產(chǎn)品特點
◎提取 RNA 純度高愉粤,無抑制劑砾医,A260/A280 為 1.8-2.0;
◎產(chǎn)率高科汗,同樣的樣本量提取的 RNA 更多藻烤;
◎可用于唾液樣本中 RNA 的提取绷雏,提取后的 RNA 可用
于核酸檢測使用头滔;
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑,安全無毒涎显。
產(chǎn)品介紹
BIOG RNASaliva Kit 是用于提取唾液的 RNA 的試劑盒坤检。BIOG RNASaliva Kit 采用了最新的優(yōu)質(zhì)進(jìn)口離子膜,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化期吓,能高效地分離 RNA早歇。提取得到的 RNA 較其它品牌的同類試劑盒產(chǎn)量更大,純度更高讨勤,最大限度地去除了蛋白箭跳、色素、脂類等雜質(zhì)污染潭千,可以直接應(yīng)用于 Northern 雜交谱姓、RT-PCR、Real Time RT-PCR刨晴、 cDNA 文庫構(gòu)建屉来、體外翻譯等各種常規(guī)分子生物學(xué)實驗。
操作步驟
1. 請自行準(zhǔn)備:無水乙醇狈癞、無 RNA 酶 1.5 mL 離心管茄靠、無 RNA 酶 2.0 mL 離心管。
2. 取出析出液和洗滌液蝶桶,按以下操作:
a) 洗滌液 A:21mL 加入 9mL 無水乙醇慨绳,混勻;42mL 加入 18mL 無水乙醇真竖,混勻脐雪。
b) 洗滌液 B:9mL 加入 21mL 無水乙醇,混勻疼邀;18mL 加入 42mL 無水乙醇喂江,混勻。
c) 配制好的洗滌液如出現(xiàn)沉淀旁振,可在 37℃溶解获询,搖勻后使用涨岁。
3. 取 300μL 唾液至離心管中,加入 4μL RNACarrier 混合均勻吉嚣,加入 200μL 裂解液及 20μL 消化液梢薪,振蕩混勻,56℃水浴 10 分鐘尝哆。
4. 加入 1mL 無水乙醇秉撇,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物秋泄,不影響 RNA 的提取與后續(xù)實驗琐馆。
5. 將吸附柱放入收集管內(nèi),將 760μL 上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi)恒序,靜置 2 分鐘瘦麸,12,000 rpm 4℃離心 1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液歧胁;
6. 將吸附柱放回收集管內(nèi)滋饲,將剩余 760μL 溶液轉(zhuǎn)移至吸附柱內(nèi),重復(fù)步驟 5喊巍。
7. 將吸附柱放回收集管內(nèi)屠缭,加 500μL 洗滌液 A 至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 4℃離心 1 分鐘崭参,棄收集管內(nèi)廢液呵曹。
8. 將吸附柱放回收集管內(nèi),加 500μL 洗滌液 B 至吸附柱內(nèi)阵翎,靜置 2 分鐘逢并,12,000 rpm 4℃離心 1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液郭卫。
9. 將吸附柱放回收集管內(nèi)砍聊,12,000 rpm 4℃離心 2 min,離去殘留的洗滌液贰军。
10. 取出吸附柱玻蝌,放入新的 1.5 mL 離心管內(nèi),加入 30-60 μL 洗脫液词疼,靜置 3 min俯树,12,000 rpm 4℃ 離心 2 min,收集 RNA 溶液贰盗。提取的 RNA
即可用于下一步實驗或-70℃保存许饿。
注意事項:
1.由于 RNA 容易降解,提取實驗所用器具應(yīng)除去 RNA 酶舵盈,實驗過程中最好戴一次性潔凈手套陋率、口罩球化,提取的 RNA 溶液可適當(dāng)加入 RNA
保護(hù)因子(貨號:51090,一般 50μLRNA 溶液加入 2μL瓦糟。)
2.裂解液筒愚、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì),操作過程請做好防護(hù)措施菩浙,避免直接接觸皮膚巢掺,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛劲蜻,請立即用
清水或生理鹽水沖洗陆淀,必要時請就醫(yī)。
3. 裂解液如有白色絮狀物析出屬正痴海現(xiàn)象倔约,置于 37℃水浴中溶解即可。