晾。

3. 取尿液 5mL(尿液的取用量在 1-5mL 范圍內(nèi))置于 10mL 無 RNA 酶離心管中叉弦,5000 rpm 離心 5 分鐘,小心棄上清赴魁,向離心管中加入 2mL

生理鹽水卸奉,輕輕振蕩混勻,5000 rpm 離心 5 min颖御,棄 1900μL 上清榄棵,剩余 100μL 上清,振蕩混勻潘拱。

4. 加入 200μL 裂解液和 20μL 消化液疹鳄,振蕩混勻,56℃水浴 10 分鐘芦岂。

5. 加入 500μL 析出液瘪弓,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物禽最,不影響 RNA 的提取與后續(xù)實(shí)驗(yàn)腺怯。

6. 將吸附柱放入收集管內(nèi),將上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi)川无,靜置 2 min呛占,12,000 rpm 4℃離心 1 min,棄收集管內(nèi)廢液懦趋。

7. 將吸附柱放回收集管內(nèi)晾虑,加 500μL 洗滌液至吸附柱內(nèi),靜置 2 min仅叫,12,000 rpm 4℃離心 1 min帜篇,棄收集管內(nèi)廢液。

8. 將吸附柱放回收集管內(nèi)诫咱,12,000 rpm 4℃離心 2 min笙隙,離去殘留的洗滌液。

9. 取出吸附柱坎缭,放入新的 1.5 mL 無 RNA 酶離心管內(nèi)幻锁,加入 30-60 μL 洗脫液哄尔,靜置 3 min富拗,12,000 rpm 4℃ 離心 2 min啃沪,收集 RNA 溶液缰雇。

提取的 RNA 即可用于下一步實(shí)驗(yàn)或-70℃保存械哟。

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